导读:本文包含了型丝氨酸论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:丝氨酸,特异性,蛋白酶,鲫鱼,蛋白,基因,纤维。
型丝氨酸论文文献综述
赵娜,汪国建,龙爽,粟永萍,王涛[1]（2019）在《Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子SPINK7在食管疾病中的研究进展》一文中研究指出Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子7(SPINK7),又名食管癌相关基因2 (ECRG2),是与食管癌发生发展密切相关的抑癌基因。研究显示其在食管癌组织存在表达失调,同时其短串联重复序列多态性与食管癌的易感性关系密切。机制分析表明SPINK7可通过分泌至胞外和留在细胞内两种不同的机制发挥抑癌作用。新近研究表明其表达失调与嗜酸性食管炎的发生有关。本文就SPINK7在食管癌、嗜酸性食管炎等食管相关疾病中的研究进展做一综述,并探讨该分子后续值得研究的问题。(本文来源于《消化肿瘤杂志(电子版)》期刊2019年02期）
李梦思,曹敏杰,刘光明[2]（2018）在《重组鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶制备罗非鱼胶原小肽的工艺条件优化》一文中研究指出肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)能特异性水解蛋白质精氨酸或赖氨酸羧基端肽键,与胰蛋白酶有相似的底物水解特性。本研究以鲫鱼(Crucian carp)为研究对象,通过总RNA提取,PCR扩增等技术克隆得到688bp的MBSP基因序列,进行酵母表达菌株SMD1168-pPICZαA-MBSP的构建与表达,并利用表达获得的MBSP进行罗非鱼胶原小肽的制备。实验中采用单因素分析、甲醛滴定法以及正交实验等方法优化商业猪胰蛋白酶与重组MBSP酶解罗非鱼鱼皮胶原蛋白制备生物活性肽的工艺条件,并以酶解液的水解度和DPPH·清除率为指标衡量酶解效果。在最优条件下比对两种酶的酶解结果,显示重组MBSP的酶解液的水解度略低于商业胰蛋白酶,但其DPPH·清除率提高20%。因此,重组MBSP有望用于酶解明胶制备具有抗氧化活性、免疫调节、ACE抑制活性等特性的生物活性肽,并应用于功能性食品等行业中。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
徐春红,沈丽萍[3]（2018）在《血清内脏脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子水平变化与冠心病心绞痛患者心功能的关联性及临床意义探讨》一文中研究指出目的分析血清内脏脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、不规则趋化因子(Fractalkine)水平变化与冠心病心绞痛患者心功能的关联性及其与疾病进展中的意义。方法 2013年12月-2017年12月我院冠心病心绞痛患者84例为实验组,依据临床综合诊断结果分为实验A组(不稳定型心绞痛患者,n=36)、实验B组(稳定型心绞痛患者,n=48),同期选取52例存在胸部不适症状但行冠状动脉造影检查显示正常的非冠心病患者为对照组。检测比较3组血清Vaspin、Fractalkine与心肌损伤有关指标[肌酸激酶同工酶(CKMB)、肌酸激酶(CK)]水平,并以超声心动图测定对比3组心功能有关指标[左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)]水平,分析血清Vaspin、Fractalkine水平与冠心病心绞痛患者心功能及心肌损伤程度的相关性。结果实验A组及B组血清Vaspin水平均低于对照组,血清Fractalkine水平均高于对照组,且实验A组血清Vaspin水平低于实验B组,血清Fractalkine水平高于实验B组(P<0.05);实验A组及B组LVESD、LVEDD与血清CKMB、CK水平均高于对照组,且实验A组高于实验B组(P<0.05);Spearman相关性分析显示,血清Vaspin水平与LVESD、LVEDD及血清CKMB、CK水平呈显着负相关(P均<0.05),血清Fractalkine水平与LVESD、LVEDD及血清CKMB、CK水平呈显着正相关(P均<0.05)。结论血清Vaspin、Fractalkine参与冠心病心绞痛发生、进展过程,且其表达水平和患者心功能及心肌损伤程度密切相关,对其表达水平进行测定可为临床诊治提供可靠依据。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2018年10期）
李梦思[4]（2018）在《鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的底物特异性研究》一文中研究指出肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)是普遍存在于动物肌肉中的胰蛋白酶类似物。由于MBSP结构与功能间的作用缺乏深入研究,本文对鲫鱼MBSP的底物特异性进行分析,探讨并完善酶结构与功能间的关系,以拓展应用价值。以鲫鱼MBSP为对象,利用基因重组构建8株突变酵母表达菌株SMD1168-pPICZαA-t MBSP,表达产物分别命名为D170S、D170T、D170K、S171A、G193A、G203A、D170T/G203A、G193A/G203A。利用本实验室制备的兔抗鲫鱼MBSP多克隆抗体进行Western blot鉴定,确认重组表达产物为鲫鱼MBSP。利用荧光底物Boc-Phe-Ser-Arg-MCA(BFSR)、Boc-Gln-Arg-Arg-MCA(BQRR)、Boc-Glu-Lys-Lys-MCA(BEKK)和Boc-Val-Leu-Lys-MCA(BVLK)进行酶活力测定,仅4个突变体具酶活力(S171A、G193A、G203A、G193A/G203A)。底物特异性研究结果表明,与野生型MBSP的最适底物BQRR相比,突变体G193A与G193A/G203A无明显变化;突变体S171A的最适底物同为BQRR,但仅能水解BQRR、BFSR,不能水解BVLK、BEKK;突变体G203A的最适底物变为BEKK,且明显偏向于切割含Lys残基的底物。因突变体S171A专一的底物特异性,故对其进行深入分析。圆二色谱、同源建模结果显示,Ser171突变对MBSP的结构稳定性影响不大;分子对接分析结果显示,与野生型MBSP不同的是,底物BVLK、BEKK与突变体S171A的对接能量值由负值变为正值,且BVLK、BEKK作用区域彻底偏离酶分子的催化叁联体与特异性底物结合口袋。由于底物与突变体S171A的作用区域发生变化最终导致突变体S171A只能选择性切割Arg残基,间接提示MBSP的催化叁联体与特异性底物结合口袋在酶水解底物时发挥重要作用。MBSP是使鱼糜制品发生凝胶劣化的原因之一。本文选择两种胰蛋白酶抑制剂对MBSP进行抑制动力学分析,结果显示两种抑制剂对MBSP的抑制关系均属于可逆的竞争型抑制。因此MBSP能够被胰蛋白酶抑制剂抑制,从而在鱼糜制品加工过程中缓解凝胶劣化现象。其次,比较分析MBSP与胰蛋白酶对全蛋白的酶解情况,发现拟穴青蟹主要过敏原均能被MBSP降解,包括耐胰蛋白酶消化的精氨酸激酶。相比于胰蛋白酶及野生型MBSP,突变型MBSP的消化速率最快,仅在1 min就能将精氨酸激酶酶解成小分子片段。综上所述,MBSP经分子改造后,其突变体结构稳定性不变。分子对接技术结果模拟出突变体S171A与底物的作用区域发生变化,而导致突变体S171A底物特异性的变化。本研究中MBSP表达量较高且热稳定性较好,制备较为容易,有望替代商品化的胰蛋白酶。(本文来源于《集美大学》期刊2018-04-09）
李梦思,曹敏杰,刘光明[5]（2017）在《鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的底物特异性研究》一文中研究指出本试验对鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)进行底物特异性研究。通过突变位点设计、重迭延伸PCR等实现鲫鱼MBSP基因的定点突变及重组表达;比较突变酶与野生型MBSP的酶学性质,确定影响MBSP底物特异性的关键氨基酸残基;利用生物信息学手段分析突变前后MBSP底物特异性发生变化的主要原因;最后将突变前后的MBSP与胰蛋白酶共同消化蛋白,进一步验证突变MBSP对底物的选择性切割发生变化。结果显示,重组MBSP(野生型与突变型)于毕赤酵母成功表达;酶学试验结果显示突变MBSP在不改变酶结构的前提下底物特异性发生了变化,并用生物信息学手段得到证实。而且,重组MBSP与胰蛋白酶一样,能水解蛋白产生小肽,因此热稳定性优于胰蛋白酶的重组MBSP有望应用于未来的质谱鉴定。(本文来源于《2017中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2017-11-08）
李梦思,曹敏杰,刘光明[6]（2017）在《鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶在毕赤酵母中的重组表达及其底物特异性研究》一文中研究指出鲫鱼肌肉中存在一种水解特性类似于胰蛋白酶的肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound senne proteinase,MBSP),由于其在生物体内含量少、分离纯化困难,因此有必要利用基因工程技术来大量获得以便进行后续研究。目前,鲫鱼MBSP基因序列已被克隆得到并实现在毕赤酵母菌中的诱导表达。对于其底物特异性的研究,主要采用定点突变引入突变位点来获得突变基因;突变基因分别与克隆载体、表达载体连接,经两轮测序确保表达载体开放阅读框架以及目的片段的完整性后,对带有突变基因的表达载体进行线性化处理以及DNA纯化回收,并利用电转化法将DNA导入到酵母细胞中;直至单菌落长成后做酵母转化子表型鉴定(Mut~+),选择阳性转化子诱导表达;表达产物经底物特异性检测,再结合分子对接方法对其底物特异性发生变化的原因进行分析。SDS-PAGE与Western blot结果表明,鲫鱼MBSP突变体毕赤酵母表达菌株的成功构建及诱导表达;底物特异性检测结果发现,与野生型MBSP相比,突变体S171A丧失了对Lys残基的水解能力;分子对接结果显示,当底物与酶结合口袋以及催化活性中心相互作用时,酶水解底物的能力最强;而当底物与酶的作用部位彻底偏离口袋与活性中心时,酶就不能切割对应底物。由于重组MBSP与胰蛋白酶一样,能水解蛋白产生小肽,因此热稳定性优于胰蛋白酶的重组MBSP有望应用于未来的质谱鉴定。对于生物活性肽的多样性主要取决于不同底物特异性的蛋白酶,因此底物特异性变化的重组MBSP也具有较好的应用价值。(本文来源于《华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议论文集》期刊2017-10-27）
刘瑞[7]（2017）在《猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通过影响紧密连接穿越血脑屏障的机制》一文中研究指出猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是猪链球菌病主要病原菌之一,亦能够引起人的感染,是一种重要的人兽共患病原菌。1998年和2005年曾两次在我国引起重大人员伤亡,临床症状以中毒性休克综合征和脑膜炎为主要特征。目前该菌在全球已经造成1500多人感染发病,威胁最严重的是免疫力低下人群。在越南、泰国,SS2已成为人脑膜脑炎的主要病原。众所周知,细菌引起脑膜脑炎首先要破坏血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)。血脑屏障结构主要由脑微血管内皮细胞构成的,对维持内环境稳态很重要,将血液与中枢神经系统的脑实质分开。本研究以人脑微血管内皮细胞为体外BBB模型,采用转座子突变技术发掘SS2穿越BBB相关的毒力因子,并对其作用机制进行初步研究,以期阐明SS2穿越BBB的机制。1构建一种用于猪链球菌2型突变株文库的新型自杀穿梭质粒为了建立一种用于寻找新毒力相关基因的正向遗传学技术,我们构建了一种新型温敏自杀型穿梭质粒—pMar4s,此质粒中包含来自于pMarA质粒中的Himar1转座系统的TnYLB-1转座元件和Himar1C9转座酶,来自于pSET4s的温敏片段repTAs。在TnYLB-1转座子中间具有卡那霉素(Kan)抗性基因,突变株可以通过温敏片段和Kan抗性进行筛选并构建成文库。本文利用pMar4s质粒成功构建了 ZY05719基因突变株文库,库容量2000株。Southern blot结果显示转座子插入位点单一且随机性强,构建的突变株文库可以用于表型筛选。2猪链球菌2型穿越血脑屏障相关基因的筛选及鉴定人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,hBMEC)是BBB的重要组成部分,SS2具有粘附和侵袭hBMEC的能力。本研究使用转座子质粒pMar4s构建SS2的突变株文库,通过定量和定性细胞侵袭试验筛选到10株不侵袭hBMEC的突变株。通过hBMEC构建的体外BBB模型与突变株相互作用,SS2作为阳性对照,结果显示这10株突变株穿越体外BBB模型的能力明显减弱。转座子TnYLB-1的插入可能使得插入位点基因失活,说明这10个基因可能是影响SS2穿越BBB的毒力因子。3丝氨酸苏氨酸蛋白激酶影响猪链球菌2型穿越血脑屏障从转座子pMar4s构建的ZY05719突变株文库中筛选到一株突变株,不侵袭脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),穿越 BMECs 构建的体外BBB模型的能力显着减弱,经反向PCR鉴定被转座子TnYLB-1插入的基因是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,stk),因此推测stk基因与SS2穿越BBB的能力相关。已有研究表明SS2编码一个单一膜相关STK,是病原菌的一种毒力因子。在本研究中,为了避免转座元件TnYLB-1的影响,构建了基因缺失株Astk和基因互补株C△stk。细胞侵袭试验结果显示缺失株△stk粘附和侵袭细胞的能力以及穿越BMEC构建的体外BBB模型的能力相对于野生株ZY05719和互补株CAstk显着减弱。ZY05719和△stk同样具有重塑hBMEC和鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)细胞骨架的能力,说明stk基因不介导SS2通过跨细胞途径穿越BBB。后面通过WB和共聚焦显微镜观察,显示Astk相对于ZY05719破坏bEnd.3紧密连接蛋白Claudin-5的能力减弱,在相同的作用时间内共聚焦显微镜观察到△stk处理组的Claudin-5断裂和空洞比ZY05719处理组少。ZY05719感染BALB/c小鼠之后能够引起菌血症并在脑脊液中检测到细菌;相反缺失株△stk在小鼠血液中的定殖能力明显减弱,被快速清除,脑脊液中未检测到细菌。综合而言,stk基因的缺失使得SS2粘附和侵袭BMECs的能力减弱甚至消失;没有影响SS2重塑骨架的能力;但是使得SS2破坏紧密连接蛋白Claudin-5的能力减弱,证实SS2通过细胞旁途径穿越BBB。4丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的磷酸化修饰对猪链球菌2型的影响真核生物和原核生物的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在细胞壁合成、应激反应和毒力中起到重要作用。在这项研究中,为了进一步了解磷酸化在猪链球菌调控中的作用,磷酸肽富集分析在SS2鉴定了 41个磷酸肽段,对应31个蛋白,其中14个蛋白是STK特异性的底物,9个蛋白是STK与其他激酶或自身磷酸化共修饰的底物,即STK的底物占总磷酸化蛋白的76%。(本文来源于《南京农业大学》期刊2017-06-01）
王磊,邱建烽,钱岑,朱保建,刘朝良[8]（2016）在《柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂ApKTSPI基因克隆及表达特征分析》一文中研究指出本研究旨在克隆柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(ApKTSPI)基因的cDNA序列并进行序列分析,研究ApKTSPI基因的组织表达分布及病原物免疫刺激后的表达模式,原核表达ApKTSPI。利用RACE-PCR方法扩增柞蚕ApKTSPI基因全长cDNA,生物信息学软件进行序列分析,利用实时定量PCR检测柞蚕ApKTSPI基因的组织分布及免疫刺激后的表达模式,利用pET-28a载体在大肠杆菌BL21中融合表达ApKTSPI。柞蚕ApKTSPI基因的cDNA全长568 bp,开放阅读框编码96个氨基酸,含一个Kazal结构域。ApKTSPI基因在柞蚕5龄幼虫脂肪体中特异性高表达,在核型多角体病毒、大肠杆菌和白僵菌免疫刺激后表达量都能上调,但上调的程度和时间都不同。实验结果为进一步研究其在柞蚕免疫中的功能及作用机理奠定了基础。(本文来源于《第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）》期刊2016-07-01）
曹龙[9]（2016）在《褶纹冠蚌Kunitz型和Serpin B型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆与表达》一文中研究指出本文从褶纹冠蚌(Cristaria plicata)中克隆到了丝氨酸蛋白酶抑制剂Kunitz基因和Serpin B基因的c DNA全长序列,并对其同源性和叁级结构进行了分析,采用定量PCR方法检测这2个基因在褶纹冠蚌肝胰腺、血细胞、闭壳肌、鳃和外套膜组织中的相对表达量,利用PBS、革兰氏阴性菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和脂多糖(LPS)刺激诱导蚌后,检测这2个基因在蚌的血细胞和肝胰腺组织中的表达变化。以质粒pet-32为载体用基因重组技术构建p ET32-Kunitz原核表达载体,利用大肠杆菌表达系统进行表达并纯化出纯度较高的Kunitz的重组蛋白。褶纹冠蚌丝氨酸蛋白酶抑制剂Kunitz型基因的c DNA全长序列为1378bp,其中5’UTR有128 bp;3’UTR有482 bp,含有一个poly A尾;开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长度为768 bp,编码的蛋白质含255个氨基酸。该蛋白序列N端有1个信号肽序列,包含17个氨基酸结构。成熟肽由238个氨基酸组成。该蛋白理论等电点(PI)为8.32,相对分子量为28.7 k Da。其序列与茅竹蛏(Solen grandis)高度相似,为98%。Kunitz型有4个保守序列,空间结构含有6个β折叠和3个ɑ-螺旋。Kunitz型基因在血细胞、肝胰腺、鳃、闭壳肌和外套膜都检测到了表达量,其中在外套膜的表达量是最低的,转录水平最高的组织是血细胞,其次是肝胰腺。嗜水气单胞菌刺激后的实验组褶纹冠蚌,与PBS对照组相比,血细胞和肝胰脏的表达量都在12 h达到最大值,肝胰脏在48 h左右恢复到0 h的表达水平,血细胞在48 h表达量仍然维持在较高水平。在脂多糖刺激组中,肝胰脏和血细胞的mRNA转录水平也是在12 h达到最高值,之后回落,但肝胰脏的增幅更明显。通过质粒p ET-32与目的基因构建重组质粒p ET32-Kunitz在诱导破碎后发现其以可溶性蛋白主要存在于上清中。Kunitz的可溶性蛋白经纯化获得了纯度较高的重组p ET32-Kunitz,经分析确认所得重组蛋白在40 k Da左右,与预测的蛋白大小一致。褶纹冠蚌Serpin B cDNA全长为1565 bp,包括3’端非翻译区362 bp,5’非编码区(UTR)长21 bp,含有典型的腺苷酸信号序列AATAA和Poly A尾。该基因序列包含一个编码393个氨基酸的开放阅读框(ORF),编码区1182 bp,预测蛋白质相对分子量为44.2 k Da,等电点为6.57。与牡蛎(Crassostrea gigas)的同源性最高,为47%。在氨基酸25-391的位置为SERPIN结构域,该蛋白为Serpins超家族蛋白。Serpin B型基因在血细胞、肝胰腺、鳃、闭壳肌和外套膜都检测到了表达量,其在鳃中的转录水平最低,在血细胞中转录水平最高,约为鳃的9.92倍,其次是肝胰脏,约为鳃的6.85倍。嗜水气单胞菌刺激褶纹冠蚌后,与PBS对照组相比,血细胞和肝胰脏的表达量都在6~24 h增长趋势趋于缓和,在48 h达到最大,尤以肝胰脏表现敏感。在脂多糖刺激组中,与PBS对照组相比,肝胰脏在12 h转录水平达到最高,之后在48 h回落到0 h的水平,血液的表达水平0~12 h变化不显着,在24h达到最高值。(本文来源于《南昌大学》期刊2016-05-05）
张建兴[10]（2016）在《血清腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂表达水平与冠心病发生及病变程度的相关性》一文中研究指出目的探讨冠心病(CAD)患者血清腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平变化在CAD发生发展中的相关性。方法选择该院2013年9月至2015年6月116例CAD患者(CAD组)和47例健康者(对照组),其中根据病情严重程度,将CAD组分为急性冠脉综合征(ACS)组56例、稳定型心绞痛(SAY)组60例;根据血管狭窄数量分为3个亚组:1支病变组(1vd组)37例、2vd组38例、3vd组41例;根据Gensini分值分为低积分组35例、中积分组38例、高积分组43例。采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定血清Vaspin水平,分析血清Vaspin水平在各组间的差异及与CAD的相关性。结果 CAD组患者血清Vaspin水平较对照组明显降低,ACS组血清Vaspin水平明显低于SAY组,ACS组和SAY组血清Vaspin水平均低于对照组(P<0.05)。3vd组血清Vaspin水平显着高于1vd组和2vd组(P<0.05),1vd组和2vd组血清Vaspin水平无显着差异(P>0.05)。高积分组和中积分组血清Vaspin水平明显低于低积分组,且高积分组Vaspin水平低于中积分组(P<0.05),Spearman分析显示Vaspin与Gensini积分呈负相关(r=-0.429,P<0.05)。Logistic分析显示,血清Vaspin低水平为CAD的独立危险因素(P<0.05)。结论 CAD患者血清Vaspin水平较低,血清Vaspin水平与冠状动脉病变程度相关。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2016年03期）
型丝氨酸论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)能特异性水解蛋白质精氨酸或赖氨酸羧基端肽键,与胰蛋白酶有相似的底物水解特性。本研究以鲫鱼(Crucian carp)为研究对象,通过总RNA提取,PCR扩增等技术克隆得到688bp的MBSP基因序列,进行酵母表达菌株SMD1168-pPICZαA-MBSP的构建与表达,并利用表达获得的MBSP进行罗非鱼胶原小肽的制备。实验中采用单因素分析、甲醛滴定法以及正交实验等方法优化商业猪胰蛋白酶与重组MBSP酶解罗非鱼鱼皮胶原蛋白制备生物活性肽的工艺条件,并以酶解液的水解度和DPPH·清除率为指标衡量酶解效果。在最优条件下比对两种酶的酶解结果,显示重组MBSP的酶解液的水解度略低于商业胰蛋白酶,但其DPPH·清除率提高20%。因此,重组MBSP有望用于酶解明胶制备具有抗氧化活性、免疫调节、ACE抑制活性等特性的生物活性肽,并应用于功能性食品等行业中。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型丝氨酸论文参考文献
[1].赵娜,汪国建,龙爽,粟永萍,王涛.Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子SPINK7在食管疾病中的研究进展[J].消化肿瘤杂志(电子版).2019
[2].李梦思,曹敏杰,刘光明.重组鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶制备罗非鱼胶原小肽的工艺条件优化[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018
[3].徐春红,沈丽萍.血清内脏脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子水平变化与冠心病心绞痛患者心功能的关联性及临床意义探讨[J].中国实验诊断学.2018
[4].李梦思.鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的底物特异性研究[D].集美大学.2018
[5].李梦思,曹敏杰,刘光明.鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的底物特异性研究[C].2017中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛论文摘要集.2017
[6].李梦思,曹敏杰,刘光明.鲫鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶在毕赤酵母中的重组表达及其底物特异性研究[C].华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议论文集.2017
[7].刘瑞.猪链球菌2型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通过影响紧密连接穿越血脑屏障的机制[D].南京农业大学.2017
[8].王磊,邱建烽,钱岑,朱保建,刘朝良.柞蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂ApKTSPI基因克隆及表达特征分析[C].第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）.2016
[9].曹龙.褶纹冠蚌Kunitz型和SerpinB型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆与表达[D].南昌大学.2016
[10].张建兴.血清腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂表达水平与冠心病发生及病变程度的相关性[J].中国老年学杂志.2016
论文知识图
