导读:本文包含了荚膜糖蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,肺炎,克雷,铵盐,高效,血清,色谱。
荚膜糖蛋白论文文献综述
李轻舟,张燕,戚薇,杜连祥[1]（2004）在《肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白抗体的制备与纯化》一文中研究指出制备了细菌荚膜糖蛋白抗体 ,分别比较了硫酸铵分级沉淀法、菌粉吸附法、裂解液吸附法和菌体吸附法对抗体的纯化效果。实验显示 ,免疫血清经硫酸铵分级沉淀后 ,效价由 1∶6 4 0 0 0降为 1∶32 0 0 0 ,但对非特异性免疫原的吸附明显降低 ;再经吸附法纯化后 ,抗体效价降为 1∶16 0 0 0 ,在 1∶10 0 0的稀释度下 ,纯化抗体对实验范围内非特异性免疫原的吸附全部降为阴性。结果表明 ,应用硫酸铵分级沉淀的方法可以有效去除免疫血清中的杂蛋白和非特异性抗体 ,同吸附法结合使用 ,更能明显减少交叉反应 ,降低抗体的非特异性吸附。该研究为Kp荚膜糖蛋白免疫调节剂的制备和监测奠定基础(本文来源于《药物生物技术》期刊2004年04期）
李轻舟,张燕,戚薇,杜连祥[2]（2004）在《肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白ELISA检测方法的研究》一文中研究指出以肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白为免疫原 ,获得了兔抗肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白抗血清 ,通过硫酸铵分级沉淀与吸附法相结合的方法对抗血清进行纯化 ,并在此基础上建立了肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白间接ELISA检测方法 .该检测方法的检测灵敏度为 0 0 31mg/L ,线性检测范围为 2 5～ 30 0mg/L ,批内误差为 1 0 4 %～ 3 2 2 % ,批间误差为 2 6 1%～ 8 35 % .(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2004年06期）
李轻舟[3]（2004）在《肺炎克雷伯氏菌荚膜糖蛋白的制备和免疫调节作用的研究》一文中研究指出论文研究了肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae，Kp)荚膜糖蛋白的检测方法、发酵工艺、提取工艺和免疫调节作用，确定了Kp发酵制备荚膜糖蛋白的最佳培养基、摇瓶发酵工艺参数、提取工艺条件，建立并改进了Kp发酵液和产品荚膜糖蛋白含量的间接ELISA检测方法，主要内容如下： 1．以Kp荚膜糖蛋白为免疫原，获得了兔抗Kp荚膜糖蛋白抗血清，通过硫酸铵分级沉淀法与吸附法对抗血清进行纯化，制备得到特异性强、效价高的Kp荚膜糖蛋白抗体，并在此基础上建立了Kp荚膜糖蛋白间接ELISA检测法。该法的检测灵敏度为0.031 μg／ml，线性检测范围为2.5μg／ml～30.0μg／ml，批内误差为1.04％～3.22％，批间误差为2.61％～8.35％。实验还研究了Kp发酵液全菌ELISA检测法，为发酵工艺的优化和发酵过程的监控奠定了基础。 2．通过单因素实验和正交实验，确定了适于Kp生长和产荚膜糖蛋白活性物质的最佳培养基配方：蔗糖4％，胰蛋白胨2％，酵母粉0.1％，K_2SO_4 0.1％，MgSO_4 0.025％，KH_2PO_4 0.4％，Na_2HPO_4 0.3％，pH6.0；并确定了最适摇瓶发酵工艺为：接种量2％(种龄5h)，500ml挡板瓶装液量16％，摇床转速150r／min，37℃培养3.5h。摇瓶培养收获发酵液中菌体浓度为1.9×10~(10)cfu／ml，全菌ELISA活性为1.382。在摇瓶实验基础上，进行了7L罐放大实验，发酵液中菌体浓度可达到2.4×10~(10)cfu／ml，全菌ELISA活性为1.286。 3．研究了Kp荚膜糖蛋白的提取工艺，确定了菌体的裂解方法为胰蛋白酶结合NP40和溶菌酶共同裂解；确定了裂解液的浓缩和初步分离采用中空纤维滤膜超滤；确定了糖蛋白的沉淀条件为5倍体积甲醇和甲缩醛(1：4)，剧烈搅拌1h；确定了荚膜糖蛋白的粗提工艺为：发酵液→裂解→超滤→沉淀糖蛋白→去除杂蛋白→沉淀回收；确定了荚膜糖蛋白的纯化工艺为离子交换层析结合凝胶排阻层析。最终确定了发酵液→裂解→超滤→沉淀糖蛋白→去除杂蛋白→沉淀回收→离子交换层析→凝胶排阻层析的Kp荚膜糖蛋白制备工艺。采用以上工艺的摇瓶发酵液提取后的荚膜糖蛋白粗品产量为2.02g／L发酵液，其有效成分含量为10.2％(相当于0.206 g／L发酵夜)，粗品经纯化，所得荚膜糖蛋白产品的产量为0.151g／L发酵液，其中有效成分含量为81.3％(相当于0.123 g／L发酵液)，纯化后的得率为59.7％，纯度是粗品摘要纯度的8倍。 4.应用HPLC法对制备的荚膜糖蛋白和必思添进行成分分析，结果发现在实验所采用的色谱条件下，实验制备的荚膜糖蛋白组分单一，没有其它杂蛋白，且出峰时间与必思添临近，说明产品与必思添为同类物质。 5.采用ConA体外刺激淋巴细胞增殖试验(MTT法)对本实验制备产品和必思添增强细胞免疫活性的作用进行研究，结果发现，本实验制品和必思添均能刺激淋乙绷胞增殖，并存在一定的剂量关系;在相同剂量下，实验所制备的KP荚膜糖蛋白的免疫活性高于必思添，如当刺激剂量为20协g/m1时，实验制备的Kp荚膜糖蛋白刺激后淋巴细胞的57Onm吸光值为0.647士0.024(x士s，n=5)，高于必思添组的吸光值0.547士0.017(x士s，n=5)，且两者均高于对照组的吸光值0.531士0.017(x士s，n二5)。(本文来源于《天津科技大学》期刊2004-01-01）
葛新[4]（2002）在《肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白的提取纯化及其免疫调节作用的研究》一文中研究指出肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae，Kp)荚膜糖蛋白是一种免疫调节剂，国外已开发为免疫调节药必思添(Biostim)。本文在前人工作的基础上对国内临床分离的肺炎克雷伯菌Kp-9株经过细菌裂解、抽提、去脂、去除杂蛋白和有机溶剂沉淀获得荚膜糖蛋白粗产品。经多次重复上述提取过程表明该方法有良好的重复性和稳定性。 本文采用季铵盐沉淀法对粗产品进行部分纯化，分离其中的中性糖蛋白和酸性糖蛋白，最佳分离方案为：pH=7.0，样品浓度为1％，CTAB浓度为3％。对分离后的两种成分进行免疫斑点试验，表明活性成分存在于中性糖蛋白中。纯度由粗产品的29.99％提高到53.75％。继而采用制备型反相色谱法对粗产品和部分纯化产品进一步纯化，其纯度分别达到93.4％和96.3％。纯品的保留时间为4.999分钟，与必思添(保留时间5.001分钟)非常接近，其蛋白含量为33.0％、总糖24.7％、葡萄糖醛酸4.1％，与必思添报道(蛋白质30-45％，中性多糖30-40％，葡萄糖醛酸4％)基本一致，仅糖含量略偏低。本试验用高效液相色谱法测定了Kp荚膜糖蛋白的分子质量。结果必思添的保留时间为13.5分钟，分子质量55036D；本文提取的Kp荚膜糖蛋白保留时间为12.86分钟，分子质量为60634D。两者很接近，提示为同一物质。 Kp荚膜糖蛋白粗产品免疫功能检测采用淋巴细胞转化试验(MTT法)和溶血空斑试验，分别测定细胞免疫和体液免疫功能。结果4组剂量样品对T细胞增殖均有不同程度的刺激作用，以20μg/ml组刺激作用最强。溶血空斑试验用20μg/只样品免疫小鼠，结果试验组的抗体形成能力为25.667±2.965，显着高于对照组(P＜0.01)，与必思添组(20μg/只)相当(P＞0.05)。 人津厂科人学硕1：学位论文 本试验还观察了即荚膜糖蛋白粗产品对小鼠细菌感染的保护作用。 Kp荚膜糖蛋白分为低剂量组（3mg／k体重）和高剂量组6 体重L 免疫小队，结果大肠埃希菌组的高剂量组小鼠存活率为87．5％，与对照 组（存活率12＊％）相比P叩刀5：金黄色葡萄球菌组小鼠存活率低剂量 组为 87．5O，高剂量组为 100％，均显着高于对照组（前者 P＜0．05，后者 P＜0刀1人接受即荚膜糖蛋白注射的动物在观察过程中均未发现不良反 应。 细菌感染保护试验结束后，用ELISA法检测小鼠循环抗体效价。结 果显示大肠埃希菌组中低剂量组抗体平均效价为1：443，高剂量组为 1：508；金黄色葡萄球菌组两者分别为1：408和1：487，与对照组（1：127〕 相比均有显着性差异（P＜0刀1）。 本试验进一步证实筛选的荚膜糖蛋白产生菌Kpg株的实用效果，并 进一步确定了实验室水平制备荚膜糖蛋白的工艺条件及其体内外的免疫 调节作用，为新型日服免疫调剂必思添的国产化奠定了初步基础。(本文来源于《天津医科大学》期刊2002-05-01）
荚膜糖蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白为免疫原 ,获得了兔抗肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白抗血清 ,通过硫酸铵分级沉淀与吸附法相结合的方法对抗血清进行纯化 ,并在此基础上建立了肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白间接ELISA检测方法 .该检测方法的检测灵敏度为 0 0 31mg/L ,线性检测范围为 2 5～ 30 0mg/L ,批内误差为 1 0 4 %～ 3 2 2 % ,批间误差为 2 6 1%～ 8 35 % .
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
荚膜糖蛋白论文参考文献
[1].李轻舟,张燕,戚薇,杜连祥.肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白抗体的制备与纯化[J].药物生物技术.2004
[2].李轻舟,张燕,戚薇,杜连祥.肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白ELISA检测方法的研究[J].生物化学与生物物理进展.2004
[3].李轻舟.肺炎克雷伯氏菌荚膜糖蛋白的制备和免疫调节作用的研究[D].天津科技大学.2004
[4].葛新.肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白的提取纯化及其免疫调节作用的研究[D].天津医科大学.2002
论文知识图
