那君李占全苗志林栾波刘莉
（1辽宁中医药大学辽宁沈阳110000；2辽宁省人民医院心内科辽宁沈阳110016）
【摘要】目的：研究分析淫羊藿苷对于心肌细胞分化的影响。方法：体外培养人骨髓间充质干细胞，提取第三代骨髓间充质干细胞，分为对照培养组和诱导培养组，对照培养组给与适当环境进行培养，诱导培养组采用淫羊藿苷为诱导剂进行培养，连续观察一个月，采用流式细胞技术检测心肌样细胞分化率并比较。结果：诱导培养组心肌样细胞分化率明显高于对照培养组，P均＜0.05，均具有统计学意义。结论：淫羊藿苷可能促使骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化，值得进一步研究。
【关键词】淫羊藿苷；骨髓间充质干细胞；心肌细胞分化
【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）10-0212-02
近年来经验研究发现心血管疾病已成为危害人类健康主要疾病之一，尽管治疗心血管药物以及手术治疗心脏技术一直在不断的提高，但是其仍是我国死亡率居高不下的疾病。传统观念认为心脏内的心肌细胞一旦损伤就不可能再次生成新的细胞。那么这些损伤心肌细胞都应该怎么办呢？研究显示骨髓间充质干细胞可以使损伤或者坏死的心肌细胞再次生成[1]。随着研究发展，骨髓间充质干细胞可以分化造血功能的细胞，还可以向多种造血功能组织迁移或者分化相应的组织细胞等。淫羊藿苷可以促使骨髓间充质干细胞分化出心脏内的心肌细胞分化，减轻心血管疾病发生[2]。作者采用淫羊藿苷诱导心肌细胞分化，经过观察四个月，临床效果显著，现报道如下：
1.资料与分析
1.1实验材料
第三代成人骨髓间充质干细胞株（军事医学科学院），淫羊藿苷（标准品，中国药物分析研究所），J-26离心机（美国贝克曼公司），流式细胞仪（美国贝克曼公司）。
1.2方法
体外培养人骨髓间充质干细胞，提取第三代骨髓间充质干细胞，分为对照培养组和诱导培养组，对照培养组给与适当环境进行培养，使骨髓间充质干细胞自行向心肌细胞分化；诱导培养组在给与适当培养环境的基础上，采用淫羊藿苷为诱导剂进行培养，连续观察四个月，采用流式细胞技术检测心肌样细胞分化率（即心肌特异性肌蛋白Ⅰ、连接蛋白43表达阳性的细胞百分比），并比较。
1.3统计学处理
对文中所得数据进行统计学处理，采用SPSS15.0软件进行分析，计量资料采用t检验，计数资料采用x2检验，P＜0.05为有统计学意义。
2.结果
分别采用不同的方式进行培养，一个月后，采用流式细胞技术检测心肌样细胞分化率，并比较。结果发现：诱导培养组心肌样细胞分化率明显高于对照培养组，P均＜0.05，均具有统计学意义。见表。
两组心肌样细胞分化率情况(x-±S)
组别cTnCX43
对照培养组0.78±0.050.93±0.11
诱导培养组7.02±0.367.69±0.51
3.讨论
随着社会发展人们生活水平提高和压力的增大，心血管疾病发病率呈逐年增高趋势，导致患者出现心力衰竭疾病增多，患有心力衰竭的原因是由于心肌梗死后导致心肌细胞数量大量减少及继发性心脏疾病引起，心肌细胞是终末分化细胞，坏死或者是损伤后就不可能生成新的细胞，坏死的心肌会由纤维组织给与修复。虽然有研究显示心肌细胞中也含有干细胞，但是经过检测发现其干细胞数量少，没有能力可以再生成新的细胞组织，所以这种组织并不能挽救受损的心肌细胞。近年来研究出细胞移植可以治疗心血管疾病，它是直接导入新的细胞进入人体心脏，诱导心脏细胞增殖，并且分化具有功能心肌细胞，或者修复心肌梗死以及心脏功能障碍的心肌细胞，从而代替坏死细胞、功能障碍心肌细胞以及组织，完善受损心脏组织，增加心脏功能[3]。研究发现骨髓中的干细胞对心肌细胞具有一定的修复作用，骨髓间充质干细胞具有多元化潜能，它不仅仅可以分化造血骨质细胞，还可以分化造血以外的细胞组织迁移，定位分化等。骨髓间充质干细胞主要表现为多项分化，在不同诱导条件下不仅可以向骨、软骨等组织细胞分化，而且还可以分化中胚层细胞等。骨髓间充质干细胞一般是从自己身体取材，没有任何免疫排斥问题[4]。
中医学上认为肾藏精，肾主骨生髓，髓又有骨髓、脊髓和脑髓之分，这三者都属于肾中精气所化生。肾主生殖是通过肾精实现的。而干细胞的自我更新可以看作是肾主生殖功能在细胞学水平上的体现，淫羊藿具有温阳补肾的作用，淫羊藿苷是淫羊藿主要活性成分，对体外培养的骨髓细胞DNA合成率有一定促进作用。研究证明淫羊藿苷可以促进骨髓间充质干细胞增多生成，机体内的DNA合成增加，并且能够提高其他诱导剂诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞，增加其分化转化率。大量研究显示骨髓间充质干细胞可以分化心肌细胞，但是对于分化出的心肌细胞是否具有心肌细胞功能还是需要进一步证实。由于骨髓间充质干细胞分化细胞是具有特性而且没有其他排斥反应，在研究中有着不可多得的优点，可以做细胞移植功效[5]。
作者以第三代体外培养人骨髓间充质干细胞作为研究对象，分别给与适当环境和采用淫羊藿苷为诱导剂进行培养，连续观察一个月后，采用流式细胞技术检测心肌样细胞分化率，并比较。结果发现：诱导培养组心肌样细胞分化率明显高于对照培养组，P均＜0.05，均具有统计学意义。从而可以看出，淫羊藿苷可能促使骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化，值得进一步研究。
【参考文献】
[1]王艳，王海萍，吕洋.中药制剂诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化[J].中国组织工程研究，2014,18（1）:155-160.
[2]朱鸿飞，郑军，徐小燕等.不同浓度淫羊藿苷修复骨损伤：争议与探索[J].中国组织工程研究，2014,18（2）:302-306.
[3]翟远坤，李志忠，陈克明等.淫羊藿苷对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及成熟的影响[J].中药材，2011，34(6)：917-922.
[4]宋鹏，王鸣刚，姚娟等.淫羊藿苷对rBMSCs成骨和成脂分化的影响[J].中国实验方剂学杂志，2012，18(20)：200-204.
[5]周建，葛宝丰，陈克明等.淫羊藿苷促进体外培养骨髓间充质细胞成骨性分化活性强于蛇床子素[J].中国生物化学与分子生物学报，2013，29(7)：667-673.