柳燕（新疆喀什地区第一人民医院药剂科844000）
【摘要】目的探讨金银花等几种中草药对痢疾杆菌的体外抑制效果。方法选取金银花、五倍子、黄连、连翘、蒲公英和穿心莲6种中草药，分别提取有效成分，然后在体外测定它们对痢疾杆菌的抑制效果。结果6种中草药对痢疾杆菌的抑制效果各不相同，其中黄连和连翘的抑制效果最佳。结论各种中草药对痢疾杆菌的抑制效果存有一定的差异。
【关键词】金银花中草药痢疾杆菌体外抑菌效果测定
痢疾杆菌是一类传染性高且危害极大的革兰氏阴性菌，为引起人类细菌性痢疾最常见的病原菌[1]。由于抗生素的滥用，常见抗生素对痢疾杆菌的抑制效果明显降低，治疗相关疾病的困难越来越多。由于中草药普遍具有耐药性少、副作用小以及不易残留等一系列优点，使用中草药治疗痢疾杆菌的方法越来越备受国内外众多学者的关注。本文作者分别提取6种中草药的有效成分，分别进行体外抑菌活性测定。具体内容现整理报道如下：
1材料与方法
1.1材料
所用中草药包括金银花、五倍子、黄连、连翘、蒲公英和穿心莲。所用菌种为痢疾杆菌，有本市人民医院传染病科提供。
1.2测定方法
1.2.1培养基的配制培养基包括牛肉膏蛋白胨固体培养基及牛肉膏蛋白胨液体培养基两种。牛肉膏蛋白胨固体培养基：蛋白胨10g、牛肉膏3g、琼脂18g、氯化钠5g加双蒸水至1000ml，混匀后，调节pH至7.4，然后高压蒸汽灭菌，然后于无菌操作台内倒平板。
牛肉膏蛋白胨液体培养基：蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化钠5g，然后加蒸馏水至1000ml，调节pH至7.4，然后高压蒸汽灭菌。
1.2.2中草药有效成分的制备分别称取金银花、五倍子、黄连、连翘、蒲公英和穿心莲50.00g，然后加蒸馏水500ml，煮沸半小时，然后提取液用5层纱布过滤，向药渣中加双蒸水500ml，再次煮沸半小时，过滤后将所有过滤液浓缩至50ml，此时的生药浓度为1g/ml，储存于4℃冰箱。
1.2.3菌悬液的制备将痢疾杆菌的菌种于37℃条件下活化3代，然后用培养液稀释至106cfu/ml，储存于4℃冰箱。
1.2.4抑菌效果的体外测定用移液枪向事先准备好的培养皿内滴0.1ml痢疾杆菌稀释液，用无菌玻璃棒涂布均匀后在其上放置6个无菌杯，分别向杯内注入0.1ml不同的中草药提取液，然后再做2个平行样，然后放置于37℃恒温箱中培养1d。量取各个抑菌圈的直径，计算平均值。
1.2.5最小抑菌浓度的测定[2]所用培养基为牛肉膏蛋白胨液体培养基，接种后培养1d，然后向各个标记好的试管内分别加入对应的中草药提取液0.1ml，浓度由高到低逐渐降低，每次均降低为原来浓度的50%。
1.2.6最低杀菌浓度的测定[3]分别吸取上述无细菌生长的各试管培养物0.1ml，然后移种于牛肉膏蛋白胨的培养基上，涂布后置于37℃过夜培养。观察是否有细菌生长，将培养基上无细菌生长的中草药浓度作为最低杀菌浓度。
2结果
3讨论
本次试验结果表明，金银花、五倍子、黄连、连翘、蒲公英和穿心莲6种中草药提取液对痢疾杆菌的抑制效果明显不同，其中黄连和连翘的抑制效果较高，而穿心莲、金银花以及蒲公英的抑制效果较差。对各中草药的最小抑菌浓度和最低杀菌浓度进行研究，结果表明，黄连和连翘的最低杀菌浓度及最小抑菌浓度均较低，表示其有效成分能在较低的浓度下抑制、杀死痢疾杆菌，因此，黄连和连翘抑制和杀死痢疾杆菌的能力较强。有研究表明，蒲公英抑菌的有效成分主要存在于40%、90%的乙醇洗脱液中，其水提物的抑菌作用很差。因此，不同中草药抑菌的有效成分提取的方法可能存在较大的差异。关于各中草药的提取工艺需进一步深入研究。
参考文献
[1]周小楠,董群.金银花等6种中草药对痢疾杆菌体外抑菌效果研究[J].安徽农业科学,2012,40(6):3278-3279.
[2]杨淑文.32种中草药抑菌活性的比较研究[J].安徽农业科学,2011,39(3):1361-1362．
[3]李仪奎，金若敏．中药药理实验方法学[M]2版.上海:上海科学技术出版社,2006:756-758.