转基因小球藻论文-吴海月,骆文玉,张谦,刘丽丽

转基因小球藻论文-吴海月,骆文玉,张谦,刘丽丽

导读:本文包含了转基因小球藻论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:小球藻,生长动力学,比生长速率,代时

转基因小球藻论文文献综述

吴海月,骆文玉,张谦,刘丽丽[1](2013)在《转基因小球藻生长动力学、藻粉和油脂产量的研究》一文中研究指出对3株导入外源基因的转基因小球藻(Chlorella ellipsoidea SD-0702,C.ellipsoidea SD-0705,C.ellipsoidea SD-0706)进行生长动力学、藻粉产量和产油脂能力的研究,并且与野生型小球藻(C.ellipsoidea SD-0701)进行比较.结果表明:(1)SD-0705的比生长速率最大,代时最短,与SD-0706的比生长速率均高于SD-0701,SD-0702则低于SD-0701;(2)SD-0705和SD-0706的藻粉得率均高于SD-0701,SD-0702则较野生型小球藻低;(3)SD-0705的油脂产量最高,为0.470 g/L,高于SD-0701,其他2株转基因小球藻的油脂产量均低于野生型小球藻.由此筛选出SD-0705作为藻粉和油脂的高产藻株.(本文来源于《天津师范大学学报(自然科学版)》期刊2013年03期)

李瑶,王雷,付玉杰[2](2013)在《制备微藻油脂的转基因小球藻生长的影响因素分析》一文中研究指出利用从加拿大引进的转基因小球藻(Chlorella vulgaris)制备微藻油脂,探讨影响小球藻生长的条件,如培养基pH、培养温度等,以期获得脂肪酸组成以C16和C18为主的藻株及培养条件。结果表明,将转基因小球藻接种在氮磷质量比为4∶3、pH 8.5的GM-SC培养基中,在28℃进行培养,最终可得到生产状况较好、生长速度较快的小球藻。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2013年08期)

左明,王长海[3](2010)在《微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响》一文中研究指出研究了锌、钼、钴、铜、锰、铁6种微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响.通过单因子实验确定了此6种微量元素促进转基因小球藻生长及胞内植酸酶表达的浓度范围,通过正交实验确定了锌、钼、钴、铜、锰促进转植酸酶基因小球藻生长的最佳浓度,获转植酸酶基因小球藻最大生物量产量的浓度依次为0.10、0.015、0.01、0.015、0.8μmol/L;获转植酸酶基因小球藻最高植酸酶比活值的浓度依次为0.10、0、0.04、0.015、0.4μmol/L.利用微量元素优化配方培养转植酸酶基因小球藻,可使胞内植酸酶比活值显着提高,但微藻生物量产量有所下降.(本文来源于《烟台大学学报(自然科学与工程版)》期刊2010年02期)

吴玉娟[4](2007)在《构建转基因细胞模型筛选小球藻糖蛋白预防肿瘤作用的研究》一文中研究指出本文在国内首次报道了从小球藻中提取的一种糖蛋白具有预防肿瘤作用。首先通过热水浸提、脱蛋白、醇析等步骤从小球藻中分离出一种糖蛋白,并对提取工艺中的料水比、温度、提取时间、提取次数等单因素进行优化以达到最佳提取效果。其次机体内的Ⅱ相酶在防治肿瘤发生过程中起着非常重要的作用,Ⅱ相酶基因启动区有一保守的DNA基序被称为抗氧化反应元件(ARE),可调控下游相关基因表达。据此原理,以TK为基本启动子,将人工合成的ARE与绿色荧光蛋白(GFP)基因相串联,构建ARE调控的报告载体pARE-TK- GFP/neo和对照载体pTK-GFP/neo。分别转染HepG2细胞用G418筛选出阳性克隆。然后在阳性细胞中加入小球藻糖蛋白溶液,作用48h后检测细胞的相对荧光强度,从而表明其对肿瘤的化学预防效果。具体研究内容及结果如下:1.对小球藻糖蛋白提取工艺中的各单因素进行正交实验,确定了小球藻糖蛋白的最佳提取条件为:料水比1:20,在温度70℃下提取2次,每次6h。在此条件下糖组分得率最高。对所提取的糖蛋白进行凝胶柱层析鉴定和SDS-PAGE电泳鉴定,结果表明其为电泳纯单一糖蛋白,据蛋白质标准曲线可得出该糖蛋白分子量约为63.7KDa。2.应用重组PCR技术,从pRL-TK上扩增重组TK启动子,并在其基本启动子上游创建特异性酶切位点Sac I。第一轮PCR获得500 bp和150 bp两个片段,第二轮PCR获得635 bp的重组TK启动子,经电泳初步鉴定正确后克隆入pMD18-T载体中又经酶切鉴定正确。扩增后的重组TK启动子克隆入pEGFP中构建载体pTK-GFP,并在其上游插入ARE片段构建pARE-TK-GFP,两者均经PCR鉴定正确。最后从以上两载体中分别扩增TK和ARE-TK目的片段克隆入载体pEGFP-N1中,构建最终表达载体pTK-GFP/neo和pARE-TK-GFP/neo,酶切和测序鉴定结果表明目的片段插入位置正确且无突变。3.两表达载体分别用脂质体法转染HepG2细胞后,用800μg/ml G418筛选出阳性细胞克隆HepG2-TK-GFP和HepG2-ARE-TK-GFP,在荧光显微镜下可见明显的绿色荧光。阳性克隆细胞经扩大培养后加入不同浓度梯度的糖蛋白溶液,同时用已知化学预防剂PDTC和香菇多糖作对照。结果显示:糖蛋白在200μg/ml时诱导效果最好,且糖蛋白浓度与GFP相对荧光度间存在剂量效应关系,而在对照细胞中未发现与受试物有剂量效应关系。本实验构建了一个可用于体外快速筛选诱导Ⅱ相酶化合物的转基因细胞模型,为各种天然或人工合成具有预防肿瘤作用化合物的筛选奠定了基础,同时也可为小球藻糖蛋白作为肿瘤预防剂的开发提供了初步的实验依据。(本文来源于《扬州大学》期刊2007-05-01)

郑旭龙[5](2006)在《转植酸酶基因小球藻的培养及其生理生化分析》一文中研究指出本研究在已经验证成功地将植酸酶基因转入海水小球藻并检测到植酸酶表达的基础上,进行植酸酶表达稳定性分析,对转基因小球藻进行生理生化分析,考察培养条件、培养基组成对转基因小球藻的生长及植酸酶酶活的影响,得出优化组合,为今后大规模高密度培养打下基础,对于深入开发微藻资源及植酸酶的应用具有深远的意义。 通过叁种方法对转基因小球藻进行破碎,比较蛋白和植酸酶酶活的测量数值,得出超声波破碎法对细胞壁的破碎更完全,能获得更高的测量值。确定使用超声波破碎法破壁的最佳时间为8min。 从G418抗性平板上挑42个转植酸酶基因小球藻单克隆藻株,培养到一定量,通过植酸酶活性比较,筛选出植酸酶酶活较高的8株藻,经过7次传代,植酸酶活并无衰减趋势,证实植酸酶基因在小球藻中稳定表达。对转基因小球藻产生的植酸酶进行酶性质研究,此酶最适作用pH值为pH3.8和pH6.0,最适作用温度为65℃,耐热能力较好,有利于饲料加工过程酶活的保持。在相同培养条件下,转基因藻与未转基因藻生理指标并无明显差异,说明外源植酸酶基因的转入对小球藻的生长及生理指标无明显影响。 考察接种量、温度、pH、光强对小球藻生长与植酸酶酶活的影响。单因素实验结果:接种量浓度取0.074~0.126mg/ml之间,温度22.5℃,pH值8~10,光强范围:1000~5000lx。做温度、pH、光强叁因素叁水平的正交实验得出:获得转基因小球藻最大密度的优化组合为:22.5℃,pH值9.5,光强4500±100lx;获得最大植酸酶活的优化组合为:温度25℃,pH值8,光强1000±100lx,并通过验证实验得以证实。 考察碳源、氮源、磷源、维生素对转基因小球藻的生长及植酸酶酶活的影响。单因素实验结果:0.2g/L NaHCO_3;0.5g/L NH_4NO_3;0.02g/L KH_2PO_4(获得最大比生长速率μ_(max)),0.08g/L KH_2PO_4(获得最大植酸酶比活值P.A_(max));0.3mg/L VB_1(μ_(max)),0.6mg/LVB_1(P.A_(max));4μg/L VB_(12)(μ_(max)),1μg/L VB_(12)(P.A_(max))。对NaHCO_3,NH_4NO_3,KH_2PO_4,VB_1与VB_(12)做五因素四水平的正交实验,结果表明,获得转基因小球藻最大密度的优化组合为:A_4B_1C_1D_1E_1,即:NaHCO_3 0.4g/L,NH_4NO_3 0.25g/L,KH_2PO_4 0.02g/L,VB_1 0.15mg/L与VB_(12) 0.5μg/L。获得转基因小球藻最大植酸酶比活值的优化组合为:A_3B_2C_3D_3E_2,即:NaHCO_3 0.3g/L,NH_4NO_3 0.50g/L,KH_2PO_4 0.08g/L,VB_1 0.60mg/L与VB_(12) 2.0μg/L。A_3B_2C_3D_3E_2组合所得藻密度分别是基础培养基和f/2培养基的1.11和1.36倍,植酸酶比活值分别是基础培养基和f/2培养基的2.76和2.78倍。(本文来源于《大连理工大学》期刊2006-12-14)

韩兴梅,李元广,魏晓东,孙勇如,王义琴[6](2006)在《转兔防御素基因小球藻异养培养的培养基优化研究》一文中研究指出在氮源种类筛选的基础上,采用Plackett-Burman实验设计并结合单因素实验对转兔防御素基因小球藻异养培养的培养基进行了优化。实验结果表明,采用优化后的Knop异养培养基在250mL摇瓶中进行异养培养,藻细胞密度从优化前的1.5g/L提高到优化后的5.11g/L;摇瓶和5L生物反应器异养培养表明,Knop异养培养基中藻细胞浓度分别为优化前培养基的3.39倍和3.17倍,而兔防御素(NP-1)表达能力基本不变。(本文来源于《水生生物学报》期刊2006年05期)

韩兴梅,李元广,魏晓东,李兴武,孙勇如[7](2006)在《转兔防御素基因小球藻培养的营养模式研究》一文中研究指出在250mL摇瓶中研究了光自养、异养、混合营养3种营养模式对转兔防御素基因(NP-1)小球藻(Chlorella)的生长、NP-1表达量、总蛋白质含量、pH、葡萄糖消耗以及光衰减等几个方面的影响。结果表明,异养培养为转NP-1基因小球藻的最适营养模式。在此基础上,采用5,15,30L生物反应器补料分批异养培养转NP-1基因小球藻,细胞质量浓度分别达到3.67,4.87,6.39g/L。(本文来源于《海洋科学》期刊2006年07期)

韩兴梅,李元广,魏晓东,孙勇如,王义琴[8](2004)在《氮源对转基因小球藻异养生长及兔防御素表达的影响》一文中研究指出在250 ml摇瓶中研究了氮源对转兔防御素(NP-1)基因小球藻的异养生长和NP-1表达的影响,结果表明,转NP-1基因小球藻异养培养的最适氮源为硝酸钾和酵母粉,二者的最佳浓度分别为0.9和9 g/L,藻细胞密度达5.11 g/L,是不添加硝酸钾时细胞密度的1.55倍,而NP-1表达量基本不变. 5 L生物反应器分批培养结果表明,转NP-1基因小球藻在含有硝酸钾和酵母粉两种混合氮源的培养基中培养时,硝酸钾被快速消耗而有机氮源充足,藻细胞内的叶绿素和蛋白质含量下降,但NP-1表达量基本不变.(本文来源于《过程工程学报》期刊2004年01期)

王义琴,王鹏,赵世民,白琴华,张利明[9](2003)在《转基因小球藻的新型生物反应器》一文中研究指出作为单细胞真核生物,小球藻具有与大肠杆菌和酵母等类似的优点,繁殖迅速、培养简单、适合大规模培养,是一个理想的生产系统和受体系统。而且小球藻富含人和动物所必需的氨基酸、维生素、磷、钙、铁等营养成分,被认为是极有营养价值的保健食品。以它为载体生产转基因药物,可以简化下游工艺,尤其是粗制品可望制成口服制剂,既免去了分离提纯的繁琐工艺,又(本文来源于《中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编》期刊2003-10-01)

黄国存,孟颂东,王荣,杨怀义,田波[10](2002)在《小球藻NADP-谷氨酸脱氢酶的cDNA克隆及转基因烟草分析(英文)》一文中研究指出用RT_PCR方法从小球藻 (Chlorellasorokiniana)中克隆了铵诱导表达的以辅酶Ⅱ为辅基的谷氨酸脱氢酶(NADP_GDH)基因的cDNA片段 ,DNA测序分析表明与已报道的该基因cDNA序列同源性为 94%。将NADP_GDH基因先插入到SPDK6 2 1质粒的 2CaMV35S启动子和Ω增强序列之后 ,然后将 2CaMV35S_Ω_GDH_NOS表达单元构建到RokⅡ质粒的HindⅢ与EcoRⅠ之间 ,从而获得高效植物表达载体。将RokⅡ_GDH质粒转移到根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)EHA10 5中 ,对烟草 (NicotianatabacumL .)进行转化并得到阳性转化后代。对转基因烟草分析表明 ,在低氮培养基或在低氮蛭石中其生长速度和叶片数明显高于对照 ;铵毒性实验表明 ,无论在低铵或高铵条件下 ,接种在MS固化培养基上的转基因绿叶圆片存活时间长 ,叶绿素含量高。这些结果说明外源NADP_GDH增强了植物对氮素的吸收和利用。另外 ,转化后代还表现了对除草剂膦化麦黄酮 (PPT)具有较强的抗性 ;培养在含有不同浓度PPT的MS固化培养基上的转基因绿叶圆片 ,其愈伤化程度明显高于对照 ;在MS培养基中用 0 .5 μg/mL的PPT可以代替卡那霉素对转化后代进行筛选 ,这暗示NADP_GDH基因可以作为一种新的选择标记用于植物基因工程的研究。(本文来源于《Acta Botanica Sinica》期刊2002年03期)

转基因小球藻论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

利用从加拿大引进的转基因小球藻(Chlorella vulgaris)制备微藻油脂,探讨影响小球藻生长的条件,如培养基pH、培养温度等,以期获得脂肪酸组成以C16和C18为主的藻株及培养条件。结果表明,将转基因小球藻接种在氮磷质量比为4∶3、pH 8.5的GM-SC培养基中,在28℃进行培养,最终可得到生产状况较好、生长速度较快的小球藻。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

转基因小球藻论文参考文献

[1].吴海月,骆文玉,张谦,刘丽丽.转基因小球藻生长动力学、藻粉和油脂产量的研究[J].天津师范大学学报(自然科学版).2013

[2].李瑶,王雷,付玉杰.制备微藻油脂的转基因小球藻生长的影响因素分析[J].湖北农业科学.2013

[3].左明,王长海.微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响[J].烟台大学学报(自然科学与工程版).2010

[4].吴玉娟.构建转基因细胞模型筛选小球藻糖蛋白预防肿瘤作用的研究[D].扬州大学.2007

[5].郑旭龙.转植酸酶基因小球藻的培养及其生理生化分析[D].大连理工大学.2006

[6].韩兴梅,李元广,魏晓东,孙勇如,王义琴.转兔防御素基因小球藻异养培养的培养基优化研究[J].水生生物学报.2006

[7].韩兴梅,李元广,魏晓东,李兴武,孙勇如.转兔防御素基因小球藻培养的营养模式研究[J].海洋科学.2006

[8].韩兴梅,李元广,魏晓东,孙勇如,王义琴.氮源对转基因小球藻异养生长及兔防御素表达的影响[J].过程工程学报.2004

[9].王义琴,王鹏,赵世民,白琴华,张利明.转基因小球藻的新型生物反应器[C].中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编.2003

[10].黄国存,孟颂东,王荣,杨怀义,田波.小球藻NADP-谷氨酸脱氢酶的cDNA克隆及转基因烟草分析(英文)[J].ActaBotanicaSinica.2002

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