导读:本文包含了胚脑细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:脑细胞,溶液,玻璃,玻璃化,回收率,活性,磷脂。
胚脑细胞论文文献综述
胡军祥,赵玉勤[1]（2005）在《大鼠胚脑细胞玻璃化冷冻保存研究》一文中研究指出在2 0℃室温下,用玻璃化冻存液(含5 .5 m ol/ L乙二醇和1m ol/ L蔗糖)对大鼠胚脑细胞进行一步法和两步法深低温保存.在冻存1、3、7、15 d后,37℃水浴快速复温,洗脱冻存保护剂,检测细胞活性.结果表明:两步法0 .5 min平衡组,在玻璃化冻存15 d后,胚脑细胞的存活率和SDH活性分别为(78.6±3.3) %和0 .6 9±0 .0 5 ,细胞活性水平最高.此外,一步法1m in平衡组,冻存15 d后,细胞活性也较高,细胞存活率和SDH活性分别为(77.9±4 .7) %和0 .6 8±0 .0 4 .冻存后的胚脑细胞培养15 d后,生长良好并能伸出突起与相邻的神经细胞建立联系(本文来源于《浙江大学学报(理学版)》期刊2005年02期）
胡军祥,应华波,周国英,赵玉勤[2]（2005）在《微波复温对玻璃化冻存大鼠胚脑细胞活性的影响》一文中研究指出以孕17～19d的SD大鼠为材料,对胚脑细胞进行玻璃化深低温保存,在冻存3、10、20、30、60d后,胚脑细胞样品分别采用常规的38℃水浴复温和微波复温即在300mL10℃水中,控制微波功率为800W,频率2450MHz,复温时间80s.检测胚脑细胞的功能变化,比较两种复温方法对细胞活性的影响.结果表明:胚脑细胞玻璃化冻存3～30d,细胞的回收率、存活率、细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性都有下降的趋势,过氧化氢(H2O2)含量显着增加,但冻存30d后这些指标保持基本稳定,与第60d比较无显着差异(P>0.05).微波复温组的细胞存活率,细胞内SDH、SOD的活性高于水浴复温组,细胞内H2O2含量明显低于水浴复温组.说明微波复温能够提高复温速率,对胚脑细胞的损伤要低于水浴复温.(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2005年02期）
赵玉勤[3]（2004）在《胚脑细胞的玻璃化冻存及其对细胞活性的影响》一文中研究指出本文以孕17～19天的SD大鼠为实验材料，进行玻璃化冻存大鼠胚脑细胞的研究。通过对各种玻璃化溶液毒性的测定和检测平衡时间对所冻存胚脑细胞活性的影响，分析低温保护剂对细胞作用；通过检测冻存后胚脑细胞的回收率、存活率细胞内SDH酶和SOD酶活性以及膜结构和功能的变化，筛选出适合胚脑细胞玻璃化冻存的玻璃化溶液和玻璃化冻存程序，并初步分析了作用机理，实验结果表明： (1)低温保护剂对细胞作用的分析：细胞外非渗透性保护剂的大分子物质Ficoll和蔗糖，对胚脑细胞均不产生毒性作用。对细胞的化学毒性作用来自渗透性保护剂DMSO和EG，并且随处理时间的延长和其浓度的增加对细胞的影响逐渐增大，而且由渗透性保护剂不同的玻璃化溶液之间毒性的比较可知DMSO的毒性要比EG大。虽然渗透性保护剂DMSO毒性较大，但DMSO具有较强的玻璃化形成能力，能更好的促进细胞玻璃态的形成，与EG合理搭配，能够在冷冻过程中较好地形成玻璃化，达到较好的冻存效果。 (2)玻璃化溶液的筛选：通过对冻存后胚脑细胞回收率、存活率、FDA／PI值、SDH活性和SOD活性检测，分析认为玻璃化溶液VS2对大鼠胚脑细胞的冻存效果较好，其成分为：15％EG(v／v)，15％DMSO(w／v)，21％Ficoll和0.35M蔗糖。用VS2冻存的胚脑细胞在3、7、15和30天时，胚脑细胞的存活率分别为：86.22±2.73％、79.61±2.48％、69.46±2.68％、52.85±2.51％和51.29±3.19％，高于其它冻存组。冻存30天后胚脑细胞的存活率和各项生理功能达到相对稳定的状态。 (3)胚脑细胞玻璃化冻存后结构与功能的变化：对冻存后胚脑细胞活力的各方面，如膜结构、SDH和SOD活性等进行了初步研究，从各项指标来看，在玻璃化冻存过程中，在冻存的前15天中，细胞的膜损伤、酶活性的下降程度最明显，细胞的各项功能指标都发生了较为明显的下降；但在冻存30天以后，细胞的各项生理功能都达到相对稳定的状态，各项指标的不再随着冻存时间的延长而下降。表明玻璃化冻存方法适用于长期低温保存胚脑细胞。 虽然我们所做的玻璃化冻存研究不能完全避免冷冻对胚脑细胞产生的损伤，勿浙江大学硕士学位论文但冻存后的胚脑细胞仍保持其较高和较稳定的存活率和活性，因此，该项技术对胚脑细胞的长期低温保存，具有一定的应用价值。(本文来源于《浙江大学》期刊2004-06-01）
应华波[4]（2004）在《微波复温在胚脑细胞玻璃化冻存过程中的作用研究》一文中研究指出本文以孕17～19天的SD大鼠为实验材料，对胚脑进行玻璃化冷冻保存，主要研究微波复温是否比常规复温更能保持细胞的生物学功能。实验共分为叁部分：第一部分为微波参数的筛选。使用不同功率、不同方法对玻璃化冻存的溶液进行复温，选择合适的微波复温方式。第二部分，筛选出与微波参数匹配的适合于胚脑细胞的玻璃化溶液。第叁部分，对玻璃化冻存的胚脑细胞结构与功能进行检测，分析影响复温后胚脑细胞活力的因素，同时比较常规水浴复温与微波复温的效果。 微波复温参数筛选：经玻璃化冷冻的2ml玻璃化溶液，直接使用2450MHz微波复温，实验表明功率越低复温时间越长，以800W功率的微波复温需165秒，复温速率为71.27℃／min；38℃水浴复温只需100秒，复温速率为117.6℃／min；将样品放入10℃的300ml水浴中进行微波复温可以加快复温速率，复温时间为80s，复温速率达147℃／min。因此选用10℃的300ml水浴中进行微波复温较为合适。 玻璃化溶液的筛选：从胚脑细胞的回收率、存活率和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化看，无论是水浴复温还是微波复温，玻璃化溶液VS2比VS1对胚脑细胞的冻存效果更好。VS2的成份为：20.5％(W／V)DMSO，15.5％(W／V)乙酰胺，10％(W／V)2,3-丁二醇和6％(W／V)蔗糖。 胚脑细胞玻璃化冻存后的功能变化：随着冻存时间的延长，细胞回收率、存活率都有下降的趋势，30天后保持基本稳定，与第60天比较无显着差异(P＞0.05)。胚脑细胞玻璃化冻存前期(3～30天)的检测结果表明，胚脑细胞内H_2O_2含量显着增加，SDH和超氧化物歧化酶(SOD)活性显着降低，而玻璃化冻存后期(30～60天)H_2O_2含量、SDH和SOD活性趋于稳定。 水浴组与微波组的复温效果比较：从细胞的回收率来看，两种复温方法的效果大致相同，没有显着的差异。微波复温组的细胞存活率，细胞内SDH酶、SOD酶的活性高于水浴复温组。同时，微波复温组的细胞内H_2O_2含量明显低于水浴复温组。表明微波复温对胚脑细胞的损伤要低于水浴复温。(本文来源于《浙江大学》期刊2004-06-01）
胡军祥,应华波,赵玉勤,周国英[5]（2004）在《玻璃化冻存胚脑细胞的结构与功能研究》一文中研究指出胚脑细胞的玻璃化冻存至今仍少见报道。从孕14-17d的SD大鼠胚胎中,分离出大脑皮层,去除软脑膜及血细胞,用RPMI1640培养液制成细胞悬浮液,在4℃冰浴中,按两步预平衡法加入玻璃化冻存液(主要含DMSO、聚乙二醇、乙酰胺、丙二醇)。冻存液的终浓度为90%。分装后直接投入液氮中冻存(降温速率>>80℃/min)。冻存60d后,38℃水浴快(本文来源于《中国生理学会第五届比较生理学学术会议论文汇编》期刊2004-06-01）
姜蕾[6]（2002）在《胚脑细胞的玻璃化冻存及其体外掊养的研究》一文中研究指出本文以孕17～19天的SD大鼠为实验材料，用玻璃化方法对胚脑细胞进行冻存。通过检测细胞的回收率、存活率和线粒体内琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性，筛选适合于胚脑细胞的玻璃化溶液和玻璃化冻存程序。对玻璃化冻存的胚脑细胞结构与功能进行检测，分析影响冻存后胚脑细胞活力的因素。在此基础上，对玻璃化冻存的胚脑细胞进行培养，检测培养后细胞的形态和功能变化。结果表明： (1)玻璃化冻存程序：用两步法对胚脑细胞进行预平衡，在室温(20℃)下将胚脑细胞放入50％浓度的玻璃化溶液中，平衡10min，然后把胚脑细胞移入4℃水浴中，继续加入玻璃化溶液，使其终浓度达到90％。平衡10min后，把细胞悬液分装入塑料冻存管中，直接投入液氮(-196℃)。在冻存3～60天后，取出细胞样品，立即投入38℃水浴中快速复温，然后用分步法洗脱冻存液。先用2.0M甘油+0.5M蔗糖溶液洗脱，离心后弃上清液，再用0.5M蔗糖洗脱，最后用新鲜D-Hank's液洗脱叁次。 (2)玻璃化溶液的筛选：从胚脑细胞的回收率、存活率和SDH活性的变化看，玻璃化溶液VS4对胚脑细胞的冻存效果最好，其成份为：20.5％(W／V)DMSO，15.5％(W／V)乙酰胺，10％(W／V)2,3-丁二醇和6％(W／V)蔗糖。用该溶液冻存的胚脑细胞在第3天时，回收率为91.00±2.48％，存活率为83.21±2.15％，SDH活性为0.494±0.005。从渗透性保护剂的作用效果看，DMSO+乙酰胺+丁二醇组合的效果最好，其次为DMSO+乙酰胺+丙二醇+丁二醇组合。从非渗透性保护剂的作用效果看，蔗糖对胚脑细胞的冻存效果优于聚乙二醇(MW 8000)。 (3)胚脑细胞玻璃化冻存后的结构与功能变化：从超微结构看，新鲜胚脑细胞膜表面光滑、膜结构完整，经过玻璃化溶液VS4预平衡后，细胞因脱去自由水而略有皱缩。在冻存后，部分细胞的细胞膜上会出现一些孔洞，在严重时还会出现细胞膜的破裂现象。在冻存过程中细胞回收率随冻存时间的延长而下降，但这种变化不显着(P＞0.05)。细胞存活率也出现随时间的延长而下降的趋势，冻存3天、7天、14天和21天的细胞存活率之间存在极显着差异(P＜0.01)，30天后保持基本稳定，与60天比较无显着差异(P＞0.05)。胚脑细胞玻璃化冻存前期(3～30天)的检测结果表明，胚脑细胞内H_2O_2含量显着增加，SDH和SOD活性显着 浙江大学硕 士学位论义 降低，而玻璃化冻存后期（30～60天）HZOZ含量、SDH和 SOD活性趋于稳定。 表明玻璃化冻存方法适用于胚脑细胞的长期保存。 （4）冻存后的胚脑细胞培养：对玻璃化冻存后的胚脑细胞进行体外培养，观 察到胚脑细胞贴壁情况较差，贴壁时间较晚，但培养后细胞仍然能够正常生长、 分化，细胞长出突起，并交织成网状，与未经冻存的新鲜细胞生长相似。细胞内 的SDH活性比培养前显着提高拧＜0．05人 而HZOZ含量则显着降低（P＜0．05）， 说明培养过程对细胞的冷冻损伤具有一定的修复作用。 虽然胚脑细胞在冻存过程中，由于保护剂的毒性、降温一复温过程和冻存液 的洗脱等因素会对细胞的结构与功能造成一定的影响，但该技术仍能保持细胞较 高的活性，并适用于胚脑细胞的长期低温保存，而且某些在冻存过程中受损的细 胞可以通过短期培养进行修复，这为该项技术的实际应用提供了依据。(本文来源于《浙江大学》期刊2002-06-01）
王彦,孙彤,张锦珠[7]（2002）在《鸡胚脑细胞谷氨酸释放的模拟微重力效应》一文中研究指出用回转器旋转鸡胚蛋研究对脑细胞的模拟微重力生物效应 .采用连续荧光法测量孵化 10d (E10 )和孵化13d (E13)鸡胚的脑细胞谷氨酸的初始释放速率、在KCl去极化及单个电脉冲刺激后的释放速率和释放量以及谷氨酸的含量 ,并对旋转处理组和静止对照组进行了比较 .结果如下 :旋转组和对照组脑细胞的谷氨酸初始释放速率没有显着差异 ,E10鸡胚经 2 4h旋转后 ,在KCl刺激下脑细胞的谷氨酸释放速率和释放量皆高于对照组 ,经 4h旋转后谷氨酸含量显着增高 (P <0 0 1) ;但旋转 2 4h的E13鸡胚上述指标皆无显着改变 ,表明微重力对鸡胚脑细胞神经递质释放的影响与胚龄有关 .鸡胚脑细胞在电脉冲刺激下谷氨酸释放的动态过程表明 :脉冲电场引起的谷氨酸释放与细胞内钙离子迅速增加有关 .(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2002年01期）
孙彤,沈宏略,王彦,张锦珠[8]（2000）在《鸡胚脑细胞磷脂和能量代谢的模拟微重力生物效应的~(31)P-NMR谱研究》一文中研究指出利用~（３１）Ｐ－ＮＭＲ方法对回转器旋转的鸡胚脑细胞内磷酸单脂（ＰＭＥ）、磷酸双脂（ＰＤＥ）及ＡＴＰ和ｐＨ值进行了定量分析，以研究对脑细胞磷脂代谢及能量代谢的模拟微重力生物效应．实验结果显示出：对Ｅ１３鸡胚旋转２４ｈ引起了ＡＴＰ和ＰＭＥ及ｐＨ值水平的显着性升高．Ｅ１５鸡胚经２４ ｈ旋转对脑细胞磷脂代谢及能量代谢产生类似影响，但皆未达显着性差异水平．还利用孔雀石绿方法测量旋转对鸡胚脑细胞ＡＴＰａｓｅ活性的影响．从实验结果观察到： Ｅ１３和Ｅ１５鸡胚经２４ ｈ的旋转引起了 ＡＴＰａｓｅ活性的显着下降，前者比后者更敏感．停止旋转 ２４ ｈ后，鸡胚脑细胞所出现的上述变化，除 ＡＴＰ仍然高于对照外，其他指标皆可以恢复．(本文来源于《中国科学C辑:生命科学》期刊2000年02期）
孙彤,王彦,陈雅,沈宏略,张锦珠[9]（1999）在《对于回转器旋转引起的鸡胚脑细胞内游离[Ca~(2+)]_i水平变化的保护的初步研究》一文中研究指出利用回转器的旋转在地面模拟微重力的生物效应已成为公认的方法之一。我们曾利用Fura-2／ AM比例荧光法测定鸡胚细胞内的游离Ca2+浓度。研究结果表明,将孵化第10天的鸡胚(E10) 和第13天的鸡胚(E13)分别旋转4小时和24小(本文来源于《中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编》期刊1999-10-01）
孙彤,沈宏略,王彦,张锦珠[10]（1999）在《鸡胚脑细胞磷脂代谢和能量代谢的微重力生物效应的直~(31)P-NMR谱研究》一文中研究指出随着航天事业的发展,研究微重力的生物效应有着重大意义。由于空间飞行较为昂贵,利用某些方法在地面模拟微重力的生物效应已广泛被人们采用,其中利用回转器的旋转在地面模拟微重力的生物效应已成为公认的方法之一。本文利用31P—NMR 方法对回转器旋转24小时的孵化第13天(E13)和(本文来源于《中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编》期刊1999-10-01）
胚脑细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以孕17～19d的SD大鼠为材料,对胚脑细胞进行玻璃化深低温保存,在冻存3、10、20、30、60d后,胚脑细胞样品分别采用常规的38℃水浴复温和微波复温即在300mL10℃水中,控制微波功率为800W,频率2450MHz,复温时间80s.检测胚脑细胞的功能变化,比较两种复温方法对细胞活性的影响.结果表明:胚脑细胞玻璃化冻存3～30d,细胞的回收率、存活率、细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性都有下降的趋势,过氧化氢(H2O2)含量显着增加,但冻存30d后这些指标保持基本稳定,与第60d比较无显着差异(P>0.05).微波复温组的细胞存活率,细胞内SDH、SOD的活性高于水浴复温组,细胞内H2O2含量明显低于水浴复温组.说明微波复温能够提高复温速率,对胚脑细胞的损伤要低于水浴复温.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胚脑细胞论文参考文献
[1].胡军祥,赵玉勤.大鼠胚脑细胞玻璃化冷冻保存研究[J].浙江大学学报(理学版).2005
[2].胡军祥,应华波,周国英,赵玉勤.微波复温对玻璃化冻存大鼠胚脑细胞活性的影响[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2005
[3].赵玉勤.胚脑细胞的玻璃化冻存及其对细胞活性的影响[D].浙江大学.2004
[4].应华波.微波复温在胚脑细胞玻璃化冻存过程中的作用研究[D].浙江大学.2004
[5].胡军祥,应华波,赵玉勤,周国英.玻璃化冻存胚脑细胞的结构与功能研究[C].中国生理学会第五届比较生理学学术会议论文汇编.2004
[6].姜蕾.胚脑细胞的玻璃化冻存及其体外掊养的研究[D].浙江大学.2002
[7].王彦,孙彤,张锦珠.鸡胚脑细胞谷氨酸释放的模拟微重力效应[J].生物化学与生物物理进展.2002
[8].孙彤,沈宏略,王彦,张锦珠.鸡胚脑细胞磷脂和能量代谢的模拟微重力生物效应的~(31)P-NMR谱研究[J].中国科学C辑:生命科学.2000
[9].孙彤,王彦,陈雅,沈宏略,张锦珠.对于回转器旋转引起的鸡胚脑细胞内游离[Ca~(2+)]_i水平变化的保护的初步研究[C].中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编.1999
[10].孙彤,沈宏略,王彦,张锦珠.鸡胚脑细胞磷脂代谢和能量代谢的微重力生物效应的直~(31)P-NMR谱研究[C].中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编.1999
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