天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制

论文摘要

目的:探讨天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制。方法:针对TSPAN31设计合成靶向干扰的siRNA,转染肝癌细胞,qRT-PCR和免疫印迹检测肝癌细胞实验组与对照组细胞CDK4的转录和翻译水平,免疫印迹检测细胞周期蛋白Cyclin D1、转录因子E2F1蛋白表达水平;在HEK293T细胞、Hela细胞中转染过表达TSPAN31全长、编码区及3’末端非翻译区质粒,qRT-PCR及免疫印迹检测CDK4基因转录和翻译水平。结果:与对照组相比,肝癌细胞siRNA干扰后TSPAN31蛋白相对表达量显著降低,CDK4相对表达量显著升高,Cyclin D1、E2F1蛋白相对表达量升高（均P<0.05）。与对照组相比,HEK293T细胞、Hela细胞转染过表达TSPAN31 3’末端非翻译区质粒组及过表达TSPAN31全长质粒组CDK4转录及翻译的相对表达水平显著降低（均P<0.05）,而转染过表达TSPAN31编码区质粒组没有显著差异（均P>0.05）。结论:TSPAN31可在肝癌细胞中调控信号通路蛋白Cyclin D1、CDK4及E2F1蛋白表达,TSPAN31对CDK4的调控作用可能主要是通过转录产物的3’末端非翻译区进行的。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞培养
•     1.2.2 质粒和siRNA转染
•     1.2.3 qRT-PCR检测mRNA表达水平
•     1.2.4 免疫印迹法检测蛋白表达水平
•     1.2.5 TSPAN31过表达质粒构建
•   1.3 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 TSPAN31与其靶基因CDK4的转录产物存在碱基互补配对
•   2.2 肝癌细胞中siRNA干扰TSPAN31后引起靶基因CDK4转录和翻译水平上调
•   2.3 siRNA干扰TSPAN31上调Cyclin D1、E2F1蛋白表达
•   2.4 过表达TSPAN31 3’末端非翻译区下调CDK4表达水平
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吕敏佳,古蕾,陈子鹏,王江林,孙雪萌,赵青

关键词: 天然反义转录物,肝癌细胞,宫颈癌细胞

来源: 广州医科大学学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 广州医科大学生物化学与分子生物学教研室,广州医科大学临床医学系

基金: 国家自然科学基金（81372466）

分类号: R735.7

页码: 6-11

总页数: 6

文件大小: 1545K

下载量: 26