水母雪莲论文_孙楠,吴艳,姜莉

导读:本文包含了水母雪莲论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:水母,基因,次级,真菌,黄酮,紫外线,产物。

水母雪莲论文文献综述

孙楠,吴艳,姜莉[1](2019)在《水母雪莲多糖对中波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞凋亡的研究》一文中研究指出目的:研究水母雪莲多糖对中波紫外线刺激下人皮肤成纤维细胞凋亡的影响及可能的机制。方法:利用蒸馏水回流提取+醇沉分离法提取水母雪莲中的多糖成分;使用包皮切除术后皮肤,处理后在6孔板中定量接种经10%胎牛血清DMEM培养基传代培养的细胞。细胞体外培养并分为空白对照组、紫外线照射组、10mg/ml水母雪莲多糖干预组和40mg/ml水母雪莲多糖干预组。除空白对照组外,其他组细胞分别在低辐射UVB(L-UVB,30mJ/cm2辐射1h)和高辐射UVB(H-UVB,60mJ/cm2辐射1h)两种条件下接受紫外线照射。在暴露于UVB光前,10mg/ml水母雪莲多糖干预组和40mg/ml水母雪莲多糖干预组细胞以终浓度为10mg/ml和40mg/ml水母雪莲多糖培养1h,紫外线组不干预。照射1h后,将细胞在37℃,10%胎牛血清DMEM培养基中温育18h。测定SOD、GSH、CAT及MDA水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblot测定p38、p53、Bcl-2、Bax蛋白及caspase-3的β肌动蛋白含量变化。结果:水母雪莲多糖可以提高经中波紫外线损伤的成纤维细胞中SOD、CAT的活性和GSH含量,并可减少MDA含量,通过上调p38,p53和Bcl-2的表达,同时下调Bax和活性caspase-3的表达。与非干预组相比,无论暴露于低剂量还是高剂量辐射下,10mg/ml和40mg/ml水母雪莲多糖组的成纤维细胞凋亡数目都要更少。结论:水母雪莲多糖可以通过上调人成纤维细胞p38,p53和Bcl-2的表达、下调Bax和活性caspase-3的表达、增加SOD、CAT的活性和GSH的含量、减少MDA含量,从而抑制中波紫外线照射所致的细胞凋亡。(本文来源于《中国美容医学》期刊2019年03期)

翁腾玉,郭砚[2](2018)在《水母雪莲黄酮对中波紫外线辐射人永生化角质细胞损伤的影响》一文中研究指出目的探讨水母雪莲黄酮对中波紫外线(UVB)辐射人永生化角质细胞(HaCaT)损伤的影响。方法将体外培养的HaCaT细胞株随机分为两组,给予25 m J/cm~2和50 m J/cm~2剂量的UVB进行照射,然后将细胞进一步分为四组:对照组、UVB模型组、水母雪莲黄酮2 g/L组、水母雪莲黄酮8 g/L组。MTT法检测细胞增殖,酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、细胞丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)活性。结果在不同剂量紫外线辐射组中,与对照组比较,UVB模型组细胞吸光度降低,SOD活性、CAT活性及GSH含量明显下降,MDA含量明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。与UVB模型组比较,水母雪莲黄酮组细胞吸光度增加,SOD活性、CAT活性及GSH含量明显上升,MDA含量明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论水母雪莲黄酮对UVB辐射后HaCaT细胞的氧化损伤有一定的保护作用。(本文来源于《中国医药导报》期刊2018年01期)

胡学敏[3](2017)在《水母雪莲表皮毛发育相关基因SmTTG1的遗传转化研究》一文中研究指出水母雪莲(Saussurea medusa Maxim),又称水母雪兔子,属菊科风毛菊属,是一种生长于青藏高原地区的珍稀、濒危药用植物。同时,它又是一种典型的高山植物。植株密被表皮毛是水母雪莲最具有代表性的形态特征,它是水母雪莲对极端环境的一种适应结构。研究水母雪莲表皮毛的形成和发育过程,对揭示高山植物适应环境的特殊机制将具有重要的理论意义。为此,本研究以水母雪莲作为实验材料,以表皮毛发育相关基因SmTTG1为研究对象,构建了SmTTG1基因的植物表达载体,通过根癌农杆菌为介导,转入普通烟草中。主要研究结果如下:(1)根据本实验室已克隆得到的水母雪莲SmTTG1基因序列(Genbank登陆号:KX447632),在其CDS两侧分别设计上下游引物,在上游引物5′端加入酶切位点SalⅠ,在下游引物5′端加入酶切位点Bam HⅠ,克隆了水母雪莲SmTTG1基因的CDS序列(含酶切位点)。(2)通过酶切法,将目的基因SmTTG1插入质粒pRI 101-AN DNA的多克隆位点,构建了植物表达载体pRI 101-AN-SmTTG1,并通过冻融法将其导入农杆菌C58C1中。(3)在根癌农杆菌介导下,通过叶盘法将目的基因SmTTG1转入普通烟草中。通过PCR和RT-PCR检测,获得8株转基因烟草植株。形态学比较表明,转基因烟草植株与对照植株无明显差异,说明SmTTG1基因过量表达不一定对烟草的形态产生影响。(本文来源于《青海大学》期刊2017-03-01)

尹瑶[4](2017)在《水母雪莲SmTTG1基因的克隆及表达研究》一文中研究指出水母雪莲(Saussurea medusa Maxim.),又称水母雪兔子,属菊科风毛菊属,是一种生长于青藏高原地区的珍稀、濒危药用植物。同时,它又是一种典型的高山植物。植株密被表皮毛是水母雪莲最具有代表性的形态特征,它是水母雪莲对极端环境的一种适应结构。研究水母雪莲表皮毛的形成和发育过程,对揭示高山植物适应环境的特殊机制将具有重要的理论意义。为此,本研究以水母雪莲作为实验材料,通过RT-PCR,结合RACE技术,克隆了与表皮毛发育相关的基因TTG1,并研究了该基因的表达。主要研究结果如下:1.克隆到的水母雪莲TTG1基因全长1346 bp,其中包括1014 bp的开放阅读框,99 bp的5’端非编码区,211 bp的3’端非编码区,22 bp的ploy(A)尾巴。该基因共编码337个氨基酸残基,分子量为37.75 KD,等电点为4.88。同源比对显示,水母雪莲TTG1基因的核苷酸序列与同一科植物大丽花TTG1基因的核苷酸序列的同源性为75%;推导出来的氨基酸序列与大丽花的同源性为83%,与拟南芥、烟草的同源性为74.56%、73.98%。通过SOPMA工具预测,水母雪莲TTG1蛋白包含18.69%的α-螺旋,10.09%的β-转角,43.03%的无规卷曲,28.19%的延伸链。无规卷曲和延伸链为该蛋白的主要二级结构。水母雪莲TTG1基因的氨基酸序列有五个WD40 repeat,说明该基因可能编码一种WD40蛋白,将该基因命名为SmTTG1(genbank accession number:KX447632)。2.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测β-actin、18SrRNA、GAPDH、EF和TUA五个基因在水母雪莲根、茎、叶、花中的表达情况,运用geNorm、NormFinder和Bestkeeper叁个软件分析这5个基因在这4种组织内表达的稳定性。结果显示,在根、茎、叶、花中表达最稳定的是18SrRNA。因此,18SrRNA可以作为水母雪莲qRT-PCR的校正内参基因。3.以18SrRNA作为内参基因,运用qRT-PCR技术,测定SmTTG1在根、茎、叶、花中的表达情况。结果显示,SmTTG1基因在4种组织中都有表达,其中在叶和花中的表达量最高。4.将SmTTG1基因连接到pColdⅠDNA表达载体,并导入BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达,表达产物用SDS-PAGE电泳分析。结果显示,目的蛋白在大肠杆菌中表达,表达蛋白的分子量大约是38KD,与由核苷酸序列推导的目的蛋白分子量大小相符。(本文来源于《青海大学》期刊2017-03-01)

佟永春,刘雅茹,何蕾,樊佳佳,姜春丽[5](2017)在《水母雪莲内生真菌Alterraria sp.的次级代谢产物鉴定》一文中研究指出目的:研究藏族药水母雪莲内生真菌Alterraria sp.的次级代谢产物。方法:从植物水母雪莲中分离得到内生菌Alterraria sp.,在考察培养条件后,对该菌种进行了扩大培养。运用反复硅胶柱色谱,LH-20凝胶柱色谱、开放ODS柱色谱、高效液相色谱等方法,并结合液质联用分析技术,对菌液的总萃取物进行分离纯化;并根据化合物的理化常数测定及光谱学(1D和2D NMR,MS等)数据分析鉴定所得化合物结构。结果:对水母雪莲中分离得到的内生真菌交链孢菌属Alterraria sp.进行次级代谢产物的研究,共得到9个化合物,分别鉴定为spirotryprostatin A(1),对羟基苯甲醛(2),4-羟基苯基-2’-羟基丙酯(3),二氢对甲氧基肉桂酸(4),4-甲氧基苯甲酸(5),对羟基苯乙酸甲酯(6),4-羟基苯乙醇(7),对羟基苯甲酸(8),3-苯基丙酸(9)。细胞毒测试结果表明,从TPXa中分离得到的化合物1对肺癌细胞株A549具有较强的增殖抑制活性,其IC50为2.0 mg·L-1。结论:以上化合物均为首次从交链孢菌属真菌中分离得到。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2017年07期)

王钧,王建科,石琳,胡延萍,杨文韬[6](2016)在《水母雪莲ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选》一文中研究指出目的优化并建立适合于水母雪莲的ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR引物。方法采用L16(45)正交设计方法,以Taq DNA聚合酶浓度、d NTP浓度、模板DNA浓度、引物浓度、Mg~(2+)浓度5种因素4个水平对水母雪莲ISSRPCR反应体系进行优化;并对反应体系进行验证。采用优化后的反应体系筛选出条带清晰且稳定的ISSR引物,通过退火温度梯度试验确定最佳退火温度。结果最终确立了水母雪莲20μl ISSR-PCR最佳反应体系,即包含Taq DNA聚合酶0.7U、d NTP 0.125mmol/L、引物0.3μmol/L、模板DNA 40ng、Mg~(2+)1.5mmol/L。在此基础上,从84条ISSR引物中筛选出条带清晰且稳定的8条引物,并通过梯度PCR反应确定最佳退火温度。结论经过11份水母雪莲种质验证,证明所建立的体系稳定可靠,可用于后续水母雪莲遗传多样性分析和种质资源鉴定。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2016年08期)

佟永春,何蕾,樊佳佳,刘雅茹,孙奕[7](2016)在《水母雪莲内生真菌Aspergillus sp.TPXq的次级代谢产物研究》一文中研究指出目的研究藏药水母雪莲内生真菌Aspergillus sp.TPXq的次级代谢产物。方法菌种采用震荡培养箱扩大培养,经反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、开放ODS柱色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化;并根据化合物的理化性质及波谱数据鉴定结构。结果从来自藏药水母雪莲的一株内生真菌Aspergillus sp.TPXq的培养液中分离得到8个环二肽和1个生物碱类化合物。分别鉴定为3-异丁基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮(Ⅰ)、3-异戊基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮(Ⅱ)、3-仲丁基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮(Ⅲ)、3-苄基-吡咯并哌嗪-2,5-二酮(Ⅳ)、3-苄基-6-对羟基苄基-2,5二酮(Ⅴ)、3,6-二甲基哌嗪-2,5-二酮(Ⅵ)、3-异丁基-6-异丙基哌嗪-2,5-二酮(Ⅶ)、3-异丁基-6-苄基哌嗪-2,5-二酮(Ⅷ)、Chaetominine(Ⅸ)。结论其中化合物Ⅳ~Ⅷ为曲霉属Aspergillus.sp真菌中首次分离得到。细胞毒测试结果表明,以上化合物Ⅰ~Ⅷ对于A549和MCF-7肿瘤细胞均显示弱细胞毒活性(>50μg/mL),化合物Ⅸ对A549和MCF-7肿瘤细胞均具有显着的细胞毒活性,IC50值分别为0.18μg/mL和0.89μg/mL。(本文来源于《南京中医药大学学报》期刊2016年04期)

王冰洁,李厚华,王亚杰,高艳,付婉艺[8](2015)在《水母雪莲黄酮合成酶FNSII基因克隆及其在3种细胞系中的表达》一文中研究指出水母雪莲是中国传统珍稀药材,其主要活性成分之一木犀草素具有预防和治疗癌症的功效。以水母雪莲绿色细胞系为试材,采用RT-PCR和RACE-PCR方法获得1个水母雪莲FNSII基因cDNA全长,命名为SmFNSII(GenBank登录号为KF170286)。序列分析结果表明:SmFNSII全长1 710 bp,包含34 bp的5?非编码区、125 bp的3?非编码区和1个长度为1 551 bp编码516个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析表明SmFNSII属于细胞色素P450 CYP93B亚家族单氧化酶。序列比对和系统进化分析表明,SmFNSII氨基酸序列与同科植物毛山柳菊的亲缘关系最近,相似性达87%以上。实时荧光定量PCR分析表明,SmFNSII在白色、绿色和红色细胞系均有表达,红色系中的表达量最高,白色系中表达量最低,此结果与高效液相色谱分析3种颜色细胞系中木犀草素含量结果一致。构建pET-SmFNSII原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达,诱导蛋白大小与预期一致。通过筛选FNSII基因表达水平高、高产木犀草素的水母雪莲细胞系和植株,可培育抗炎抗癌活性较高、具有高保健功能的雪莲生药新品种。(本文来源于《生物工程学报》期刊2015年12期)

王沛,邓淑凤,杨新华,王红,杜军英[9](2014)在《水母雪莲对热应激小鼠心肌酶谱与心肌损伤标志物的影响》一文中研究指出目的观察水母雪莲对热应激小鼠心肌酶谱与心肌损伤标志物的影响,探讨其抗热应激损伤的作用和作用机制。方法采用恒温恒湿条件(42℃,相对湿度60%,30min/d,连续10d)建立热应激动物模型。测定和观察雄性BALB/C近交系小鼠血清中心肌酶谱与心肌损伤标志物的变化。结果对照组、热应激组、热应激雪莲组心肌酶谱与心肌损伤标志物分别为天冬氨酸转移酶(92.4±5.3)、(382.4±9.6)和(104.0±6.1)U/L;乳酸脱氢酶(76.0±7.1)、(189.0±5.3)和(98.6±3.7)U/L;肌酸肌酶(227.3±5.7)、(398.4±3.7)和(287.3±7.6)U/L;心肌型肌酸肌酶同功酶(152.0±5.7)、(357.0±10.6)和(206.0±9.4)U/L;肌钙蛋白(0.92±0.32)、(3.07±0.51)和(1.09±0.32)μg/L;肌红蛋白(107.3±6.1)、(293.0±7.7)和(147.0±5.4)μg/L,与对照组比较,热应激组和热应激雪莲组心肌酶谱与心肌损伤标志物都有明显升高(P<0.01或P<0.05),但与热应激组比较,热应激雪莲组心肌酶谱与心肌损伤标志物下降明显(P<0.01)。结论水母雪莲可以降低热应激小鼠血清中心肌酶谱的活力与心肌损伤标志物含量。(本文来源于《工业卫生与职业病》期刊2014年03期)

王亚杰[10](2014)在《水母雪莲黄酮合成酶FNSⅡ基因克隆和功能分析》一文中研究指出水母雪莲为菊科凤毛菊属多年生草本植物,为中国传统名贵中药材,其含有的药用活性成分具有消炎镇痛、抗辐射、抗癌、抗疲劳、清除自由基、延缓衰老、增强机体免疫和降血压血脂等诸多功效。植化分析显示类黄酮是雪莲中一类重要的活性成分。水母雪莲品质优良,是用药广泛的雪莲原植物,但其野生资源远远不能满足市场需求,因此人工种植被寄予厚望。为了提供可人工种植的高产活性成分的雪莲种质,开展天山雪莲的代谢基因工程研究势在必行。在水母雪莲中,黄酮成分主要为木犀草素,而在《中国药典》中木犀草素是雪莲生药材质量的重要鉴定标准。因此克隆并鉴定黄酮合成酶SmFNS II基因,不仅有助于了解木犀草素生物合成与积累的调控机理,而且为通过基因工程手段调节代谢途径,从而使雪莲高水平积累这一有价值的代谢产物的遗传工程提供理论基础。本研究利用水母雪莲绿色愈伤组织作为材料,进行SmFNS II基因克隆及功能分析,研究结果发现:1.利用特异引物进行RACE PCR,克隆水母雪莲SmFNS II基因的全长序列,获得1个1733bp的cDNA片段(GenBank:KF170286),其中含有一个1551bp的开放阅读框(ORF)。2.对水母雪莲FNSII和其他8种植物的FNSII的氨基酸序列构建系统进化树,分析发现水母雪莲FNSII与菊科植物毛山柳菊、翠菊、非洲菊、大丽花的FNSII归为一大类,同源关系较近,其次是截形苜蓿、茶的FNSII,而与金鱼草和叁花龙胆FNSII的同源关系较远。3.生物信息学分析克隆得到的SmFNS II基因,SmFNS II编码一个含516个氨基酸残基的蛋白质,相对分子质量58.88731kDa,理论等电点(pI)为6.67,属于细胞色素P450CYP93B亚家族中单氧化酶,在7-26位氨基酸中间有1个跨膜区,二级结构主要由α螺旋、随机卷曲以及少量延伸链组成;此蛋白可能有7个蛋白磷酸化位点,其中5处丝氨酸磷酸化位点,2处有苏氨酸磷酸化位点。4.使用特异性引物,通过荧光实时定量PCR对水母雪莲叁个颜色细胞系中SmFNS II基因的表达量进行分析。结果显示,水母雪莲白色细胞系中FNS II基因表达量最低,而绿色系中表达量较高,为白色系的2.15倍,红色系中的表达量最高,分别为白色系的7.78倍和绿色系的3.62倍。5.构建了pET-SmFNSII原核表达载体,表达出62kDa目的蛋白条带,与预测蛋白大小一致。6.构建了pBI121-SmFNSII的植物过表达载体,采用农杆菌介导的叶盘侵染法对夏堇进行了遗传转化。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01)

水母雪莲论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨水母雪莲黄酮对中波紫外线(UVB)辐射人永生化角质细胞(HaCaT)损伤的影响。方法将体外培养的HaCaT细胞株随机分为两组,给予25 m J/cm~2和50 m J/cm~2剂量的UVB进行照射,然后将细胞进一步分为四组:对照组、UVB模型组、水母雪莲黄酮2 g/L组、水母雪莲黄酮8 g/L组。MTT法检测细胞增殖,酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、细胞丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)活性。结果在不同剂量紫外线辐射组中,与对照组比较,UVB模型组细胞吸光度降低,SOD活性、CAT活性及GSH含量明显下降,MDA含量明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。与UVB模型组比较,水母雪莲黄酮组细胞吸光度增加,SOD活性、CAT活性及GSH含量明显上升,MDA含量明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论水母雪莲黄酮对UVB辐射后HaCaT细胞的氧化损伤有一定的保护作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

水母雪莲论文参考文献

[1].孙楠,吴艳,姜莉.水母雪莲多糖对中波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞凋亡的研究[J].中国美容医学.2019

[2].翁腾玉,郭砚.水母雪莲黄酮对中波紫外线辐射人永生化角质细胞损伤的影响[J].中国医药导报.2018

[3].胡学敏.水母雪莲表皮毛发育相关基因SmTTG1的遗传转化研究[D].青海大学.2017

[4].尹瑶.水母雪莲SmTTG1基因的克隆及表达研究[D].青海大学.2017

[5].佟永春,刘雅茹,何蕾,樊佳佳,姜春丽.水母雪莲内生真菌Alterrariasp.的次级代谢产物鉴定[J].中国实验方剂学杂志.2017

[6].王钧,王建科,石琳,胡延萍,杨文韬.水母雪莲ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选[J].时珍国医国药.2016

[7].佟永春,何蕾,樊佳佳,刘雅茹,孙奕.水母雪莲内生真菌Aspergillussp.TPXq的次级代谢产物研究[J].南京中医药大学学报.2016

[8].王冰洁,李厚华,王亚杰,高艳,付婉艺.水母雪莲黄酮合成酶FNSII基因克隆及其在3种细胞系中的表达[J].生物工程学报.2015

[9].王沛,邓淑凤,杨新华,王红,杜军英.水母雪莲对热应激小鼠心肌酶谱与心肌损伤标志物的影响[J].工业卫生与职业病.2014

[10].王亚杰.水母雪莲黄酮合成酶FNSⅡ基因克隆和功能分析[D].西北农林科技大学.2014

论文知识图

温度对水母雪莲毛状根生长和总黄...一13液体培养的水母雪莲毛状根水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物...水母雪莲悬浮培养细胞在MS、MG和...钙盐对水母雪莲悬浮培养细胞生长...不同基本培养基对水母雪莲悬浮培...

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水母雪莲论文_孙楠,吴艳,姜莉
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