导读:本文包含了口服基因疫苗论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,沙门氏菌,胃肠炎,传染性,免疫,沙门,病毒。
口服基因疫苗论文文献综述
BIRHANU,TESEMA[1]（2017）在《口服KISS1基因疫苗构建及其对绵羊生殖轴的影响》一文中研究指出手术去势能够显着提高公畜的脂肪沉积并使其变得温顺。因此几个世纪以来广泛应用于畜牧生产。虽然手术去势能够彻底去除公畜的生殖能力,但是普遍有着技术要求高和术后容易感染等缺点,即使进行麻醉动物应激反应依然较大,使得短期内公畜的生长性能下降。后来,科学家开始寻找替代手术去势的方法,从而开发出免疫去势。基于GnRH基因疫苗能够诱导表达GnRH抗体,通过降低体内GnRH水平而降低血清睾酮水平,抑制性行为。KISS-1基因产物kisspeptin通过与G蛋白偶联受体(GPR-54)之间的互作,激活下丘脑中GnRH神经元,控制GnRH的合成与分泌,进而促进促性腺激素(LH和FSH)的分泌:在调节动物发情期和生殖活动上发挥着至关重要的作用。Kisspeptin和GPR-54是控制青春期的重要上游调节因子。促性腺激素释放激素(GnRH)是促性腺激素的中枢调节因子,能够通过刺激GnRH释放促进性腺的发育和功能。在哺乳动物中,干扰该信号通路能够引起低促性腺激素性性腺机能减退。本研究分析口服kisspeptin重组基因疫苗对羔羊生殖生理和行为的作用,评估活性kisspeptinDNA疫苗口服免疫对激素受体mRNA和蛋白表达的有效性。主要研究结果如下:(1)构建C500/pKS-asd真核表达质粒。将本课题组构建的PVAX-KISS-1-S-asd质粒电转化至减毒猪霍乱沙门氏菌C500中,经测序和酶切鉴定挑选阳性克隆,命名为C500/pKS-asd重组菌,在无菌培养基中连续接种50代,提取质粒以及细菌基因组DNA,用双酶切和沙门氏菌属中保守InvA基因序列的PCR扩增鉴定重组真核表达质粒和重组菌株的传代稳定性。将菌株C500/pKS-asd和C500/pVAX-asd分别用50μL/mg二氨基庚二酸(DAP)接种到LB肉汤,并在650 nm(OD 650)处以0.5的光密度下过夜。4℃、12,000 rpm离心10分钟收集细菌。在接种到羔羊之前,通过将接种物稀释到LB琼脂上来证实微生物的细菌细胞数,将细菌细胞调节至5×1010 CFU/ml剂量。离心后将细菌细胞重新悬浮在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中进行疫苗接种。(2)Kisspeptin基因疫苗口服免疫的去势效果将10只56日龄的羔羊随机分为实验组和对照组,分别接种实验重组疫苗C500/pKS-asd或C500/pVAX-asd。接种方式为口服给药,并且在初次免疫后的第28天和第56天重复相同的处理。在初免后的第0天,第14天,第28天,第42天,第56天,第70天和第84天测定阴囊周长并采血。于接种的第98天评估性行为,测量阴囊周长并收集血液样本。实验组羊羔的阴囊周长(19.82±3.18cm)显着低于免疫后第42-98天对照组(22.16±4.79cm)(P<0.05),睾丸重量显着低于对照组(91.83±1.42 g VS 118.10±7.29g,P<0.011),睾丸长度也显着低于对照组(6.64±0.11cmVS7.40±0.29,P<0.05)。与对照组动物相比,实验组公羊曲细精管管腔内的精原细胞和精子产生量明显少于对照组,并且性行为显着降低(P<0.01)。这些数据表明,kisspeptin疫苗的口服免疫能够抑制羔羊的性腺功能和性行为。(3)Kisspeptin基因疫苗口服免疫后的KISS-1抗体和血清睾酮水平。通过间接ELISA测量血清中抗kisspeptin-54抗体和睾酮水平。在免疫后第42天至实验期(第98天)结束时,试验组羔羊中检测到kisspeptin-54抗体。结果表明,与对照组相比,试验组kisspeptin-54抗体水平显着升高(P<0.05,P<0.01),而血清睾酮水平显着降低(P<0.05)。这些结果表明,口服Kisspeptin疫苗可以诱导抗体并降低睾酮浓度水平,实现免疫去势。(4)Kisspeptin 口服免疫对下丘脑-垂体性腺轴中激素受体mRNA表达的影响取对照组和试验组的睾丸,下丘脑和垂体组织样。用TRIzol试剂从样品中提取总RNA,用定量实时聚合酶链反应(QPCR)来测定下丘脑内KISS1、GPR-54和促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA的水平(P<0.01,P<0.05),垂体中黄体生成激素β(LHβ)、卵泡刺激素β(FSHβ)和促性腺激素释放激素受体(GnRHR)的mRNA水平睾丸内黄体生成激素受体(LHR)和促卵泡激素受体(FSHR)的mRNA水平。与对照组相比,实验组睾丸FSHR和LHR mRNA 水平显着降低(P<0.01),下丘脑 kissipeptin、GPR54 和 GnRH mRNA水平明显低于对照组(P<0.01,P<0.05)。此外,去势免疫组LHβ,FSHβ,GnRHR mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.001)。这些数据表明,口服Kisspeptin基因疫苗可影响下丘脑-垂体性腺轴激素受体mRNA的表达水平。(5)口服Kisspeptin疫苗接种对活重的影响实验组动物体重与对照组动物体重无显着差异,说明口服kisspeptin基因免疫不影响动物生长。综上所述,kisspeptin基因重组口服疫苗能够抑制睾丸发育和精子发生,抑制羔羊体内激素受体mRNA和蛋白质的表达。(本文来源于《华中农业大学》期刊2017-12-01）
赵家宇,AREDA,BIRHANU,TESEMA,刘桂琼,姜勋平[2]（2017）在《口服滴鼻型KISS1基因疫苗构建及其免疫效果的研究》一文中研究指出引言/目的吻素基因(KISS1)通过调控Gn RH分泌参与下丘脑-垂体-性腺轴功能,因此在动物繁殖调控中具有重要作用。本课题组已证实KISS1基因是免疫去势的重要靶标,将质粒肌肉注射接种公羔,达到理想的去势效果,但是质粒制备过程繁琐、注射过程不便捷,故本研究构建一种制备过程简单、接种方式便捷、可口服和滴鼻的实用性KISS1基因疫苗。材料方法将前期构建的肌注型KISS1真核表达质粒通过电转化的方式转入减毒猪霍乱沙门氏菌(本文来源于《2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会论文集》期刊2017-08-18）
余祖华,李蒙,尚珂,程相朝,郁川[3]（2016）在《携带NDV HN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究》一文中研究指出引言/目的新城疫是由新城疫病毒(Newcastle diseasevirus,NDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,严重危害全球养禽业~([1])。HN蛋白是NDV重要的宿主保护性抗原,其可作为NDV基因工程疫苗的重要抗原靶基因之一。沙门菌是一种较为常见的侵袭性胞内菌,通过基因工程方法减毒后对宿主致病性显着降低,但仍保留良好的侵袭力,(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会论文集》期刊2016-11-04）
丁轲,余祖华,李蒙,郁川,尚珂[4]（2016）在《携带NDV HN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究》一文中研究指出为研究携带新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌的口服免疫原性,将携带NDV HN基因的重组质粒pcDNA3-HN电转化减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpC79-13,构建重组疫苗菌株ΔcrpC79-13(pcDNA3-HN)。将重组菌株ΔcrpC79-13(pcDNA3-HN)以1×10~9 CFU·只-1口服免疫7日龄雏鸡,同时设PBS、ΔcrpC79-13(pcDNA3)和NDVⅣ系疫苗免疫对照,于免疫后7、14、21、28、35d测定免疫雏鸡诱导的抗NDV的HI抗体、鸡白痢沙门菌IgG抗体和肠道黏膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫雏鸡的外周血淋巴细胞增殖水平并进行攻毒试验。结果表明,成功获得携带NDV HN基因疫苗的重组菌株Δcrp C79-13(pcDNA3-HN);在免疫后14~35d,可诱导产生抗NDV的HI抗体,且在免疫后21d时达到最高值;可诱导产生抗鸡白痢沙门菌的IgG抗体,且在免疫后28d达到最高值;Δcrp(C79-13pcDNA3-HN)组肠道黏膜IgA抗体含量最高值略高于Δcrp C79-13(pcDNA3)组,但差异不显着(P>0.05)。在免疫28d以后,Δcrp(C79-13pcDNA3-HN)组外周血淋巴细胞刺激指数极显着高于PBS对照组(P<0.01),显着高于ΔcrpC79-13(pCDNA3)组(P<0.05)。用103EID50 NDV F48E9株攻毒,保护率达67%(10/15),用108 CFU鸡白痢沙门菌C79-13攻毒,保护率为100%。本研究结果表明重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpC79-13(pcDNA3-HN)具有良好的口服免疫原性。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2016年10期）
胡男[5]（2016）在《口服抑制素基因疫苗对大鼠精子发生的作用研究》一文中研究指出本研究采用酶联免疫测定、组织切片技术、荧光定量PCR和蛋白免疫印迹等方法与手段,分析口服新型非抗性抑制素基因疫苗对雄性大鼠精子发育、睾丸组织结构、激素水平及精子发生相关基因和蛋白的表达作用,探究新型抑制素基因疫苗对大鼠精子发生的作用机制。1口服抑制素基因疫苗对雄性大鼠免疫应答的影响用不同菌落数新型抑制素基因疫苗PXAIS (1010CFU/mL,109CFU/mL,108CFU/mL)各4mL口服免疫大鼠,初次免疫二周后加强免疫二次,用ELISA检测不同时期血清抗体吸光值。研究结果表明：(1)叁个免疫组血清抗体P／N值均有不同程度的升高,中剂量组在第一次加强免疫后第一周P／N值(1.64+0.21)与对照组相比有极显着差异(P<0.01);(2)高剂量组在第一次加强免疫后第一周P／N值(1.49+0.30)与对照组有显着差异(P<0.05);(3)低剂量组在第一次加强免疫后第一周P／N值(1.56+0.35)与对照组相比有显着差异(P<0.05)。2口服抑制素基因疫苗对雄性大鼠精子发育的影响断颈处理大鼠以检测大鼠脏器系数、脏器体积、精子数和畸形率的变化,研究结果表明：(1)实验组睾丸体积明显升高,且低剂量在和中剂量组大鼠睾丸体积与对照组相比差异显着(P<0.05),但对对附睾体积没有明显影响(P>0.05);(2)高剂量组睾丸系数(0.93±0.06)与对照组相比差异极显着(P<0.01),低剂量组附睾系数(0.27±0.02)与对照组相比差异显着(P<0.05),各实验组精囊腺脏器系数与对照组相比没有显着影响(P>0.05);(3)实验组精子数量升高,畸形率降低,其中高剂量组精子数量(8.41+0.63)和畸形率(19.88+2.72)与空质粒组相比差异显着(P<0.05),且中剂量组精子数量(9.58+2.19)和畸形率(18.50+2.30)与空质粒组相比有极显着差异(P<0.01)。3口服抑制素基因疫苗对雄性大鼠睾丸组织结构的影响HE染色后在光学显微镜下观察大鼠睾丸组织形态学变化,研究结果表明：(1)各组睾丸组织生精小管外有完整的基膜,生精细胞发育正常,层次较清楚；(2)各组生精小管内生精细胞数量不同,中剂量组和对照组相比,生精细胞层数增加,管壁基膜变厚,官腔空隙变窄,腔隙中胞质残余增加。4口服抑制素基因疫苗对雄性大鼠内分泌激素水平的影响本实验采用ELISA技术检测各组不同时期血清中抑制素B(INHB)、促卵泡素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)激素水平变化,研究结果表明：(1)免疫后叁个实验组血清抑制素B水平均有不同程度降低,低剂量组在初次免疫后第二周(15.66+0.51)与对照组相比差异显着(P<0.05),中剂量组在第一次加强免疫后第一周(14.414-1.10)出现最低值,并与对照和空质粒组相比差异极显着(P<0.01);(2)免疫后各实验组FSH水平与对照组相比明显升高,初次免疫后第二周,中剂量组(6.02+0.12)和高剂量组(5.92+0.35)与对照组和空质粒组相比差异极显着(P<0.01),在免疫后第叁周里,低剂量组(5.53+0.16)与对照组相比差异显着(P<0.05);(3)与对照组相比,低剂量和中剂量组LH有所降低,初次免疫后第一周中剂量组LH水平(14.48+0.67)与空质粒组相比差异显着(P)<0.05),初次免疫后第二周LH含量继续下降,中剂量组(14.01+0.63)和低剂量组(13.84±0.40)与空质粒组差异显着护<0.05),低剂量组与对照组差异显着(P<0.05);(4)对照组和空质粒组从第一周到第七周睾酮(T)分泌水平变化不明显,低剂量组第一次加强免疫后第二周(74.82±4.50)与对照组差异显着(P<0.05),其余周次均无明显变化,初次免疫第一周中剂量组水平(76.41±3.75)升高,且与对照组相比差异显着(P)<0.05),中剂量组初次免疫后和第一次加强免疫后第二周(86.57±6.29)与对照组和空质粒组相比均差异极显着(P<0.01)。5口服抑制素基因疫苗对雄性大鼠精子发生相关基因和蛋白的影响采用RT-PCR和蛋白免疫印迹分别检测大鼠睾丸组织中INHβB、Vimentin、SMAD4基因在mRNA和蛋白水平的表达变化,研究结果表明：(1)抑制素基因疫苗免疫大鼠能降低INHβB亚基表达,中剂量组(19.40±3.60)和对照组(23.13+1.02)mRNA表达水平差异显着(P<0.05)；中剂量组和高剂量组蛋白表达水平与对照组相比均差异极显着(P<0.01)；低剂量组INHβB蛋白表达水平与对照组差异显着(P<0.05)。(2)各免疫组Vimentin mRNA水平表达升高,叁个实验组与对照组相比均有统计学意义,其中低剂量组(20.14+2.74)与对照组(17.65±1.49)差异显着(P<0.05),中剂量组(22.01±1.60)与对照组和空质粒组相比均差异极显着(p<0.01),高剂量组(21.09士2.11)与对照组和空质粒组相比差异显着(P<0.05)；各免疫组Vimentin蛋白水平表达升高,且均与对照组差异极显着(p<0.01)；(3)中剂量组和高剂量组Smad4 mRNA表达升高,中剂量组(25.32±3.11)与对照组(19.93±1.15)和空质粒组(19.92±0.89)相比均差异极显着(P<0.01),高剂量组(22.36±1.98)与对照组和空质粒组以及中剂量组相比均有显着差异(P<0.05),低剂量组与对照组无明显差异((P>0.05))；免疫组Smad4蛋白表达水平均上调,中剂量组和高剂量组与对照组相比均有极显着差异(P<0.01),低剂量组与对照组差异显着(P<0.05)。综上,一方面,抑制素基因疫苗能引起雄性大鼠的免疫应答,升高精子数量,降低精子畸形率,促进精子发育；另一方面,免疫降低了雄性大鼠内分泌激素抑制素B和LH的的分泌,升高FSH和T的分泌,并上调了Smad4、Vimentin基因mRNA和蛋白表达的水平,下调了INHβB亚基基因mRNA和蛋白表达的水平,说明抑制素基因疫苗免疫能通过引起雄性大鼠内分泌激素水平和基因蛋白表达的变化,改善雄性大鼠的精子发生。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2016-06-01）
张小会,张丹,梁恩涛,余敏,黄小波[6]（2016）在《减毒沙门氏菌投递的TGEVS基因疫苗口服免疫猪的动态规律》一文中研究指出目的研究TGEV S基因疫苗SL7207(PVAXD-TS)口服免疫仔猪后的动态免疫诱导规律。方法将口服疫苗SL7207(PVAXD-TS)、空载体菌株SL7207(PVAXD)以1.6×1011 CFU/头的剂量口服接种20日龄仔猪,以PBS为空白对照,2周后以2.0×1011 CFU的剂量加强免疫。分别测定0、2、4、6和8周的血清IgG、IgA、TGEV中和抗体、细胞免疫反应IL-4、IFN-γ、外周血淋巴细胞增殖情况。结果仔猪口服免疫后第4周即可检测抗TGEV的特异性IgG和粪黏液IgA抗体;在免疫后第6周IgA、IgG、IL-4、IFN-γ抗体和外周血T淋巴细胞增殖与SL7207(PVAXD)、PBS间均存在统计学差异(P<0.01),并在第6周达到最高值;中和实验显示该疫苗诱导的血清IgG具有中和活性。结论证实以减毒沙门菌为载体的TGEV S基因疫苗口服免疫仔猪有较好的免疫原性。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2016年01期）
张鑫淼,文心田,黄小波,曹叁杰,汪洋阳[7]（2013）在《减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律》一文中研究指出以小鼠为动物模型研究了重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa)的口服免疫规律。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、SL7207(pVAXD)以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫小鼠的外周血及脾脏淋巴细胞增殖水平、干扰素(IFN-γ)和细胞因子IL-4水平。结果表明,SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫可诱导小鼠分别产生特异性的抗TGEVS、N两种蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA。在整个免疫过程中,SL7207(pVAXD-N-Sa)产生的抗体水平(包括血清IgG及肠道黏膜IgA)与SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)无显着差异,均在免疫后第6w诱导产生的抗体滴度达到最高峰。免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激脾淋巴细胞的增殖作用优于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)。在免疫后第6w,SL7207(pVAXD-N-Sa)刺激产生的γ-干扰素的水平高于SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N),但无显着差异(P>0.05)。在整个免疫过程中,诱导产生的IL-4水平不明显,免疫组与对照组无显着差异(P>0.05)。研究结果显示SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的口服免疫原性,并同时具有S和N双基因的免疫功能,本研究为进一步开展猪体的免疫评价奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集》期刊2013-10-21）
黄小波,张鑫淼,曹叁杰,文心田,李春松[8]（2013）在《减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N融合基因疫苗的口服免疫原性》一文中研究指出目的研究携带猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S/N融合基因的重组减毒沙门氏菌的口服免疫原性。方法将真核质粒pVAX-S/N电转化鼠伤寒减毒沙门氏菌SL7207,筛选获得疫苗菌株SL7207(pVAX-S/N)。将菌株SL7207(pVAX-S/N)及对照组SL7207(pVAX-S)以1×109 CFU/只灌胃免疫小鼠,测定免疫小鼠诱导的抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的血清IgG及肠道粘膜IgA抗体动态水平,同时测定42d免疫小鼠的干扰素水平。结果菌株SL7207(pVAX-S/N)构建成功,首免后2～6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌SL7207)的血清IgG,第4～6周可诱导产生抗TGEV(和抗沙门氏菌均SL7207)的肠道粘膜IgA,SL7207(pVAX-S/N)诱导的IgG和IgA抗体最高滴度均略高于SL7207(pVAX-S),但差异不明显(P>0.05)。SL7207(pVAX-S/N)免疫42d小鼠诱导的干扰素浓度为659.45pg/mL,低于SL7207(pVAXD-S)组。结论 S/N融合基因疫苗SL7207(pVAX-S/N)具有良好的口服免疫原性,但与SL7207(pVAX-S)无明显差异。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2013年06期）
张鑫淼[9]（2013）在《减毒沙门氏菌递呈的TGEV S/N双基因疫苗的口服免疫诱导规律研究》一文中研究指出猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis, TGE)是引起仔猪早期死亡的重要病毒性肠道传染病,口服免疫是预防TGE较为理想的途径。纤突蛋白(S蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)是TGEV的两个最重要的结构蛋白。本研究以前期构建的携带TGEV S、N双基因的双启动子真核质粒pVAXD-N-Sa为基础,以减毒沙门氏菌SL7207(Attenuated salmonella typhimurium SL7207, SL7207)为递呈载体,构建携带S、N双基因的重组减毒沙门氏菌疫苗SL7207(pVAXD-N-Sa),并以小鼠模型对其口服免疫诱导规律进行评价,探索TGEV双基因口服疫苗的可行性。1.菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)的构建及其生物学特性研究将真核表达质粒pVAXD-N-Sa电转化减毒沙门氏菌SL7207,成功构建菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)。将菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)在Kan+抗性与非抗性条件下培养,以菌落计数的方法来计算其体外稳定性,采集口服免疫3d后小鼠派伊尔氏结较为集中的回肠末端片段,以RT-PCR方法检测Sa及N基因在小鼠体内的表达情况,将54只6周龄的BALB/c小鼠分成3组,免疫剂量分别为5×108CFU、1×109CFU和2×109CFU,共免疫2次,每次间隔2w,每天观察小鼠的食欲、饮欲及精神状态,在免疫后的1、2、4、6、8w采集免疫小鼠的小肠、肝、脾,制备组织切片测定口服接种小鼠的安全性,在免疫后的1、2、4、6、8w采集免疫小鼠的肝、脾,制备脏器悬液,采用菌落计数的方法测定体内稳定性。研究结果表明：菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)在体外Kan+抗性条件下传120代后仍有50%的存活率,在体外非抗性条件下传120代后,丢失率为100%,稳定性较好,小鼠口服免疫菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)3d可从小肠样品中检测到两种目的基因的转录,Sa基因片段大小约为500bp,N基因片段大小约为400bp,在整个免疫过程中,以5×108CFU、1×109CFU和2×109CFU叁种剂量口服免疫小鼠,小鼠的食欲、饮欲及精神状态均正常,病理切片结果显示以5×108CFU、1×109CFU和2×109CFU叁种剂量口服免疫小鼠时,均会对组织造成轻微的损伤,但不致死,肝脾菌落计数结果显示,以5×108CFU、1×109CFU和2×109CFU叁种剂量口服免疫小鼠时,在免疫后第1w,肝、脾内菌落个数增加,免疫后第2w,肝、脾内菌落个数减少,免疫后第4w(加强免疫后),肝、脾内菌落个数又有所增加,随后急剧减少,于免疫后8w左右逐渐被机体清除。结果表明,菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)具有良好的体外稳定性,两种目的基因均在体内得到了表达,口服免疫小鼠后具有良好的安全性及稳定性。2.检测抗体用的两种包被抗原的制备含有重组质粒pET-32α-SBC、pET-32α-N的大肠杆菌BL21表达菌经IPTG诱导表达后先进行初步纯化,然后在变性条件下(以尿素为变性剂)对SBC、N蛋白进行亲和层析纯化,并分别以自制的兔抗SBc蛋白高免血清及兔抗N蛋白高免血清为一抗,以HRP标记的羊抗兔IgG为二抗,对纯化后的两种蛋白进行免疫印迹检测SBC、N蛋白的反应原性,结果表明：SBC蛋白在诱导4h后表达量最多,N蛋白在诱导3h后表达量最多,亲和层析纯化后的SBC、N蛋白在38KDa和65KDa处检测到特异性条带,纯化后蛋白纯度较高,纯化复性后的SBC、N蛋白均可以与兔抗高免血清发生特异性反应,表明SBC、N蛋白均得到了正确的表达,均具有良好的反应原性。3.重组减毒沙门氏菌疫苗的口服免疫原性研究菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)及对照组SL7207(pVAX-S)、SL7207(pVAX-N)、 SL7207(pVAX-S-N)、SL7207(pVAXD)、PBS以1×109CFU/只灌胃免疫小鼠,共免疫3次,每次间隔2w,分别在免疫后的2、4、6、8w以间接ELISA检测免疫小鼠诱导产生的抗S、N蛋白的血清IgG及肠道黏膜IgA、IgG抗体的动态水平,以MTT法检测外周血及脾脏T淋巴细胞增殖情况,以检测试剂盒检测免疫小鼠血清γ-干扰素和细胞因子IL-4水平。研究结果表明：菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)可诱导机体产生特异性的血清IgG抗体及肠道黏膜IgA、IgG抗体,并且不仅能够诱导产生针对S蛋白的特异性抗体,也能诱导产生针对N蛋白的特异性抗体。首免后第2w,可以检测到特异性血清IgG抗体及肠道黏膜IgA、IgG抗体的产生,免疫后第6w,免疫组的抗体水平均达到最高峰,免疫后第8w,免疫组的抗体水平均有所下降。外周血及脾脏T淋巴细胞的增殖结果显示：菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)可以促进外周血及脾脏T淋巴细胞的增殖,并且脾脏T淋巴细胞的增殖效果优于外周血T淋巴细胞的增殖效果。在整个免疫过程中,首免后第2w,外周血及脾脏T淋巴细胞增殖作用开始增强,免疫后第6w,外周血及脾脏T淋巴细胞增殖作用均达到最高峰,免疫后第8w,外周血及脾脏T淋巴细胞增殖作用均有所减弱。试剂盒检测小鼠血清γ-干扰素和IL-4的结果显示：菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)能刺激Y-干扰素的产生,并且首免后第2w,刺激产生的Y-干扰素含量开始升高,免疫后第6w,刺激产生的Y-干扰素水平达到最高峰,免疫后第8w,γ-干扰素水平有所下降。但是整个免疫过程中,重组菌SL7207(pVAXD-N-Sa)与对照组刺激产生的IL-4的含量无显着差异(P>0.05)。结果表明菌株SL7207(pVAXD-N-Sa)口服免疫小鼠具有良好的免疫原性,可诱导免疫小鼠产生针对S、N蛋白的体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫,具有双基因的功能。(本文来源于《四川农业大学》期刊2013-06-01）
康波,马泽芳,李迎梅,韩丽,王晓明[10]（2010）在《口服免疫抑制素基因疫苗对朗德鹅种鹅生殖内分泌和产蛋性能影响的研究》一文中研究指出3年龄健康朗德鹅种鹅80羽,随机分成5组,每组4个重复,每个重复4羽(公、母比例1:3),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别口服2ml*10~9CFU/羽、1ml*10~(10)CFU/羽、2ml*10~(10)CFU/羽、4ml*10~(10)CFU/羽的以减毒菌为载体的不含抗药性基因的卵泡抑制素基因疫苗,V组为对照组,口服2ml的PBS,20d、40d后加强免疫。经120d试验,结果显示:除Ⅰ组外,各免疫组种鹅血清雌二醇、孕酮和抑制素抗体水平及产蛋率和种蛋受精率显着高于对照组(P<0.05),Ⅱ组(1ml*10~(10)CFU/羽剂量组)种鹅的产蛋率和种蛋受精率显着高于Ⅰ组(2ml*10~9CFU/羽剂量组)和对照组(P<0.05);各试验组高峰产蛋率、入孵蛋孵化率、受精蛋孵化率和健雏率差异不显着。表明口服免疫抑制素基因疫苗对朗德鹅种鹅生殖内分泌具有调节作用,能提高其产蛋性能和种蛋受精率;朗德鹅种鹅适宜的口服免疫剂量为1ml*10~(10)CFU/羽。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（下册）》期刊2010-08-01）
口服基因疫苗论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
引言/目的吻素基因(KISS1)通过调控Gn RH分泌参与下丘脑-垂体-性腺轴功能,因此在动物繁殖调控中具有重要作用。本课题组已证实KISS1基因是免疫去势的重要靶标,将质粒肌肉注射接种公羔,达到理想的去势效果,但是质粒制备过程繁琐、注射过程不便捷,故本研究构建一种制备过程简单、接种方式便捷、可口服和滴鼻的实用性KISS1基因疫苗。材料方法将前期构建的肌注型KISS1真核表达质粒通过电转化的方式转入减毒猪霍乱沙门氏菌
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
口服基因疫苗论文参考文献
[1].BIRHANU,TESEMA.口服KISS1基因疫苗构建及其对绵羊生殖轴的影响[D].华中农业大学.2017
[2].赵家宇,AREDA,BIRHANU,TESEMA,刘桂琼,姜勋平.口服滴鼻型KISS1基因疫苗构建及其免疫效果的研究[C].2017年全国养羊生产与学术研讨会暨养羊学分会第七次全国会员代表大会论文集.2017
[3].余祖华,李蒙,尚珂,程相朝,郁川.携带NDVHN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究[C].中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十二次全国学术研讨会论文集.2016
[4].丁轲,余祖华,李蒙,郁川,尚珂.携带NDVHN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究[J].畜牧兽医学报.2016
[5].胡男.口服抑制素基因疫苗对大鼠精子发生的作用研究[D].湖南农业大学.2016
[6].张小会,张丹,梁恩涛,余敏,黄小波.减毒沙门氏菌投递的TGEVS基因疫苗口服免疫猪的动态规律[J].中国人兽共患病学报.2016
[7].张鑫淼,文心田,黄小波,曹叁杰,汪洋阳.减毒沙门氏菌递呈的TGEVS/N双启动子基因疫苗的口服免疫规律[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集.2013
[8].黄小波,张鑫淼,曹叁杰,文心田,李春松.减毒沙门氏菌递呈的TGEVS/N融合基因疫苗的口服免疫原性[J].中国人兽共患病学报.2013
[9].张鑫淼.减毒沙门氏菌递呈的TGEVS/N双基因疫苗的口服免疫诱导规律研究[D].四川农业大学.2013
[10].康波,马泽芳,李迎梅,韩丽,王晓明.口服免疫抑制素基因疫苗对朗德鹅种鹅生殖内分泌和产蛋性能影响的研究[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集（下册）.2010
论文知识图
