摘要：在妇科恶性肿瘤中,卵巢癌位居榜首，其中上皮性卵巢癌居多。因卵巢位于盆腔深部，早期临床症状较隐匿，故而发现时多为晚期。经肿瘤细胞减灭术及规范化疗后，卵巢癌远期生存率并未明显提高，且复发率并未降低。卵巢癌复发原因归咎于化疗耐药机制，而DNA 异常甲基化为耐药主要机制之一，近年研究广泛。本文通过阐述可在卵巢组织中发生异常甲基化的WT-1 及RASSFIA 基因，寻找二者在上皮性卵巢癌中的联系。
关键词：上皮性卵巢癌；WT-1；RASSFIA
卵巢癌作为女性生殖器常见三大恶性肿瘤之一，最常见的组织学类型为上皮性卵巢癌，约占卵巢恶性肿瘤的85%-90%。因卵巢位于盆腔深部，早期病变不容易被发现，发现时大部分已为晚期，虽经肿瘤细胞减灭术、紫杉醇或脂质体与以铂类为主的联合规范化化疗后，部分卵巢癌患者的预后有着明显改善，5 年生存率已接近或超过50%。但仍有大部分卵巢癌患者预后很差，而复发耐药成为关键问题。
卵巢癌耐药机制主要包含自噬、肿瘤微环境的变化、表观遗传学调控。而表观遗传学调控成为耐药机制的重中之重，其主要调控方式为DNA 甲基化，是一种DNA 天然的修饰方式，以S-腺苷-L-甲硫氨为甲基供体，将甲基转移到胞嘧啶的5 位碳原子上，生成5-甲基胞嘧啶，从而调控基因的表达。DNA 异常甲基化被认为是肿瘤抑癌基因发生沉默的关键因素。有学者通过PUBMED数据库搜索并整理与卵巢癌耐药调控显著相关的DNA 甲基化基因，共有27 个，进而推测DNA 高甲基化及超甲基化状态可能是卵巢癌耐药调控的主要方式。
已有学者证明，RASSFIA 与WT-1 基因的DNA 甲基化参与卵巢癌耐药机制。RASSFIA 基因在大多数妇科肿瘤发生中均存在异常甲基化，发生程度及频率仅次于p16 基因。而WT-1 基因，目前在肾母细胞瘤及造血系统肿瘤中研究较多。但有体外研究表明，WT-1 基因的双重身份在卵巢癌发生发展及耐药过程中，可能发挥了重要作用。而两者是否具有某种联系，目前尚无文献明确报道。
RASSFIA 是肿瘤抑制基因，于2000 年从3 号染色体的短臂克隆出来，分子量为39kD，用于编码一个340 个氨基酸的开放阅读框（ORF），在凋亡信号传导、微管稳定性和细胞周期循环中具有潜在4 作用。RASSFIA 在抑制肿瘤的发生和发展中的作用存在两种观点：（1）通过对Rb 家族的细胞周期检查点的作用诱导细胞周期的停滞；（2）活化的Ras 蛋白与不同的下游效应子相互作用形成双向效应。在促进细胞生长和分化的同时，它还促进细胞睡眠，诱导终末分化和凋亡，并抑制细胞生长。在正常细胞类型中，Ras 的两种作用可以通过动态平衡维持细胞的正常生长和代谢。RASSFIA 基因可能是一种独特的效应蛋白，可编码Ras 的第二个作用。而因RASSFIA 基因甲基化导致的异常表达，破坏了Ras 的平衡，促进了细胞生长，导致肿瘤的发生。
解析：从支点向力的作用线作垂线，垂线段的长度即力臂。根据杠杆平衡条件F1L1=F2L2分析，若要使拉力最小，需拉力的力臂最长，支点O到力的作用点P间的连线作力臂是最长的力臂，进一步作出最小力的示意图。由于动力能使杠杆沿阻力作用的反方向转动，从而确定动力的方向向上且与力臂垂直。质量均匀分布的直木棒的重心在棒的中点，从重心起沿竖直向下的方向画一条带箭头的线段，并用符号G表示。
不局限于训练学生听说读写，综合调动他们的包括观察、想象、理解、表达等在内各种能力，引导学生用多种艺术方式（戏剧、绘画、音乐、语言）创造性回应阅读的文本。
近年发现，RASSFIA 基因不仅仅只与肺癌、乳腺癌有关，还和肾癌和卵巢癌等肿瘤的发生和发展有着密切关系，具有广谱性。De Caeres[1]等研究了不同临床分期及病理类型的低度潜在恶性肿瘤及卵巢癌病例及其相应的血液标本，发现不同临床分期中均出现了RASSFIA 基因启动子的异常甲基化，在CA125＜35 的患者中也检测到同样变化，说明RASSFIA 基因的异常，早于肿瘤系列CA125 数值的升高，是卵巢恶性肿瘤产生并发生的早期事件，可以作为卵巢癌早期诊断的可靠分子标志物。Agathanggelou[2]等研究发现，10% 的卵巢癌病例及40% 的卵巢癌细胞系中都出现RASSFIA 基因的甲基化。闫冰冰[3]等人使用PubMed 数据库搜索并筛选与卵巢癌耐药相关的27 个DNA 甲基化基因，其中包括RASSFI，并指出在卵巢癌耐药发生发展中，RASSFI 通过细胞凋亡系统参与耐药调控，具有更重要的地位。体外研究表明RASSFI在卵巢耐药组织或者细胞中呈现高甲基化低表达状态导致沉默基因表达。Bhagat[4]等分别检测了卵巢良性囊腺瘤、低度潜在恶性肿瘤及卵巢癌组织中的RASSFIA 启动子甲基化的发生率，结果显示卵巢癌组甲基化频率高于前两组。Ma[5]等在卵巢癌研究中发现，RASSFIA 高甲基化仅出现在侵袭性卵巢癌中，而交界性卵巢肿瘤及正常卵巢组织中则无RASSFIA 甲基化的发生，提示RASSFIA 基因异常甲基化可以对侵袭性卵巢癌与交界性卵巢肿瘤进行鉴别，此基因的高甲基化可以作为预测卵巢癌是否具有侵袭性的指标。同时，结果表明RASSFIA 基因高甲基化在伴有淋巴结转移患者中明显高于无淋巴结转移者，认为RASSFIA 高甲基化与卵巢癌晚期转移有关，在卵巢癌进展中起重要作用。有研究表明RASSFIA 甲基化与肿瘤分期有关，可对预后进行评估。因此，RASSFIA 基因在卵巢癌的发生中起重要的作用。
WT-1 基因位于长约50kb、编码大约3kb 长的mRNA 上，具有两个不同结构域，主要编码核蛋白，产生 4 种 mRNA 转录体，从而编码 4 种蛋白同工体。由于表达形式及水平的差异，在肿瘤发生发展过程中具有着抑癌基因及原癌基因的双重身份。WT-1 在小鼠及大鼠的试验中，表达于泌尿生殖系统和中胚层衍生的组织，而在正常人体组织中，具有限制性，仅表达于肾、卵巢、睾丸、脾和胎儿的腹膜间皮 [6] ，说明在肾和性腺形成的早期阶段是必需的，在生殖器官的分化和发育过程中发挥重要作用。研究表明，WT-1表达在卵巢表面上皮中识别，并在输卵管上皮细胞中表达，但在子宫内膜或宫颈上皮细胞中未被识别。虽然该基因在血液系统及肾脏组织中研究较多，但在包括卵巢上皮性癌、子宫内膜癌、输卵管癌等生殖系统恶性肿瘤中都有WT-1mRNA 的表达，说明WT-1支持肿瘤细胞的恶性表达。在上皮性卵巢肿瘤中，浆液性肿瘤（尤其是癌和LMP 肿瘤）中的WT-1 呈高表达，而在良性粘液性肿瘤、子宫内膜样癌和透明细胞癌中相对较低。报道证实 WT-1 在浆液性性卵巢癌中呈高表达状态[7-9]。也有报道称 WT-1 在粘液性卵巢癌和透明细胞性卵巢癌中呈高表达状态[10]，而在卵巢子宫内膜样癌和大多数子宫内膜浆液性乳头状癌中表达则呈阴性[11]。WT-1 可能对于卵巢癌的分类有所帮助。Al-Hussaini[8]等通过免疫组织化学方法，证实了WT-1 蛋白可以用作原发性卵巢浆液性癌的标志物，区别子宫和卵巢子宫内膜癌的浆液性转移性病变。张莹莹[12]发现WT-1 蛋白的表达是卵巢颗粒细胞瘤和卵巢卵泡膜细胞瘤组织分化的重要因素之一，可能参与卵泡颗粒细胞瘤和卵泡膜细胞瘤的增生过程。LIU[13]等用PCR 方法检测卵巢癌标本中的WT-1 mRNA 水平，发现 WT-1 mRNA 表达率越高，分期越晚，存活率越低。王笋[14]等发现WT-1 参与上皮性卵巢癌的发生发展，表达强度与卵巢浆液性癌的分期和分级相关。
卵巢癌作为妇科常见恶性肿瘤，缺氧是肿瘤细胞的典型特征，WT-1 基因序列中，存在低氧反应元件结合位点HRE，可以结合缺氧诱导因子（HIF-1）上调WT-1 的表达，激活WT-1 转录，进一步与血管内皮生长因子（VEGF）相互作用，促进新血管的生成[15]。在上皮性卵巢癌中，在铂类耐药患者中，VEGF 表达水平要高于铂类敏感者，这可能与VEGF 介导的血管生成有关[16]。因此，综上所述，RASSFIA 与WT-1 参与卵巢癌的发生发展过程，并在卵巢癌耐药机制中可能存在一定联系，但具体关联，目前尚不清楚，需待进一步研究及证实。
参考文献
[1]De Caceres I, Battagli C, Esteller М, et al. Tumor Cell-Specific BRCA1 and RASSFIA Hypermethylation in Serum,Plasma,and Peritoneal Fluid from Ovarian Cancer Patients[J].Cancer Res,2004,64,6476-6481
[2]Agathanggelou A,Honorio S,Мacartney DP,et al. Мethylation associated inactivation of RASSFIA from region 3p21.3 in lung,breast and ovarian tumors[J].Oncogene,2001,20(12):1509-18.
[3]闫冰冰,李力.DNA 甲基化与卵巢癌多药耐药及预后的关系[J]. Chin J Cancer Biother, 2015, 22(3).
[4]Rahul Bhagat,Shilpa Chadaga,C.S.Premalata,et al.Aberrant promoter methylation of the RASSFIA and APC genes in epithelial ovarian carcinoma development[J].Cellular Oncology,2012,35(6):473-479.
[5]Мa L,Guo Q,Мa Y,et al.Clinicopathological implications of inactication of RASSFIA in serous epithelial ovarian cancers[J].Eur J Gynaecol Oncol,2009,30(4):370-374.
[6]Klattig J, Sierig R,Kruspe D, et al. Wilms′ tumor protein Wt-1 is an activator of the anti-Мǜllerian hormone receptor gene Amhr-2[J]. Мol Cell Biol, 2007,27( 12): 4355-4364.
[7]Goldstein N S, Bassi D, Uzieblo A. WT1 is an integral component of an antibody panel to distinguish pancreaticobiliary and some ovarian epithelial neoplasms[J]. American Journal of Clinical Pathology, 2001,116(2):246-252.
[8]Al-Hussaini М, Stockman A, Foster H, et al. WT-1 assists in distinguishing ovarian from uterine serous carcinoma and in distinguishing between serous and endometrioid ovarian carcinoma[J]. Histopathology,2004,44(2):109-115.
[9]Acs G, Pasha T, Zhang P J. WT1 is differentially expressed in serous,endometrioid, clear cell, and mucinous carcinomas of the peritoneum,fallopian tube, ovary, and endometrium[J]. 2004,23(2):110-118.
[10]Shimizu М, Toki T, Takagi Y, et al. Immunohistochemical detection of the Wilms’ tumor gene (WT1) in epithelial ovarian tumors[J]. International Journal ofGynecological Pathology, 2000,19(2):158-163.
[11]Wang Z Y.The Wilms’tumor gene product,WT-1,represses transcription of the platelet-derived growth factor A-chain gene[J].J Biol Chem,1992,267(31):21 999.
[12]张盈盈,姚汉武.WT-1 蛋白在卵巢颗粒细胞瘤和卵泡膜细胞瘤中的表达及意义[J].Shanxi Мed J ,February,2009,38,(2).
[13]Liu Z, Yamanouchi K, Ohtao T, et al. High Levels of Wilms’ Tumor 1 (WT1)Expression Were Associated with Aggressive Cl inical Features in Ovarian Cancer [J]. Anticancer Res, 2014,34(5):2331-2340.
[14]王笋,王菁,韩毅,等.WT-1、Smac 蛋白在上皮性卵巢癌中的表达和临床意义研究[J]. Progress in Мodern Biomedicine ,2018，18(21).
[15]BARRESIV,CAFFOМ,BRANCAG,et all. The density of microvessels positive for Wilms’ tumour1 protein( WT1) is an independent predictor of recurrence risk in meningiomas[J].Brain Tumor Pathol,2015,32(3):202209.
[16]Siddiqui GK,Мaclean AB,Elmasry K,et al.Immuno histochemical expression of VEGF predicts response to platinum based chemotherapy in patients with epithelial ovarian caner[J].Angiogenesis,2011,14(2):155-61.
中图分类号：R711.75
文献标识码：A
DOI:10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.86.022
本文引用格式：韩娜,韩萍.RASSFIA 及WT-1 在上皮性卵巢癌中研究进展[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(86):56,60.
标签：卵巢癌论文; 卵巢论文; 基因论文; 肿瘤论文; 细胞论文; 医药论文; 卫生论文; 肿瘤学论文; 泌尿生殖器肿瘤论文; 《世界最新医学信息文摘》2019年第86期论文; 华北理工大学研究生学院论文; 华北理工大学附属医院论文;