CGRP对人牙周膜干细胞成骨分化和成血管能力影响的体外研究

论文摘要

目的体外探究降钙素基因相关肽（CGRP）对人牙周膜干细胞（hPDLSCs）成骨分化和成血管能力的影响。方法采用组织块法分离培养hPDLSCs,流式细胞仪和免疫组织化学法鉴定细胞。给予不同浓度的CGRP(0 mol/L、10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-77 mol/L)处理,CCK-8法分析CGRP对hPDLSCs增殖能力的影响,RT-PCR技术在培养的第3、7、14天RT-PCR技术检测碱性磷酸酶（ALP）、核心结合因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）、血管内皮生长因子（VEGF）基因mRNA表达,Western blot法检测Runx2、OCN、VEGF蛋白表达。成骨诱导7d后行ALP染色,成骨诱导21d行茜素红染色。结果从人牙周膜组织中分离培养的细胞经鉴定符合间充质干细胞的特征。CCK-8结果显示,CGRP在一定范围内可促进hPDLSCs的增殖（P<0.05）。RT-PCR和Western blot结果显示,10-8mol/L的CGRP可显著上调ALP、RUNX2、OCN、VEGF基因和蛋白的表达（P<0.05）。ALP和茜素红染色结果显示,10-8mol/L的CGRP可显著促进hPDLSCs成骨分化过程中ALP的表达和钙结节的形成。结论10-8mol/L的CGRP可促进hPDLSCs体外成骨分化和成血管能力。

论文目录

• 中英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 2 材料与方法
•   2.1 材料
•   2.2 方法
•   2.3 统计学处理
• 3 结果
•   3.1 hPDLSCs体外分离培养
•   3.2 hPDLSCs鉴定
•   3.3 CCK-8 检测CGRP对 hPDLSCs增殖能力的影响
•   3.4 RT-PCR检测CGRP对hPDLSCs成骨分化相关基因和 VEGF 基因表达的影响
•   3.5 Western blot检测RUNX2、OCN、VEGF蛋白水平的表达
•   3.6 ALP染色及茜素红染色
• 4 讨论
• 5 结论
• 6 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
•   参考文献

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 王芳

导师: 何家才

关键词: 降钙素基因相关肽,人牙周膜干细胞,成骨分化,成血管能力,双重调控作用

来源: 安徽医科大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 安徽医科大学

分类号: R329.2

总页数: 55

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