导读:本文包含了百脉根论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:固氮,根瘤,种质,干旱,抗旱性,不定根,基因。
百脉根论文文献综述
简忠领,赵丽丽,王普昶,孙小富,陈超[1]（2019）在《干旱胁迫下耐旱野生百脉根抑制消减文库构建与分析》一文中研究指出百脉根(Lotus corniculatus)是一种具有广阔应用前景的豆科牧草,但推广利用效率受干旱影响严重。为解决这一问题,本课题组经过多年研究,筛选出了高耐旱性百脉根种质B08,为进一步研究B08种质的抗旱机理,本实验运用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)技术构建了B08百脉根干旱胁迫诱导基因表达的正反向抑制消减杂交c DNA文库,从正反向文库中各随机挑选600个阳性克隆进行测序分析,结果表明:(1)正反向文库分别得到574条和595条高质量序列,平均长度分别为207.5和242.7 bp。对高质量序列数据进行数据组装,最终得到632条unigenes序列,其中正库获得178条,反库获得454条。(2)将获得的632条unigenes序列与公共数据库进行BLAST比对,最终有147条序列被注释成功,其中80条是功能已知的基因,67条是功能未知基因,此外还发现了485条新基因。(3)对NCBI NonRedundant Protein Sequence Database (nr)注释结果进行物种统计,结果显示与毛果杨(Populus trichocarpa)、苹果(Malus domestica)、菠菜(Spinacia oleracea)、大麦(Hordeum vulgare)、油菜(Brassica napus)、木豆(Cajanus cajan)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)、中果咖啡(Coffea canephora)等同源性较高。对正反文库筛选到的序列进行基因本体(Gene Ontology, GO)功能分类,结果显示参与细胞、细胞成分、细胞器、结合活性、代谢过程、催化活性、细胞过程的序列所占比例较大。(4)获得的unigenes涉及植物光合作用、能量代谢、激素的合成、蛋白质代谢、核酸代谢、离子转运和信号转导等。(5)发现了和植物抗旱机制密切相关的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(serine/threonine-protein phosphatase)、类钙调素蛋白(calmodulin-like protein,CML)、吲哚-3-乙酸诱导蛋白ARG7 (indole-3-acetic acid-induced protein ARG7)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)。本研究结果为下一步克隆并验证百脉根抗旱相关基因、发现抗旱相关新基因、研究百脉根抗旱分子机制以及培育高抗旱性百脉根品种提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年12期）
李宗英,王丹,边佳辉,孙占敏,傅华[2]（2019）在《百脉根分子生物学主要领域研究进展》一文中研究指出百脉根(Lotus corniculatus)作为质量优良的多年生豆科牧草,其营养丰富、适口性好、生态适应性强,可广泛应用于畜牧养殖业、园林绿化以及土壤修复等,亦可用于草药制剂,治疗某些人类疾病。为扩大百脉根在生产实践中的应用,国内外对其开展了深入研究。本文简述了百脉根的7个研究领域包括遗传多样性与系统进化分析、抗逆境胁迫、抗除草剂、根瘤固氮、缩合单宁、作为生物反应器以及药理学应用的研究进展,分析了百脉根研究中存在的不足,并对百脉根的应用前景进行了展望,以期为百脉根的深入研究提供参考。(本文来源于《草业科学》期刊2019年11期）
吕赟,丘日光,杨仕梅,吴佳海,宋莉[3]（2019）在《百脉根PIN基因家族的鉴定与分析》一文中研究指出生长素输出载体蛋白PIN-formed(PIN)是一类调控植物生长素极性运输的重要载体元件,与植物生长发育密切相关。利用生物信息学方法对百脉根(Lotus corniculatus)PIN基因家族成员(LjPIN)进行筛选、鉴定,并对其结构特征、系统进化、编码蛋白质性质、顺式作用元件组成和表达特性等进行研究,为其功能鉴定及利用奠定基础。结果表明,百脉根基因组中含有27个LjPIN成员,主要分布在1—5号染色体上;27个LjPIN基因含8个可变剪切位点,编码35个蛋白质;除了LjPIN4、LjPIN13、LjPIN23基因外,其他LjPIN基因均含有内含子,内含子数和外显子数均为1～10个;LjPIN与拟南芥AtPIN、大豆GmPIN在进化关系上较接近,与水稻OsPIN较远;LjPIN蛋白大多为碱性的两性稳定蛋白质,一般含有5种保守基序,基序数量2～9个;LjPIN基因除了含有顺式作用基本元件CAAT-box和TATA-box外,还含有光响应、激素响应及生长发育相关的调控元件;11个LjPIN基因在根、茎、叶、花和不同形成时期种子中呈时空差异表达。(本文来源于《河南农业科学》期刊2019年08期）
丘日光[4]（2019）在《ChIFN-α参与百脉根不定根发育的分子机制研究》一文中研究指出根系的形成和发育是牧草产量的重要基础,该过程由若干基因参与调控。来源于动物细胞的调节物质ChIFN-ɑ能促进植物根系形成和发育,但其在植物细胞中的作用机制尚不清楚。论文通过电镜观察、转录组测序和荧光定量PCR等技术,在对ChIFN-α和百脉根根系发育关系研究基础上,进一步探究其在百脉根不定根形成和发育过程中的分子调控机制,以解析动物细胞因子在植物细胞中的作用途径,为植物生长发育调控提供新的选择途径。主要研究内容和结果如下:1.转ChIFN-α基因百脉根的鉴定分析。通过GUS组织化学活性检测以及基因组PCR扩增检测目的基因,发现外源ChIFN-α基因稳定存在于转基因百脉根(TP)受体植物中。2.ChIFN-ɑ对百脉根不定根发育的影响。以野生型亲本(WT)为对照,观察比较转ChIFN-α基因百脉根的不定根发育情况。发现在不定根形成及其发育初期的12d观察期内,TP百脉根的不定根比WT提前3d出现,发育较快,且不定根根毛数量多。ChIFN-ɑ基因表达促进受体百脉根不定根的形成和发育。3.ChIFN-α介导的百脉根不定根发育分子调控网络。水培诱导不定根发育0d、3d、6d、9d和12d的转录水平分析表明,TP百脉根与其WT亲本在根系发育分子调控上的差异表达基因共有16380条,TP百脉根不定根的发育和信号转导、DNA复制、转录翻译等生物过程密切相关,23类WT未显着富集的基因表达模式在TP中被显着富集,差异表达的转录因子中成员最多的ERF、bHLH、MYB、WRKY等家族对于不定根发育和外界胁迫响应均有调控作用。转录组数据分析表明,TP百脉根的基因尤其是发育调控基因表达更丰富、更活跃。ChIFN-α介导的不定根发育通过丰富的调控途径构成多元化的分子调控网络。4.ChIFN-ɑ介导的根系发育调控途径。转录组分析表明,ChIFN-ɑ介导的不定根发育与膜蛋白基因的差异表达有关。经过外源CaCl_2和LaCl_3处理,结合转录组和qRT-PCR分析发现,ChIFN-ɑ通过Ca~(2+)响应的C2结构域蛋白激酶(Lj1g3v0026680)参与根系发育调控,其也可能借助Ca~(2+)激活MYB、TALE、Dof等转录因子家族成员,进而促使百脉根根系形成和发育基因转录而进行调控。5.建立百脉根酵母双杂交体系。通过SMART技术构建了ChIFN-ɑTP百脉根不定根发育cDNA文库,文库滴度为9.175×10~8,扩增条带丰富,扩增率为100%。构建了无自激活和对酵母细胞生长无毒的pGBKT7-ChIFN-ɑ诱饵载体质粒,通过Mating法双杂交和缺陷型培养基多轮筛选,获得部分ChIFN-ɑ互作候选阳性克隆。初步建立酵母双杂交体系,可运用于下一步筛选ChIFN-α植物识别/互作蛋白。(本文来源于《贵州大学》期刊2019-06-01）
简忠领[5]（2019）在《干旱胁迫下百脉根SSH文库构建与分析》一文中研究指出百脉根(Lotus corniculatus)作为优良豆科牧草有很大的利用前景,但干旱限制了其推广利用效率。研究植物在干旱胁迫下基因的差异表达是寻找抗旱基因和培育抗旱品种的重要手段。抑制消减杂交是筛选差异表达基因的一种有效方法。为培育高抗旱性百脉根种质,本课题组经过多年研究筛选出高抗旱性百脉根种质B08,为了解B08百脉根种质抗旱机理、培育高抗旱性百脉根、挖掘相关抗旱基因、推广利用B08百脉根,本研究以B08百脉根叶片为材料,采用抑制消减杂交技术构建干旱胁迫下B08百脉根正反抑制消减文库,从正反文库中各随机挑选600个阳性克隆测序分析,筛选到了B08百脉根抗旱相关基因,再通过对这些基因所调控的抗旱相关植物激素、渗透性调节物质、叶绿素、抗氧化酶活性进行测定,得到以下结论:(1)成功构建了B08百脉根种质SSH c DNA文库。(2)正反文库各得到574条、595条高质量序列,正库序列平均长度为207.5 bp,反库序列平均长度为242.7 bp。使用Phred对测序得到的1 169条高质量序列数据进行组装,最终得到632条Unigene序列(又称独立基因),其中正向文库178条,反向文库454条。(3)用得到的632条Unigene分别与NCBI nt、NCBI nr、Swissport等数据库进行Blast比对,有147条基因注释成功,另外还发现了485条新基因。所得到的632条Unigene序列比对结果显示,这些基因大部分与百脉根基因组DNA1-6号染色体上的基因同源。(4)对NCBI nr注释结果进行物种统计,结果显示与毛果杨、苹果、菠菜、大麦、油菜等同源性较高。对正反库注释信息进行物种统计,这些基因中参与细胞及细胞器构成、结合活性、细胞代谢过程、催化作用的比例较大。(5)得到的Unigene涉及植物激素合成、能量代谢、光合作用、蛋白质代谢、离子转运、核酸代谢、信号转导等。(6)发现了与植物抗旱密切相关的吲哚-3-乙酸诱导蛋白ARG7(Indole-3-acetic acid-induced protein ARG7)、丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(Serine/Threonine-protein phosphatase)、类钙调素蛋白(Calmodulin-like protein,CML)、丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)等。(7)ARG7基因差异表达的干旱处理组百脉根叶片脯氨酸、可溶性糖含量显着高于对照组(P<0.05)。干旱第3 d、5 d、7 d各处理脯氨酸含量分别增加了7.9倍、8.1倍、8.4倍,增强了百脉根抗旱性。(8)类钙调素蛋白基因差异表达的干旱处理组百脉根叶片过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性显着提高(P<0.05)。干旱第3 d、5 d、7 d各处理过氧化氢酶活性分别增加了4.1倍、1.9倍、4.0倍,过氧化物酶活性分别增加了3.7倍、5.4倍、4.6倍,超氧化物歧化酶活性分别增加了3.5倍、1.8倍、2.9倍,有利于清除百脉根叶片细胞中的活性氧,提高抗旱性。(9)干旱处理下,百脉根叶片叶绿素a叶绿素b,总叶绿素含量显着降低,第5d开始无显着变化。类钙调素蛋白基因差异表达的干旱处理组百脉根叶片中叶绿素a/b的值显着高于对照组。(10)丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶、ARG7基因差异表达的处理组百脉根叶片IAA、ABA含量显着增加(P<0.05)。干旱第3 d、5 d、7 d各处理IAA含量分别增加了1.5倍、1.2倍、1.3倍,ABA含量分别增加了46.14%、53.34%、46.45%,增强了百脉根对干旱环境的适应性。(本文来源于《贵州大学》期刊2019-06-01）
李宗英[6]（2019）在《百脉根种质资源缩合单宁评价及关键基因的挖掘》一文中研究指出百脉根(Lotus corniculatus),豆科百脉根属,多年生草本植物。发源地为亚欧大陆温带地区,现世界各地及我国均有分布。百脉根茎叶细多,适口性好,具有较高的饲用价值;其最大特点为茎叶富含缩合单宁,作为饲草能够有效降低家畜臌胀病的发生。本研究收集来源于世界各地的235份百脉根种子建立种质资源圃,重点对叶片中的缩合单宁含量进行定性定量测定,分析缩合单宁含量与13个农艺性状之间的相关性,并利用农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法将缩合单宁生物合成过程中的关键酶基因ANR(花青素还原酶)转入拟南芥中,对T_3代转基因拟南芥植株中的缩合单宁含量进行测定,以期为抗臌胀病百脉根品种的选育奠定基础。现主要研究结果如下:1.235份百脉根种质叶片中缩合单宁含量的变化范围为5~16 g/Kg干物质(DM),将其划分为3个等级:缩合单宁含量较低的种质41份(5~7 g/kg DM),中等的种质122份(7.1~9.5 g/kg DM)和较高种质72份(9.6~16 g/kg DM)。2.对百脉根种质资源圃中13个主要农艺性状进行观测,分析了缩合单宁含量与农艺性状之间的关联性。结果显示:13个农艺性状的变异系数在11.01%~40.32%范围内,表明百脉根种质具有丰富的多样性;但缩合单宁含量与农艺性状间无相关性。3.将缩合单宁含量较高的“SVW198号”百脉根种质作为试验材料,通过RT-PCR克隆获得百脉根ANR基因的cDNA序列,该片段开放阅读框1017 bp,编码338个氨基酸;该基因与日本百脉根ANR基因序列对比发现,基因的同源性高达99.70%,将其命名为LcANR。4.通过构建pCAMBIA3301-LcANR植物表达载体,利用农杆菌侵染花序的方法转化拟南芥。利用Basta筛选及PCR鉴定确定LcANR基因已经成功整合到拟南芥基因组中。对T_3代转LcANR基因拟南芥植株中的缩合单宁含量进行定量测定,结果发现:与野生型拟南芥相比,转基因拟南芥中的缩合单宁含量是野生型的1.45~1.58倍,表明ANR基因在缩合单宁生物合成途径中发挥着重要作用。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-04-01）
凌颖,张婷婷,端木德强,张忠明,曹扬荣[7]（2019）在《百脉根Rboh基因家族在共生固氮中的功能研究》一文中研究指出为探索植物呼吸爆发氧化酶(respiratory burst oxidase homologue,Rboh)基因家族在共生固氮中的功能和作用机制,利用分子生物学、细胞生物学和遗传学等方法,围绕百脉根Rboh基因家族中在根瘤中特异性表达的基因LjRbohA (Lj5g3v1497840)以及在根瘤中高表达的基因LjRbohB (Lj6g3v1549190)和LjRbohC(Lj5g3v1497820),分别对其蛋白的亚细胞定位、基因的表达模式、基因的启动子活性及蛋白的功能进行了研究。结果显示:LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC蛋白都定位在植物的细胞膜上;LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC基因在接种根瘤菌后表达上调;LjRobhA和LjRobhB基因在根瘤、维管束和侧根原基表达;利用CRISPR-Cas9技术对LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC3个基因分别进行敲除导致结瘤数目减少。这些研究结果表明,LjRbohA、LjRbohB和LjRbohC这3个基因可能都参与调控百脉根与根瘤菌的共生结瘤过程。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2019年01期）
樊玉倩,肖爱芳,张忠明[8]（2019）在《百脉根起始结瘤相关转录因子间相互作用的鉴定》一文中研究指出以模式豆科植物百脉根为材料,利用酵母双杂交和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)技术,研究调控起始结瘤基因表达的转录因子IPN2、NSP2、CYCLOPS、DELLA间的相互作用。结果显示,百脉根IPN2与DELLA、NSP2与DELLA、CYCLOPS与DELLA均有相互作用。表明IPN2、DELLA可能参与并形成一个大的蛋白复合物,网络调控豆科植物起始结瘤基因的时空表达。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2019年01期）
许泽远,苟洪兰,段柳剑,张忠明[9]（2019）在《百脉根半胱氨酸蛋白酶基因在根瘤衰老过程中的表达分析》一文中研究指出为明确半胱氨酸蛋白酶与定型根瘤衰老的相关性,通过与已鉴定的紫云英半胱氨酸蛋白酶AsNODf32进行序列比对分析,从百脉根中鉴定出2个与根瘤衰老相关的蛋白酶基因LjCyp1和LjCyp5。蛋白序列及结构分析表明,LjCyp1和LjCyp5同源性高达96.2%,均含有2个典型的半胱氨酸蛋白酶结构域和液泡定位信号肽,属于木瓜蛋白酶家族。体外酶活检测显示,2个蛋白都具有半胱氨酸蛋白酶活性。通过Realtime PCR和组织化学定位分析表明,2个蛋白酶基因主要在成熟和衰老的根瘤中表达。结果表明LjCyp1和LjCyp5可能在百脉根根瘤衰老过程中发挥重要作用。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2019年01期）
刘超,冯勇,董笑笑,张忠明,朱辉[10]（2019）在《百脉根泛素结合酶LjE2的表达及活性鉴定》一文中研究指出为了研究泛素化作用在豆科植物共生固氮过程中的调控功能和作用机制,利用拟南芥泛素结合酶E2的序列,在百脉根基因组上鉴定得到14个编码E2(LjE2)的基因,从LjE2中克隆到11个基因并构建了融合表达载体pET-LjE2s:His。通过大肠杆菌表达系统,表达并纯化到10个LjE2:His融合蛋白。经体外泛素化及Western blot分析,在10个LjE2中有9个具有泛素结合酶活性,1个(LjE2-5)未检测到泛素结合酶活性。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2019年01期）
百脉根论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
百脉根(Lotus corniculatus)作为质量优良的多年生豆科牧草,其营养丰富、适口性好、生态适应性强,可广泛应用于畜牧养殖业、园林绿化以及土壤修复等,亦可用于草药制剂,治疗某些人类疾病。为扩大百脉根在生产实践中的应用,国内外对其开展了深入研究。本文简述了百脉根的7个研究领域包括遗传多样性与系统进化分析、抗逆境胁迫、抗除草剂、根瘤固氮、缩合单宁、作为生物反应器以及药理学应用的研究进展,分析了百脉根研究中存在的不足,并对百脉根的应用前景进行了展望,以期为百脉根的深入研究提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
百脉根论文参考文献
[1].简忠领,赵丽丽,王普昶,孙小富,陈超.干旱胁迫下耐旱野生百脉根抑制消减文库构建与分析[J].农业生物技术学报.2019
[2].李宗英,王丹,边佳辉,孙占敏,傅华.百脉根分子生物学主要领域研究进展[J].草业科学.2019
[3].吕赟,丘日光,杨仕梅,吴佳海,宋莉.百脉根PIN基因家族的鉴定与分析[J].河南农业科学.2019
[4].丘日光.ChIFN-α参与百脉根不定根发育的分子机制研究[D].贵州大学.2019
[5].简忠领.干旱胁迫下百脉根SSH文库构建与分析[D].贵州大学.2019
[6].李宗英.百脉根种质资源缩合单宁评价及关键基因的挖掘[D].兰州大学.2019
[7].凌颖,张婷婷,端木德强,张忠明,曹扬荣.百脉根Rboh基因家族在共生固氮中的功能研究[J].华中农业大学学报.2019
[8].樊玉倩,肖爱芳,张忠明.百脉根起始结瘤相关转录因子间相互作用的鉴定[J].华中农业大学学报.2019
[9].许泽远,苟洪兰,段柳剑,张忠明.百脉根半胱氨酸蛋白酶基因在根瘤衰老过程中的表达分析[J].华中农业大学学报.2019
[10].刘超,冯勇,董笑笑,张忠明,朱辉.百脉根泛素结合酶LjE2的表达及活性鉴定[J].华中农业大学学报.2019
论文知识图
