导读:本文包含了胁迫相关蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:南瓜,高温胁迫,CmHSP70-5基因,基因表达
胁迫相关蛋白论文文献综述
胡艳平,周扬,杨春,廖道龙,朱白婢[1]（2019）在《南瓜热激蛋白相关基因CmHSP70-5的克隆和高温胁迫下的表达分析》一文中研究指出基于南瓜基因组序列,采用PCR的方法从南瓜cDNA中克隆1个热激蛋白相关基因,命名为CmHSP70-5,采用生物信息学方法分析该基因编码的蛋白与其同源蛋白的系统发育关系,利用荧光定量PCR研究南瓜幼苗在高温胁迫下CmHSP70-5基因的表达量。结果表明:CmHSP70-5基因全长1 953 bp,其编码的CmHSP70-5蛋白与拟南芥AtHSP70-5的亲缘关系最近。未经高温处理时CmHSP70-5基因在根中的表达量要显着高于茎和叶。在高温胁迫下,根、茎、叶中CmHSP70-5基因均呈现上调表达,均在处理后3 h表达量达到最大,说明CmHSP70-5基因的表达与南瓜高温胁迫有关。(本文来源于《中国蔬菜》期刊2019年08期）
张伟佳,卢少坤,李荣华,王春琳,母昌考[2]（2019）在《低盐胁迫下叁疣梭子蟹γ-氨基丁酸及其A型受体相关蛋白对渗透压调节的影响》一文中研究指出为探究低盐胁迫下γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体相关蛋白(GABARAP)在叁疣梭子蟹渗透压调节过程中起到的作用,实验检测了低盐度10条件下,叁疣梭子蟹在0, 3, 6, 9, 12, 24, 36,48 h的血清渗透压、血清氯离子(Cl-)浓度等指标,同时对鳃组织的GABA量以及GABARAP基因表达量变化进行测定.结果显示,血清渗透压和血清Cl-浓度在12 h内显着下降(P<0.05), 12 h后趋于稳定;相对0 h,血清Cl-浓度降低17.93%,血清渗透压降低24.46%,与外界海水渗透压的差值维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1). GABA量及GABARAP基因表达量波动上升, 12 h后基本维持稳定.研究结果表明,叁疣梭子蟹对低盐度条件的适应性调节在12 h内进行,之后基本维持稳定,GABA量以及GABARAP基因表达量在此过程中呈现显着的正相关关系,对血清Cl-浓度的调节起到了重要作用,使得12 h后血清渗透压与外界海水渗透压维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1),保证各项生理活动的正常进行.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2019年03期）
梁敏[3]（2019）在《盐胁迫下宁夏枸杞差异蛋白的筛选及离子转运相关基因的表达》一文中研究指出随着土壤盐渍化的加重,盐胁迫对植物生长发育的影响也日趋严重。宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)作为一种盐生植物,具有耐盐碱、耐贫瘠的特点,是改良盐碱地的先锋植物之一。因此,开展宁夏枸杞耐盐的生理及分子机理的研究,阐明宁夏枸杞对盐碱胁迫的应答机制,将为利用宁夏枸杞进行大面积的盐碱地改良提供可靠的理论依据。本研究以宁夏枸杞“宁杞1号”为实验材料,采用蛋白质组学和生理学相结合的方法,运用TMT定量技术和qRT-PCR技术对不同浓度NaCl(0、100、200、300mmol·L-1)处理下的宁夏枸杞的差异蛋白的筛选、相关离子转运基因的表达、渗透调节及抗氧化保护系统等生理变化进行了研究。主要研究结果如下:1、通过TMT技术对不同浓度盐胁迫下宁夏枸杞蛋白质组学进行了研究,共鉴定到5305个蛋白,其中4631个可定量。采用双样本双尾T检验方法(p-value<0.05)对蛋白进行分析,共鉴定出差异表达蛋白885个,其中上调蛋白600个,下调蛋白285个。100 mmol·L-1NaCl处理的与对照相比,差异蛋白175个,上调蛋白117个,下调蛋白58个;200mmol·L-1 NaCl处理的与对照相比,鉴定到590个,上调蛋白378个,下调蛋白212个;300 mmol·L-1 NaCl处理的与对照相比,鉴定到120个,上调蛋白105个,下调蛋白15个。2、GO功能和KEGG pathway显着性富集分析发现,差异表达蛋白主要参与碳代谢、能量代谢、抗氧化代谢及离子转运等重要生物学过程。3、盐胁迫下宁夏枸杞根生理生化指标的测定结果显示,随着盐浓度的增加,枸杞根质膜透性逐渐增大,MDA含量呈逐渐升高趋势;抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性在100 mmol·L-1NaCl处理时最高,在200mmol·L-1和300mmol·L-1NaCl处理时有所降低:H2O2含量和O2-产生速率随盐胁迫浓度的增加均升高;脯氨酸含量随盐胁迫浓度的增加呈逐渐升高趋势、可溶性糖含量总体呈先升高后降低又升高的变化趋势,在100 mmol L-1NaCl处理时先升高而200mmol·L-1 NaCl处理时降低;可溶性蛋白含量呈先升高后降低,即100mmol·L-1NaCl时最高;Na+含量总体随胁迫浓度增加呈升高趋势,K+含量整体呈先升高后降低的趋势,即在100mmol·L-1NaCl处理时最高,Na+/K+比随盐胁迫浓度的增加呈上升趋势。4、编码质膜的Na+/H+转运蛋白与H+-ATPase基因LbSOS1和LbHA1基因的表达水平随胁迫浓度的增加,呈升高趋势;编码液泡膜的Na+/H+转运蛋白LbNHX1基因的表达水平先降低后升高,液泡膜H+-ATPase基因Lb VHA-C1表达水平先升高后降低在升高的趋势;编码Na+/K+转运蛋白基因,LbHKT1基因的表达水平先降低后升高。五个离子转运基因与Na+浓度存在一定的相关性,部分达到显着或极显着正相关。LbNHX1基因、LbHA1的表达量与Na+的含量呈极显着正相关关系,LbSOS1基因与Na+含量显着正相关性,LbVHA-C1与LbHKT1基因的表达水平与Na+呈正相关。(本文来源于《宁夏大学》期刊2019-04-01）
周菲,程晨晨,王然,杨英杰,宋健坤[4]（2019）在《杜梨干旱胁迫相关水通道蛋白基因的筛选与克隆》一文中研究指出以杜梨实生苗为材料,采用15%PEG 6000进行模拟干旱处理,利用qRTPCR、同源重组、亚细胞定位等方法,研究了不同水通道蛋白基因在15%PEG 6000胁迫条件下表达水平的变化趋势,筛选了响应干旱胁迫相关的水通道蛋白基因,并对其进行克隆和分析,以期为梨抗旱基因筛选提供参考依据。结果表明:AQPs在杜梨的根、茎、叶中均有表达,且随着胁迫时间的延长,大部分AQPs在根系中的表达水平呈先上升后下降的趋势,其中PIP2;2基因在胁迫处理3h后,相对表达量最高;从杜梨根系中克隆获得PbPIP2;2,该基因包含一个完整的846bp的开放阅读框,编码281个氨基酸。氨基酸序列比对分析结果表明,PbPIP2;2与其它近缘物种具有一致的保守功能域,其中与苹果MdPIP2;2、白梨PcPIP2;2相似度最高。洋葱表皮亚细胞定位发现PbPIP2;2基因定位在质膜上。(本文来源于《北方园艺》期刊2019年02期）
刘士霞[5]（2018）在《逆境胁迫相关蛋白和含有JmiC结构域的组蛋白去甲基化酶在番茄抗病中的功能研究》一文中研究指出灰葡萄孢菌,即灰霉菌(Botrytis cinerea)属于死体营养型病原真菌,能够侵染危害多达200种单子叶和双子叶植物。灰霉菌侵染导致的灰霉病被认为是危害作物生产、蔬菜质量及水果保鲜的第二大病害。而番茄丁香假单胞杆菌(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,Pst DC3000),是一种半活体营养型病原细菌,其引发的黑斑病也极大影响了作物生产。本文我们利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术分析逆境胁迫相关蛋白SAP家族和含有JmjC结构域的去甲基化酶JMJ家族在抗病中的功能,尤其重点研究SlSAP3、SlSAP4以及SlJMJ7在番茄与B.cinerea和Pst DC3000互作中可能的作用机制。植物SAP主要参与对非生物胁迫如冷、热、干旱、高盐、渗透压以及重金属的响应及调控。番茄SAP家族共有13个成员,多数能够响应病原菌及植物激素的诱导,VIGS沉默SlSAPs接种B.cinere 发现,SlSAP4和SlSAP10沉默后降低番茄对B.cinerea的抗性;接种Pst DC3000,SlSAP3和SlSAP10沉默后对Pst DC3000的抗性减弱。由于SlSAP10沉默植株表现叶片退绿黄化症状,叶绿素含量降低,本文不做深入研究。研究发现,SlSAP4沉默植株对B.cinerea更加感病,接种B.cinerea后活性氧含量降低,并抑制B.inerea诱导的JA/ET相关基因表达;同时烟草瞬时表达SlSAP4增强对B.cinerea的抗性。体外实验证明SlSAP4不具有体外泛素化活性,但能够与泛素穿梭/运输蛋白SlRAD23家族,除SlRAD23a外的SlRAD23c、SlRAD23d.1 及SlRAD23d.2互作,且主要是SlSAP4的A20结构域与SlRAD23d.1的UBA结构域起作用。SlRAD23d.Sl沉默植株对B.cinerea的抗性降低,却并不改变其它3个成员沉默后的抗性。因此,我们认为SlSAP4主要通过调控B.cinerea诱导的活性氧积累,改变JA/ET相关基因表达,并可能参与SlRAD23介导的26S蛋白酶体途径,进而调控B.cinerea介导的抗性反应。与SlSAP4功能不同,SlSAP3沉默植株对PsP DC3000抗性减弱,SlSAP3超表达植株对Pst DC3000抗性增强。SlSAP3沉默或超表达改变了PP DC3000诱导的SA相关基因(SlPR1a、SlPR1b、SlPRp2和SlEDS1)的水平;影响flg22介导的PTI反应,如引发ROS产生,PTI下游基因SlPT15以及SlLRR22的改变。SlSAP3同样不具有体外泛素化活性,却与非典型热激蛋白SlBOB1、SlBOB2互作,且能够与SlRAD23家族除SlRAD23a外的3个成员互作。进一步研究发现,SlBOB1沉默植株增强对Pst DC3000抗性,且SlBOBs共沉默植株进一步提高了对Pst DC3000的抗性;SlRAD23s沉默植株对Pst DC3000的抗性却并不显着。以上表明,SlSAP3能够正调控Pst DC3000的抗性反应,可能与SlBOB和SlRAD23介导的26S蛋白酶体途径相关。含有JmjC结构域的蛋白家族是植物中广泛存在的一类去甲基化酶家族,参与植物生长发育及抗病的调控,该家族在番茄中有23个成员,多数成员能够响应病原菌及植物激素的诱导,VIGS沉默22个SlJMJs后接种B.cinerea,发现SlJMJ7和SlJMJ13沉默后增强对B.cinerea的抗性,而SlJMJ20沉默后降低对B.cinere 的抗性,本研究以S1JMJ7功能研究为主。Sl7MJ7沉默植株降低B.cinerea侵染后期活性氧水平,并提高JA途径及防御基因表达,抑制SA相关基因的水平,进而提高对B.cinerea的抗性;但是SlJMJ7超表达植株并不改变B.cinerea的致病表型。另一方面,接种Pst DC3000后,沉默植株对Pst DC3000的抗性增强,提高Pst DC3000诱导的SA相关基因以及PTI相关基因SlPTI5、SlWRKY28的表达;而超表达植株抗性减弱,抑制Pst DC3000诱导的SA及PTI相关基因表达。S1JMJ7含有保守的Fe(Ⅱ)和α-酮戊二酸酶活性位点,能够催化H3K9me2/3去甲基化,并且能够与转录因子S1LBD42互作。SlLBD42沉默植株增加对B.cinerea抗性,而削弱对Pst DC3000抗性。以上结果表明,S1JMJ7在B.cinerea和Pst DC3000介导的抗性反应中发挥重要作用,并可能与转录因子共同参与调控番茄对病原菌的互作反应。(本文来源于《浙江大学》期刊2018-12-01）
薛超[6]（2018）在《水稻盐胁迫下组蛋白乙酰化修饰特征及HATs相关基因的功能研究》一文中研究指出组蛋白修饰是表观遗传调控的重要方式之一,包括组蛋白乙酰化、甲基化、磷酸化等多种组蛋白共价修饰,对于动植物和人类的生长发育至关重要。组蛋白乙酰化修饰是由组蛋白乙酰转移酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)共同调控的一种动态可逆的修饰过程,能够参与生物体内基因转录活性的调控和重塑染色质结构状态等重要过程,进而影响到动植物的生长发育。水稻作为单子叶植物的模式生物,一直是科学家重要的研究材料。然而在水稻发育过程中的组蛋白乙酰化修饰调控基因表达和响应逆境胁迫的机制研究还有待进一步完善。因此,本研究主要以组蛋白乙酰化修饰作为研究对象,全面定性分析水稻叶片全蛋白的乙酰化修饰特征、结合盐胁迫处理重点解析组蛋白H4K5ac和H4K8ac修饰在全基因组的分布变化特征以及组蛋白乙酰转移酶基因GCN5和p300的功能分析。本研究的主要工作包括:1水稻全蛋白组赖氨酸乙酰化修饰的定性分析随着蛋白组学分析技术的发展,对于蛋白功能的确定,翻译后修饰的鉴定以及蛋白结构的分析研究也越来越深入。本研究利用LC-MS/MS技术在水稻叶片中定性出1353个赖氨酸乙酰化修饰位点,涉及866个蛋白,包括了多个新的组蛋白乙酰化修饰位点,极大的丰富了水稻中组蛋白翻译后修饰位点的研究。进一步对所有鉴定的乙酰化修饰蛋白进行GO(Gene Ontology)功能注释发现,生物学过程中发生乙酰化的蛋白与代谢过程、细胞重要进程以及应激反应相关,表明乙酰化修饰参与到调控了水稻对环境胁迫应答和核心代谢过程;在分子功能中鉴定多数的乙酰化蛋白功能具有结合活性以及催化活性。通过功能富集分析发现,鉴定的乙酰化修饰蛋白主要富集在刺激应答、代谢酶活性以及蛋白结合调控等重要的功能类型,并且参与到碳代谢通路、光合作用通路以及其他代谢途径。上述结果表明了赖氨酸乙酰化修饰参与了水稻生长发育中多种生物进程,包括光合作用、碳代谢、环境胁迫应答以及酶活调控等。2水稻盐胁迫下组蛋白H4K5ac和H4K8ac修饰在基因组的分布特征解析对水稻中首次发现的组蛋白H4K5ac和H4K8ac修饰基因组特征进行ChIP-seq和RNA-seq分析,发现水稻基因组上H4K5ac和H4K8ac修饰标记的基因广泛分布,主要分布在基因间区、外显子和内含子上,并且两种修饰都高度富集在编码基因的转录起始位点(TSS)附近。通过比较两种修饰与其他活性修饰和非活性修饰的相关性,而与非活性修饰H3K27me3显着不相关,说明H4K5ac和H4K8ac在水稻上是与转录活性相关的修饰标记类型。盐胁迫会严重影响水稻植株的正常生长发育,为了解析组蛋白修饰与盐胁迫响应基因的调控关系,本研究综合分析了盐处理后水稻幼苗的组蛋白乙酰化修饰H4K5ac和H4K8ac的变化特征以及转录水平变化特征。结合转录组数据分析差异表达基因,GO富集分析显示上调基因显着富集在刺激响应和代谢酶活性功能上,而下调基因显着富集在于光合作用相关的代谢途径。ChIP-seq分析结果表明,水稻在盐胁迫下大量基因上的乙酰化修饰状态发生改变,其中H4K5ac和H4K8ac修饰上调的基因数(2414和2717)多于修饰下调的基因数(410和537),而相对于对照组,盐胁迫导致更多的基因(4503和2893)丢失H4K5ac和H4K8ac修饰,从而导致整个基因组的修饰水平相对降低。通过进一步的相关性分析发现,水稻在盐胁迫下的H4K5/K8ac修饰水平的变化与基因表达水平之间呈正相关,并且H4K5/K8ac修饰更倾向于调控下调表达基因的转录。上述结果说明了水稻在盐胁迫下组蛋白乙酰化修饰参与调控盐胁迫相关基因的表达水平。3水稻组蛋白乙酰转移酶GCN5和p300的基因功能研究通过同源序列对比和系统进化树分析发现,水稻中组蛋白乙酰转移酶基因主要包括p300 家族的OsHAC701、OsHAC 0 和OsHAC70(统称为 OsHA4Cs)、GNAT 家族的OsHAG702(GCN5)、OsHAG703 和 OsHAG704、TAFⅡ250 家族的 OsHAF701、以及 MYST家族的OsHAM701。本研究主要以组蛋白乙酰转移酶p300家族和GCN5为研究对象,利用CRISPR/Cas9技术、RNA干扰等技术构建转化载体,导入粳稻品种日本晴中获得对应的突变体和转基因材料。通过分子生物学和表观遗传学等研究手段,解析组蛋白乙酰转移酶OsHACs和OsGCN5对水稻植株生长发育的调控作用。首先我们利用体外乙酰化活性检测对水稻GCN5的组蛋白乙酰转移酶活性进行鉴定,发现OsGCN5能够体外催化组蛋白H3多个赖氨酸位点发生乙酰化,具有乙酰转移酶催化活性。通过调查OsGCN5的RNAi材料和过表达材料的农艺性状发现,在RNAi植株中,株高、主茎穗长和结实率上都呈现显着下调,对于籽粒长度也有抑制,但是对于籽宽和粒厚没有明显的影响。而在OsGCN5基因表达上调的过表达株系中,株高、主茎穗长、剑叶长和宽、分蘖数都显着上调,说明了 OsGCN5能够正调控植株株高、穗长以及其他农艺性状,具有功能多效性。利用Westernblot检测组蛋白乙酰化修饰水平,发现RNAi植株中只有H3K18ac的修饰水平表现出显着降低,相应的在过表达材料中出现H3K18ac水平的显着上调,初步判断GCN5在水稻中能够特异催化H3K18位点的乙酰化修饰。通过调查水稻野生型和p300突变体的各种农艺性状发现,OsHAC701基因突变后,对于野生型而言,突变体植株变矮,主茎穗长变短,剑叶长变长,倒一节间的显着变短,导致突变体株高降低。而OsHAC703和OsHAC704突变后株高没有明显变化,而剑叶长、宽和有效分蘖数有所提高。对于籽粒形态,OsHACs突变体与野生型没有显着差异。Western blot结果表明,OsHAC701基因突变后,水稻叶片中H3K36ac、H4K5ac和H4K8ac的修饰水平显着降低,而OsHAC703的突变体中只有H3K36ac修饰水平显着降低,OsHAC704突变体的特定位点的组蛋白乙酰化修饰水平没有显着降低。结合农艺性状分析表明,组蛋白乙酰转移酶基因突变后影响到水稻叶片组蛋白乙酰化修饰水平,进而影响到水稻植株的正常生长。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-12-01）
任锐,杨凤玺,王涛,高乐,智海剑[7]（2018）在《大豆耐胁迫相关蛋白编码基因GmSAMDC1的克隆及表达分析》一文中研究指出S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(S-adenosine methionine decarboxylase,SAMDC)是亚精胺和精胺合成的关键酶,更是多胺生物合成的限速酶之一,在植物耐胁迫反应中发挥重要调控作用。为研究大豆SAMDC编码基因的结构和表达特性,本研究从抗病大豆品种科丰1号中克隆了位于大豆基因组2号染色体上的GmSAMDC1(Glyma. 02G128000)基因,分析结果表明:其完整ORF长度为1 068 bp,编码一个由355个氨基酸组成的包含1个SAM_decarbox结构域的蛋白; GmSAMDC1基因所编码蛋白的理论等电点为4. 86,相对分子质量为38 987. 13 Da,为亲水性蛋白,不含跨膜区;大豆中共有8个GmSAMDC1的同源基因,GmSAMDC1与红车轴草(PNY09439. 1,82. 64%)和拟南芥(At SAMDC3,67. 22%)中的SAMDC蛋白编码基因亲缘关系最近; GmSAMDC1启动子序列包含防卫和胁迫响应元件、植物激素应答元件、光应答元件等许多顺式作用元件; GmSAMDC1在花中的表达量最高,与其大豆同源基因Glyma. 01G071300(序列相似性为94. 6%)、Glyma. 18G278800(66. 8%)和Glyma. 08G25580(66. 5%)的组织特异性表达模式比较相似; Glyma. 02G128000-GFP融合蛋白在细胞膜和细胞质上表达。本研究结果为进一步阐明大豆GmSAMDC1基因在大豆耐胁迫过程中的作用提供了理论依据。(本文来源于《大豆科学》期刊2018年05期）
陈腾君,曾丹,张帆,周永力,石英尧[8]（2018）在《胁迫相关蛋白激酶OsSAPK9调控水稻对铝胁迫的反应》一文中研究指出水稻胁迫相关蛋白激酶(OsSAPKs,stress-activated protein kinase genes in rice)在调控水稻非生物胁迫信号传导中起着重要作用。本研究对OsSAPK9在水稻耐铝(Al)胁迫中的功能进行了初步研究。结果表明10 mmol/L Al处理12 h以上,OsSAPK9过表达转基因水稻植株根部Al的吸收量显着低于野生型植株; Al胁迫处理20 d,OsSAPK9过表达转基因植株株高降低百分比显着低于野生型植株。进一步分析发现OsSAPK9过表达转基因水稻植株根部超氧化歧化酶(SOD,Superoxide Dismutase)和过氧化物酶(POD,Peroxidase)的活性高于野生型,而根上部的SOD、POD和过氧化氢酶(CAT,Catalase)的活性则低于野生型植株。上述结果为改良水稻的耐铝性以及进一步揭示OsSAPK9调控水稻耐铝胁迫反应的分子机制提供了信息。(本文来源于《植物遗传资源学报》期刊2018年06期）
侯明,李明沅,杨心瀚[9]（2018）在《外源钒胁迫对甜玉米幼苗植物螯合肽相关蛋白含量的影响》一文中研究指出采用水培方法,研究了不同钒(V)浓度(0、5、10、20、40 mg·L~(-1))胁迫后,甜玉米幼苗地上部和地下部谷胱甘肽(GSH)、植物螯合肽(PCs)、非蛋白巯基(NPT)和类金属硫蛋白(MTL)含量的变化。结果表明,随着V胁迫浓度升高,植株地上部与地下部中GSH含量均先升高后下降,PCs含量和NPT含量则先下降后上升,MTL含量呈现上升的变化趋势。地上部是GSH的主要存在部位,而地下部是PCs、NPT和MTL的主要存在部位。当V胁迫浓度为10 mg·L~(-1),地上部GSH含量达最大,比对照增加18.86%;V胁迫浓度为5 mg·L~(-1),地下部PCs含量达最低,比对照组降低了14.93%,地下部NPT含量比对照组下降4.27%,随着V胁迫浓度的增加,NPT含量增大,当V胁迫浓度为40 mg·L~(-1),地下部MTL含量比对照组增加12.31%。外源V对植物PCs的合成与GSH变化呈现消长关系,表明受到重金属胁迫后GSH含量由于PCs的合成而下降,GSH和PCs在植物不同部位承担着对重金属的解毒功能。NPT是螯合重金属离子的重要物质,MTL中有大量的巯基,可结合重金属离子以减轻其对植物的毒害作用。地下部NPT和MTL含量增加,表明玉米幼苗根部是抵御重金属毒害的重要部位。(本文来源于《桂林理工大学学报》期刊2018年02期）
孙怡晴[10]（2018）在《拥挤胁迫和亚硝酸盐胁迫对草鱼应激相关基因和泛素—蛋白酶体系统的影响》一文中研究指出鱼类是水生低等变温脊椎动物,对外界环境有较强的依赖性,其生存易受到外界环境因子的影响。不合理的养殖模式会引发水环境问题,对养殖鱼类产生刺激,从而导致鱼体生理机能的紊乱,耐药性降低,免疫力下降,水产品质量受影响,甚至引起鱼类的死亡。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是调节蛋白质降解和功能的重要系统,它在细胞周期、凋亡、代谢调节、免疫应答、信号传递、转录控制、质量管理、应激应答、DNA修复等生物学过程发挥重要作用。在本研究中,探讨慢性拥挤胁迫和急性亚硝酸盐胁迫对草鱼幼鱼肌肉及肝脏组织中UPS活性、蛋白质代谢、应激反应、组织学等方面的影响,旨在为养殖环境控制提供基础科学依据。慢性拥挤胁迫实验中,设2个试验组,一个是低养殖密度对照组(LSD),为5尾/缸(0.9 kg/m2),另一个为高养殖密度胁迫组(HSD),为30尾/缸(5.9 kg/m2),每个实验组设4个重复,实验进行70 d。实验结束后,采集草鱼的血液与肌肉组织,进行相关基因相对表达量、泛素化蛋白含量、游离氨基酸浓度的检测。急性亚硝酸盐实验中,草鱼随机暴露于0 mg/L、0.5 mg/L、20 mg/L的亚硝酸盐溶液中,在暴露后12 h、24 h、48 h和96 h时,采集血液、肝脏、鳃丝和肌肉样品,检测血液生化指标、组织nrf2、hsp70和UPS相关基因的表达、泛素化蛋白的含量以及组织学变化。实验结果如下:1.高密度养殖造成的拥挤胁迫对草鱼的生长产生了显着的抑制作用。在养殖结束后,草鱼背部白肌中,nrf2,keap1和hsp90的m RNA水平在两个密度组间没有显着差异。在UPS通路中,LSD组的ub,chip,psmc1的表达量显着高于HSD组。肌肉中泛素化蛋白表达水平和3-Methylhiistiden(3-MH)含量在LSD组表现出显着升高。LSD组中mafbx,murf1和s6k1的m RNA水平也显着高于HSD组。2.亚硝酸盐胁迫实验中,血液中的皮质醇含量在亚硝酸盐胁迫12 h时呈现显着的剂量依赖式升高,且在24 h和48 h显着高于对照组。谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量在96 h显着性降低。在肝脏中,nrf2和hsp70的表达量在20 mg/L亚硝酸盐胁迫12 h后出现显着升高;20 mg/L暴露组中chip的m RNA水平在12 h、24 h、48 h显着升高,96 h后与对照组相比无显着不同;Ub的表达量在亚硝酸盐胁迫不同时间点均存在剂量依赖式上升;20 mg/L暴露组中psma2,psmc1的m RNA水平在24 h显着升高,48 h显着下降,96 h基本恢复对照水平。在亚硝酸盐处理12 h后,肝脏中泛素化蛋白含量出现显着提高,在96 h时仍显着高于对照组。在高浓度亚硝酸盐胁迫96 h后,肝细胞出现明显的空泡化。肌肉中,亚硝酸盐胁迫12 h和24 h显着降低了hsp70的表达量,且在48 h显着提高其表达;Ub的表达水平在96 h亚硝酸盐暴露组显着性高于对照组;Psma2,psmc1在亚硝酸盐胁迫下,在12 h、24 h和48 h的表达量显着性下降,且与胁迫浓度呈现负相关;在0.5 mg/L暴露组中murf1和mafbx的表达量在12 h、24 h和96 h显着升高。背部肌肉泛素化蛋白的表达水平在胁迫24 h显着升高,在48 h及96 h与对照组相比无显着差异。20 mg/L亚硝酸盐胁迫96 h后,肌肉组织没有显着性变化。鳃组织在20 mg/L胁迫96 h后出现明显毛细血管扩张、肿大,并形成动脉瘤。综上所述,经过70 d的养殖,草鱼幼鱼能够适应较为拥挤的养殖环境,低养殖密度中草鱼肌肉表现出更高的UPS活性,蛋白质合成及降解速度均较快。高浓度的亚硝酸盐胁迫导致草鱼产生了应激反应,显着提高了肝脏hsp70、nrf2的表达,造成肝细胞和鳃组织损伤,且激活了肝脏及肌肉中泛素-蛋白酶体系统清除损伤或错误蛋白以降低氧化损伤风险。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01）
胁迫相关蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为探究低盐胁迫下γ-氨基丁酸(GABA)及其A型受体相关蛋白(GABARAP)在叁疣梭子蟹渗透压调节过程中起到的作用,实验检测了低盐度10条件下,叁疣梭子蟹在0, 3, 6, 9, 12, 24, 36,48 h的血清渗透压、血清氯离子(Cl-)浓度等指标,同时对鳃组织的GABA量以及GABARAP基因表达量变化进行测定.结果显示,血清渗透压和血清Cl-浓度在12 h内显着下降(P<0.05), 12 h后趋于稳定;相对0 h,血清Cl-浓度降低17.93%,血清渗透压降低24.46%,与外界海水渗透压的差值维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1). GABA量及GABARAP基因表达量波动上升, 12 h后基本维持稳定.研究结果表明,叁疣梭子蟹对低盐度条件的适应性调节在12 h内进行,之后基本维持稳定,GABA量以及GABARAP基因表达量在此过程中呈现显着的正相关关系,对血清Cl-浓度的调节起到了重要作用,使得12 h后血清渗透压与外界海水渗透压维持在(183.21±9.51)mOsm·kg~(-1),保证各项生理活动的正常进行.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胁迫相关蛋白论文参考文献
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标签：南瓜; 高温胁迫; CmHSP70-5基因; 基因表达;