选择性修饰MCM-41固定化脂肪酶及其催化合成甾醇酯的应用

论文摘要

将南极假丝酵母脂肪酶B（Candida antarctica lipase B,CALB）与三亚油酸甘油三酯进行分子对接,得到CALB的活性中心组成,其氨基酸残基中游离ε-NH2分布在远离活性中心的位置上,—COOH有小部分分布在活性中心。针对CALB活性基团的分布特点将MCM-41修饰成具有醛基的G-MCM-41及具有氨基的NH2-MCM-41。当G-MCM-41与CALB固定时,醛基与ε-NH2结合,酶负载量为87.4 mg/g,活性为1 176 U/g,活性较高,当NH2-MCM-41与CALB固定时,氨基与—COOH结合,酶负载量为89.6 mg/g,活性为672 U/g,活性相对较低,结果证明了CALB分子氨基酸残基分布的结论。以一级大豆油和植物甾醇为底物,固定化脂肪酶催化酯交换反应,经响应面试验优化后酯交换率达到87.4%。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1?CALB活性中心及MCM-41修饰特性
•       1.3.1. 1?CALB与配体分子对接
•       1.3.1. 2?CALB的氨基酸残基
•       1.3.1. 3?MCM-41的表面修饰
•       1.3.1. 4 修饰后的MCM-41载体固定CALB
•     1.3.2 活性高的固定化CALB催化大豆油与植物甾醇酯交换
•       1.3.2. 1 单因素试验
•       1.3.2. 2 响应面优化试验
•     1.3.3 指标的测定
•       1.3.3. 1?CALB活性及相对酶活性的测定
•       1.3.3. 2 酶蛋白负载量的测定
•       1.3.3. 3 酯交换转化率的测定
•   1.4 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1?CALB活性中心及修饰MCM-41固定化脂肪酶效果
•     2.1.1 分子对接结果
•     2.1.2?CALB的基团组成
•     2.1.3?CALB分子的氨基酸残基分布
•     2.1.4 修饰MCM-41载体固定CALB的效果
•   2.2?G-MCM-41-CALB催化大豆油与植物甾醇酯交换反应的单因素试验结果
•     2.2.1 反应温度对酯交换反应转化率的影响
•     2.2.2?G-MCM-41-CALB添加量对酯交换反应转化率的影响
•     2.2.3 植物甾醇质量分数对酯交换反应转化率的影响
•     2.2.4 反应时间对酯交换反应转化率的影响
•   2.3?G-MCM-41-CALB催化酯交换反应优化试验
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张欣,陈书曼,吴楠,王彤,裴兴武,江连洲,韩翠萍,于殿宇

关键词: 分子对接,活性中心,修饰,固定化,酯交换

来源: 食品科学 2019年20期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业,轻工业手工业

单位: 东北农业大学食品学院

基金: 黑龙江省教育厅2018年度省属高校科技成果研发,培育项目(TSTAU-C2018011)

分类号: TS225.1

页码: 192-199

总页数: 8

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