导读:本文包含了原胶原基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胶原,基因,酪氨酸,磷酸化,纤维,细胞,骨关节炎。
原胶原基因论文文献综述
范瑞文,杜红阳,刘一飞,董常生[1]（2009）在《羊驼皮肤结构基因(原)胶原的表达特点》一文中研究指出为了揭示羊驼皮肤胶原蛋白(Collagen)在皮肤结构发生中的分子机制,本研究通过构建羊驼皮肤cD-NA文库并进行大规模测序分析,结果表明:在羊驼皮肤内发现只有纤维类胶原表达,即typeⅠ,typeⅢ,type Vcollagen,其中typeⅠ表达最高,typeⅢ和typeⅤ表达低;然而,在羊驼皮肤内未发现各类collagen相对应的原胶原(procollagen),其成员procollagen typeⅠ,typeⅢ,typeⅣ,typeⅥ,typeⅦ,typeⅩⅧ在表达,且typeⅠ远远高于其他家族成员的表达,由此推断collagen和procollagen typeⅠ在羊驼皮肤结构发生中起主要作用,羊驼皮肤内的蛋白水解机制可能使procollagen产生不同类型的collagen。(本文来源于《经济动物学报》期刊2009年03期）
彭涛,刘婷婷,王亮[2]（2009）在《携带人Ⅰ型а1原胶原基因荷斯坦奶牛胚胎的发育研究》一文中研究指出克隆了人Ⅰ型а1原胶原的cDNA基因,将克隆的基因连接到改造后的乳腺特异性表达载体pGC1上,经电穿孔法转染到成纤维细胞中,利用核移植技术获得携带人Ⅰ型а1原胶原基因牛胚胎。最终获得8枚转基因的囊胚,证明用核移植方法获得的携带人Ⅰ型а1原胶原蛋白基因的荷斯坦奶牛胚胎能够正常发育。(本文来源于《西北农业学报》期刊2009年02期）
张达江,王亮[3]（2007）在《GC含量丰富的人I型原胶原蛋白基因片段克隆及其序列分析》一文中研究指出鉴于做转基因牛羊乳腺生物反应器的需要,根据GenBank中所公布的人I型原胶原蛋白基因序列设计引物,利用健康人的胎盘中提取的基因组DNA为模板,通过优化的长距离PCR,成功地克隆出GC含量丰富的人I型原胶原基因组DNA片段,序列测定与分析的结果显示中国人I型原胶原蛋白基因组DNA片段与GenBank中所公布出来的序列所对应的部分有99.5%的同源性,其中外显子部分与GenBank中的对应部分完全一致;而在内含子中,本研究克隆到的基因与GenBank中公布出来的序列有不少差异,尤其表现在内含子1和2中,其中内含子2要比GenBank中公布的基因内含子2多出14个碱基,这14个碱基具体有什么作用尚需要进一步阐明,内含子间的差异凸显了东西方人种之间基因序列的多态性。(本文来源于《西北农业学报》期刊2007年03期）
陈敏亮,柴家科,宋慧锋,吴焱秋[4]（2004）在《酪氨酸磷酸化蛋白在伤口愈合原胶原基因表达中的作用》一文中研究指出目的 研究伤口愈合时成纤维细胞与纤维粘连蛋白黏附 ,以及黏附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞表达原胶原mRNA中的作用。方法 采用RT PCR、免疫印迹法分别检测伤口愈合时成纤维细胞原胶原mRNA表达的变化及黏附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白 ,并观察阻断酪氨酸磷酸化后原胶原mRNA和酪氨酸磷酸化蛋白的变化。结果 伤口愈合时成纤维细胞与纤维粘连蛋白黏附 ,可诱导 98kd、6 5kd酪氨酸磷酸化蛋白生成 ,且原胶原proα1 (Ⅰ )mRNA的表达显着增加 ;经酪氨酸激酶抑制后 ,原胶原proα1 (Ⅰ )mRNA显着降低。结论 成纤维细胞与纤维粘连蛋白黏附 ,在伤口愈合原胶原表达增加中具重要作用 ,由黏附诱导的酪氨酸磷酸化是其中的一个重要环节。(本文来源于《中华整形外科杂志》期刊2004年03期）
万伟东[5]（2001）在《病理性瘢痕α1(Ⅰ)原胶原基因转录调控的实验研究》一文中研究指出创面的异常修复常导致增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的形成，虽然其临床表现显而易见，但对其形成机制的认识却知之甚少。以往研究显示：细胞外基质特别是Ⅰ型胶原蛋白合成与分解代谢的失衡是病理性瘢痕形成的基础；细胞因子在纤维化的发生、发展过程中起了相当重要的作用。但对于Ⅰ型胶原基因启动转录的机制，细胞因子如何在启动转录水平激活靶基因转录，瘢痕成纤维细胞中纤维化相关DNA结合蛋白如何与其顺式作用元件相互作用等均不清楚。 本课题拟通过病理性瘢痕中Ⅰ型胶原的α1链基因顺/反式调控因子研究，在启动转录水平，探讨Ⅰ型胶原基因被异常激活转录及相关细胞因子的作用机制，为临床病理性瘢痕及机体其它组织器官的纤维化性疾病的防治提供理论指导。第一部分：人α1(Ⅰ)原胶原基因启动子活性研究 探索纤维化形成中调控α1(Ⅰ)原胶原基因高水平转录的启动片段。从人α1(Ⅰ)胶原基因转录起始点上游-2．5kb至＋42bp的片段中，取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒构成 6个重组体，分别为 phCOL0．1、phCOL0．27、phCOL0.5、phCOL0．9、phCOL1．5、phCOL2．5。所含的启动子分别相应于人α1(Ⅰ)原胶原基因上游-105～+42bp、-268～+42bp、-496～+42bp、-829～+42bp、-1448～+42bp、-2483～+42bp序列。脂质体法瞬时转染上述重组体至原代培养的人正常皮肤成纤维细胞，CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的 且 中文摘要启动子活性。结果：重组体phCOLZ．5、phCOLO．27转染细胞后，具有较高的CAT表达量，重组体phCOLO．5、phCOLO＊转染细胞后，具有较低的CAT表达量。 表明人 QI门）原胶原基因上游上483。例 一268。竹 序列具有较强启动表达活性，d～＋42hP、妙卜＋42hP序列片段启动活性最低。提示在人al门源胶原基因上游5’侧翼区上．skb序列中存在正性和负性调控元件，正性调控元件可能存在于－2483～1448hp、－1448～－829hp、－829～－496hp、－268～－105hp，而负性调控元件则可能存在于－496—268hp。另外，本研究构建的6个重组体还是下一步研究纤维化相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列。第二部分：地塞米松、bFGF 对人成纤维细胞增殖及d 原胶原基因启 动子的调控一、地塞米松、bFGF对人成纤维细胞增殖的影响 探讨地塞米松及bFGF对人皮肤成纤维细胞和增生性癫痕成纤维细胞增殖作用。用组织块法和胶原酶消化法分别培养人皮肤成纤维细胞和增生性瘟痕成纤维细胞，并进行传代培养作为本研究的模型细胞。采用BrdU掺入的ELISA法测定地塞米松及bFGF对人皮肤成纤维细胞和增生性瘤痕成纤维细胞增殖情况。结果：在两种成纤维细胞中，分别在2％和10％FCS条件下，IX 10’叶 10叶mol／L地塞米松处理 24h后，各组细胞增殖值间差异均无显着性。表明地塞米松作用浓度范围为 10’～10叶m＊几，对人正常皮肤和瘫痕成纤维细胞增殖均无明显作用。同时也 2 中文摘要一表明，地塞米松抑制胶原纤维的异常沉积主要是源于胶原蛋白的代谢过程；而 0．25ng／ffil 64n咖l bFGF作用 24h后，各组细胞增殖值间差异均有显着性，且在低血清培养基的成纤维细胞中增殖抑制更明显。表明bFGF对正常和瘀痕成纤维细胞增殖均有抑制作用，同时也提示，bFGF抗纤维化的作用其中之一源于对成纤维细胞的增殖抑制。二、地塞米松、bFGF、TGF p；对人al o原胶原基因启动子的影响 探讨地塞米松、bFGF、TGF e；对人alo原胶原基因启动子的影响。采用 FllGENE转染试剂，分别瞬时转染 phCOLO．27、phCOL．5、PhCOLZ．5这叁种重组质粒于正常成纤维细胞和增生性癫痕成纤维细胞，24h后，转染的细胞分别加入不同浓度的地塞米松、bFGF、TGF p；及地塞米松十TGF p；、bFGF十TGF p；，继续培养24h后，测定转染后细胞CAT表达量。结果：地塞米松、bFGF与 TGF a；在两种成纤维细胞al链原胶原基因的启动活性上有相反的作用，TGF pl能明显上调胶原基因的启动活性，而地塞米松则能显着抑制胶原基因的启动活性且能桔抗TGF p；的上调作用；bFGF同样能显着抑制胶原基因的启动活性且能桔抗TGF p；的上调作用。表明在启动转录水平，TGF p；对人胶原基因转录具有正性调控作用；地塞米松、bFGF对人胶原基因转录具有负性调控作用。地塞米松、bFGF可直接通过对胶原基因启动子的作用，抑制二型胶原基因的InRN转录，由此降低胶原蛋白的合成。同时提示，在?(本文来源于《第二军医大学》期刊2001-05-01）
万伟东,杨松林,林子豪,高春芳,王皓[6]（2001）在《bFGF对人α1(I)原胶原基因启动子活性的调控》一文中研究指出目的 观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(I)原胶原基因序列的作用。 方法 用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代，采用BrdU掺入的ELISA法，测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建叁种人α1(I)原胶原基因5' 侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒，用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞，同时用p-sv-b-GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组，ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。 结果 在体积分数2%或10%小牛血清培养条件下，bFGF加入浓度从0.25 ng/ml增至64.00 ng/ml，作用24 h后，各组细胞增殖数值之间差异有显着性意义（P<0.05）。用叁种重组质粒分别转染细胞，bFGF处理24 h后，CAT相对表达量测定结果提示， bFGF组与对照组相比差异有显着性意义（P<0.05）。 结论 bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用,对胶原基因启动序列具有负性调控作用，且存在剂量依赖关系。(本文来源于《中华烧伤杂志》期刊2001年01期）
康龙丽[7]（2000）在《Ⅱ型原胶原基因与骨关节炎》一文中研究指出骨关节炎(ＯＡ)是最常见的骨关节病之一。以骨和关节软骨进行性退变为特征,其发病是多因素的,包括诸多环境因素,如气候、肥胖、创伤及手术感染(半月板切除)等。随着分子生物学技术的发展和应用,遗传因素对ＯＡ发病的影响也受到医学界重视,已发现某些胶原基因特别是Ⅱ(本文来源于《西藏医药杂志》期刊2000年03期）
高春芳,王皓,黄超,孔宪涛[8]（1999）在《小鼠α2(Ⅰ)型原胶原基因启动子活性研究》一文中研究指出目的： 明确纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动子片段，逐段研究小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因２ ｋｂ 的启动子序列。方法： 从小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因转录起始点上游－ ２ ｋｂ～＋ ５４ ｂｐ 的片段中，取长度不等的片段作为启动子，与含氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因的质粒组成６ 个重组体，脂质体转染法转染上述重组体至胶原产生细胞（ＮＩＨ３Ｔ３）和非胶原产生细胞（ＣＯＳ７）， ＣＡＴ－ＥＬＩＳＡ测定细胞ＣＡＴ表达水平以比较各重组体的启动子活性。结果： － ７８０～＋ ５４ ｂｐ 序列具有最高启动ＣＡＴ表达活性且有不完全细胞特异性，缺失近转录起始点５００ ｂｐ， 即－ ２～－ ０．５ ｋｂ 片段的启动子活性最低。结论： 近转录起始点５００ ｂｐ 的序列为小鼠α２（Ⅰ）原胶原基因启动激活所必需，－ ７８０～＋ ５４ ｂｐ 片段有高启动活性，并有望以此序列发现纤维化相关的特异ＤＮＡ 结合蛋白(本文来源于《第二军医大学学报》期刊1999年10期）
洪微,孔宪涛,陈敏亮,廖万清[9]（1999）在《整合素诱导酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞原胶原基因表达中的作用》一文中研究指出目的：研究粘附分子整合素的细胞内信号传导途径之一——酪氨酸磷酸化在成纤维细胞表达原胶原基因中的作用。方法：利用抗整合素单抗及相应二抗的交联作用，模拟整合素在成纤维细胞表面簇集而诱导酪氨酸磷酸化，用蛋白印迹和ＲＴ－ＰＣＲ技术分别检测诱导生成的酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ水平；并观察阻断酪氨酸磷酸化后，酪氨酸磷酸化蛋白和Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的变化。结果：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集可诱导相对分子质量分别为９８０００和６５０００的酪氨酸磷酸化蛋白，且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达显著增加（Ｐ＜０．０１）；阻断酪氨酸磷酸化，不仅酪氨酸磷酸化蛋白显著减少（Ｐ＜０．０１），而且Ⅰ型原胶原ｍＲＮＡ的表达也降低（Ｐ＜０．０５）。结论：整合素β１亚基在成纤维细胞表面簇集诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在Ⅰ型原胶原基因表达中具有重要作用。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊1999年06期）
原胶原基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
克隆了人Ⅰ型а1原胶原的cDNA基因,将克隆的基因连接到改造后的乳腺特异性表达载体pGC1上,经电穿孔法转染到成纤维细胞中,利用核移植技术获得携带人Ⅰ型а1原胶原基因牛胚胎。最终获得8枚转基因的囊胚,证明用核移植方法获得的携带人Ⅰ型а1原胶原蛋白基因的荷斯坦奶牛胚胎能够正常发育。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原胶原基因论文参考文献
[1].范瑞文,杜红阳,刘一飞,董常生.羊驼皮肤结构基因(原)胶原的表达特点[J].经济动物学报.2009
[2].彭涛,刘婷婷,王亮.携带人Ⅰ型а1原胶原基因荷斯坦奶牛胚胎的发育研究[J].西北农业学报.2009
[3].张达江,王亮.GC含量丰富的人I型原胶原蛋白基因片段克隆及其序列分析[J].西北农业学报.2007
[4].陈敏亮,柴家科,宋慧锋,吴焱秋.酪氨酸磷酸化蛋白在伤口愈合原胶原基因表达中的作用[J].中华整形外科杂志.2004
[5].万伟东.病理性瘢痕α1(Ⅰ)原胶原基因转录调控的实验研究[D].第二军医大学.2001
[6].万伟东,杨松林,林子豪,高春芳,王皓.bFGF对人α1(I)原胶原基因启动子活性的调控[J].中华烧伤杂志.2001
[7].康龙丽.Ⅱ型原胶原基因与骨关节炎[J].西藏医药杂志.2000
[8].高春芳,王皓,黄超,孔宪涛.小鼠α2(Ⅰ)型原胶原基因启动子活性研究[J].第二军医大学学报.1999
[9].洪微,孔宪涛,陈敏亮,廖万清.整合素诱导酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞原胶原基因表达中的作用[J].第二军医大学学报.1999
论文知识图
