莱茵衣藻type Ⅰ metacaspase基因克隆及其参与调控程序性细胞死亡研究

论文摘要

Metacaspase是在原生动物、真菌和植物中发现的一种具有底物精氨酸/赖氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶。根据蛋白质结构特征可将metcaspase分为typeⅠ与typeⅡ两种类型,均参与调控多种植物与原生动物程序性细胞死亡。本研究根据GenBank数据库莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii） type Ⅰ metacaspase基因（GenBank No. XM001696904）序列,采用巢式PCR克隆获取type Ⅰmetcaspase基因开放阅读框（ORF）序列并命名为CrMC1。CrMC1 ORF全长987 bp,推测编码1个包含405个氨基酸的蛋白质。通过与已知物种type Ⅰ metacaspase氨基酸序列进行同源序列比对发现,CrMC1具有高度保守的p20、p10、连接区结构域以及精氨酸、半胱氨酸活性中心位点。研究显示,在H2O2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡过程中,CrMC1表达量显著提高（P<0.05）,2 h后达到峰值,3 h时下降至对照组同一水平。结果表明,莱茵衣藻typeⅠ metacaspase基因CrMC1参与H2O2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡调控。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 藻种培养
•   1.2 莱茵衣藻总RNA提取与cDNA合成
•   1.3 CrMC1 ORF巢式PCR扩增
•   1.4 生物信息学分析
•   1.5 H2O2诱导莱茵衣藻细胞死亡率测定
•   1.6 荧光定量PCR
• 2 结果
•   2.1 CrMC1基因克隆及进化分析
•   2.2 CrMC1蛋白结构域预测
•   2.3 莱茵衣藻CrMC1参与H2O2诱导细胞死亡调控
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张恒宇,柳逸群,葛源

关键词: 莱茵衣藻,程序性细胞死亡

来源: 渔业科学进展 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 中国海洋大学海洋生命学院,中国海洋大学水产学院

基金: 863计划生物医药领域青年科学家专项基金(2015AA020903),青岛市科技计划基础研究项目(13-1-4-253-jch)共同资助~~

分类号: Q943.2

DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20180507002

页码: 131-137

总页数: 7

文件大小: 1766K

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