Jmjd3和Ezh2酶活性抑制剂对人间充质干细胞成脂分化的影响及机制研究

论文摘要

目的研究EZH2和JMJD3对人脂肪间充质干细胞成脂分化的影响及可能机制。方法体外培养人脂肪来源间充质干细胞并进行诱导分化。分化过程中分别加入EZH2酶活性抑制剂GSK126（6μM）和JMJD3酶活性抑制剂GSKJ4（20μM）,对照组加入DMSO。采用Realtime PCR方法检测脂肪细胞分化基因PPARγ、FABP4和ADIPOQ;棕色化标志基因UCP1、PRDM16和CIDEA,以及米色脂肪独有的标志基因CD137、TMEM26和TBX1,并计算各组与对照组的相对表达量。采用Western Blot法检测H3K27me3、UCP1、JAK2、STAT3和pSTST3的蛋白表达量。结果 GSK126组的脂滴形成略减少,GSKJ4组的脂滴形成明显减少。GSK126组的H3K27me3含量减少,GSKJ4组的H3K27me3含量增加;GSK126组的UCP1、PRDM16、TMEM26和JAK2基因表达均明显增加（P<0.05）;GSKJ4组的PPARγ、UCP1和JAK2的基因表达量均明显降低（P<0.05）;GSK126组的UCP1蛋白表达增加而GSKJ4组UCP1蛋白表达减少。GSK126组的JAK2和pSTST3均增加,GSKJ4组的JAK2和p STST3蛋白表达均减少。结论 EZH2酶活性抑制剂GSK126促进人MSC向棕色或米色脂肪细胞分化。JMJD3酶活性抑制剂GSKJ4抑制人MSC向棕色或米色脂肪细胞分化;EZH2和JMJD3的酶活性影响H3K27的三甲基化修饰,可能通过JAK2-STAT信号通路,发挥调控人脂肪细胞分化的作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要试剂
•   1.2 细胞的分化方法
•   1.3 分化液的配制
•     1.3.1 分化液的成份
•     1.3.2分化用药品的配制
•     1.3.3 GSK126及GSKJ4储存液的配制及使用
•   1.4 细胞的油红染色
•   1.5 Realtime PCR检测mRNA的表达
•   1.6 Western blot法检测蛋白表达
•   1.7 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 GSK126对人MSC成脂分化影响较小, GSKJ4明显减少MSC的成脂分化
•   2.2 抑制剂改变了H3K27me3甲基化修饰水平
•   2.3 GSK126组棕色脂肪标志基因表达增加, GSKJ4组的脂肪分化基因和棕色脂肪标志基因表达减少
•   2.4 JAK2-STAT3信号通路的激活发生改变
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 武晓慧,李蓉,黄振鹏,杨帆,陈佳琪

关键词: 间充质干细胞,分化

来源: 医学信息 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 西安医学院临床医学院,西安医学院肥胖与代谢病研究所

基金: 陕西省教育厅项目(编号:17JK0654)

分类号: R329.2

页码: 63-68

总页数: 6

文件大小: 982K

下载量: 83