导读:本文包含了哺乳类细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,哺乳类,基因,酪氨酸,剂量,色素,杆状。
哺乳类细胞论文文献综述
曹丽丽[1]（2011）在《高、低剂量率γ线照射对哺乳类细胞生长存活及DNA损伤修复的影响》一文中研究指出目的:通过高剂量率(high-dose-rate,or acute ,1.0Gy/min)、低剂量率(low-dose rate,or chronic, 0.347mGy/min)γ线对哺乳类细胞的照射,研究照射后哺乳类细胞的生长存活情况,探讨γ线引起的细胞损伤修复机制。方法:(1)采用Western Blot方法从蛋白水平检测DNA损伤调控因子P53、P21、磷酸化共济失调-毛细血管扩张症致病基因(Ataxia-Telangiectasia mutated,ATM)在本研究所用细胞中的表达,为下一步研究提供可行性。(2)血细胞计数板计数法测定低剂量率照射对细胞生长曲线的影响;克隆形成率测定指数增长期及密集抑制期细胞高、低剂量率照射下的存活率。(3)采用免疫荧光染色法检测有无ATM抑制剂及DNA依赖性蛋白激(DNA-dependent protein kinase, catalytic subunit, DNA-PKcs )抑制剂作用于密集抑制的稳相细胞照射后DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)的生物标记物γ-H2AX的免疫荧光表达。结果:1、Western Blot结果显示:高剂量率(1.0Gy/min)5.0Gy照射后,叁种哺乳类细胞中,磷酸化ATM均有表达,磷酸化P53、P21也有一定程度的诱导表达。2、低剂量率照射组的HE-4细胞及MRC5-hTERT细胞相比较与未照射组生长速度减慢,而C3H 10T1/2细胞没有明显变化;3、指数增长期期细胞及密集抑制状态下高剂量率(1.0Gy/min)照射的细胞存活率均低于低剂量率(0.347mGy/min)照射。4、高剂量率(1.0Gy/min)γ线照射密集抑制的稳相细胞后,随着培养时间的延长,细胞的存活率增高。5、γ-H2AX免疫荧光染色提示ATM抑制剂及DNA-PKcs抑制剂处理后的密集抑制状态的细胞在高、低剂量率照射下的DSBs均高于对照组。结论:1、磷酸化ATM、磷酸化P53、P21在照射后的细胞中均有表达。2、高剂量率与低剂量率γ线对指数增长期及密集抑制状态下的细胞照射后,均存在明显的剂量依存关系;相同剂量照射,低剂量率照射下的细胞存活率显着高于高剂量率照射组。3、低剂量率γ线照射下细胞的生长速度减慢,以人纤维细胞最为明显。4、密集抑制的稳相细胞高剂量率γ线照射后存在潜在致死性损伤修复。5、ATM在高、低剂量率γ线照射诱导的DSBs修复中均发挥重要作用。(本文来源于《苏州大学》期刊2011-10-01）
陈洋[2]（2008）在《DSP等赤潮藻毒素对哺乳类细胞的毒性效应及机制研究》一文中研究指出本文利用四株哺乳类细胞(两株正常细胞:小鼠皮肤细胞JB6-C41和人肝细胞HL-7702;两株肿瘤细胞:人肝癌细胞Bel-7402和小鼠神经瘤细胞Neuro-2a),通过MTT比色法、光学显微镜和电镜观察、Annexin V-FITC&PI双染法、TUNEL法和TBA比色法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid, OA)、利玛原甲藻(Prorocentrum lima)、东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)、米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、相关亚历山大藻(Alexandrium affine)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense, AT-6)的提取物对哺乳类细胞增殖的影响,并就OA、利玛原甲藻脂溶性组分、米氏凯伦藻极性脂类组分对哺乳类细胞形态和结构的影响以及它们和相关亚历山大藻去藻过滤液未知毒性物质诱导细胞凋亡或细胞氧化损伤等致毒机制展开研究。结果显示:OA和利玛原甲藻的脂溶性组分显着抑制小鼠皮肤细胞、人肝细胞、人肝癌细胞和小鼠神经瘤细胞的增殖,且这种抑制作用呈剂量依赖性,其对四株细胞增殖的24h IC50分别为100ng/ml、85 ng/ml、65ng/ml、70ng/ml和6000cells/ml、4000cells/ml、2000cells/ml、1000cells/ml。米氏凯伦藻的极性脂类组分对四株细胞的增殖均有显着的抑制作用,而非极性组分和水溶性组分对四株细胞的增殖无明显的不利影响。相关亚历山大藻的去藻过滤液>5K组分对四株细胞的增殖均有明显的抑制作用,但藻细胞内容物无明显的不利影响。东海原甲藻的脂溶性组分、塔玛亚历山大藻(AT-6)的去藻过滤液和藻细胞内容物对四株细胞的增殖均无明显的抑制作用。这表明:OA和利玛原甲藻、米氏凯伦藻、相关亚历山大藻产生的一些毒性物质能够抑制哺乳类细胞的增殖。OA和利玛原甲藻脂溶性组分能导致四株细胞的形态和超微结构发生明显改变:细胞变圆,细胞膜皱褶、卷曲、发泡,细胞之间相互分离,部分细胞脱壁,可见膜包裹的凋亡小体;细胞表面微绒毛减少或消失,细胞核染色质凝集成团块状或边集,核膜破裂,细胞内容物以发泡的形式排出,细胞质显着空泡化,这些变化符合凋亡细胞的典型特征。Annexin V-FITC & PI双染法及TUNEL法检测也发现:OA、利玛原甲藻脂溶性组分能够诱导四株细胞发生凋亡,这与形态学观察的结果一致。Annexin V-FITC & PI双染法检测还发现:相关亚历山大藻的去藻过滤液>5K组分能够诱导四株哺乳类细胞凋亡。这表明:OA、利玛原甲藻脂溶性组分和相关亚历山大藻未知毒性物质可能通过诱导细胞凋亡而对哺乳类细胞造成影响。米氏凯伦藻极性脂类组分导致四株细胞变圆、脱壁、肿胀,细胞膜破裂,这表明细胞发生坏死而非凋亡,双染法的检测结果也进一步证明了细胞发生坏死。而且,这种未知毒性物质导致四株细胞培养液中丙二醛的含量均明显升高,表明:米氏凯伦藻内的未知毒性物质能够引发细胞脂质过氧化,对细胞造成氧化损伤,这与OA、利玛原甲藻脂溶性组分和相关亚历山大藻未知毒性物质对哺乳类细胞的影响机制明显不同。四株不同类型的哺乳类细胞对毒素或毒性物质的敏感性略有不同,但差异不明显。小鼠神经瘤细胞和人肝癌细胞略敏感,其次分别为人肝细胞和小鼠皮肤细胞。本研究首次将小鼠神经瘤细胞应用于DSP等赤潮藻毒素的毒性检测,发现:该细胞对毒素反应较敏感,检出限与其它化学或生物检测方法的检出限相当;而且,这些细胞毒性检测方法操作简便、快速,样品处理流程简单,所需样品量少,因此,应用该株细胞进行的细胞毒性测试方法具有发展为DSP等赤潮藻毒素毒性检测常规方法的潜能。Neuro-2a细胞既可用于PSP毒素毒性的检测,也可用于DSP等赤潮藻毒素的毒性检测,这将为赤潮藻毒素的快速检测提供便利。综上所述,DSP毒素和我国沿海的重要赤潮原因种(米氏凯伦藻、亚历山大藻等)能够产生毒素或毒性物质,并通过诱导细胞凋亡、引发氧化损伤等方式对哺乳类细胞造成毒性影响,因此,赤潮藻毒素或毒性物质通过食物链的传递进入人体后,有可能危害人类的健康,应引起我们的高度关注。另一方面,由于赤潮藻毒素或毒性物质对肿瘤细胞的抑制活性,其潜在的药用价值值得进一步去探索。(本文来源于《中国科学院研究生院（海洋研究所）》期刊2008-05-01）
李元杰,徐方[3]（2007）在《哺乳类细胞DNA复制后修复的研究》一文中研究指出DNA保真度对生物性状稳定起决定作用,但这种稳定是相对的,某些内源或外源性因素直接或间接的作用会破坏DNA完整性和稳定性,诱发突变的产生,其后果有些利于生物生存,但更多的是导致生物体死亡或某些功能的丧失。有效的DNA修复机制保证了遗传信息高度稳定地传递,(本文来源于《宁夏医学院学报》期刊2007年01期）
贡成良,薛仁宇,曹广力[4]（2004）在《杆状病毒——一种新的哺乳类细胞传递基因载体》一文中研究指出在多角体蛋白基因启动子的控制之下 ,利用杆状病毒已有许多种重组蛋白在昆虫细胞中被表达。许多常用细胞系以及原代培养细胞能被杆状病毒有效转染 ,但几乎观察不到细胞毒性。在哺乳细胞中 ,用带有哺乳类细胞活性启动子元件的重组杆状病毒载体已成功地实现基因的瞬时和稳定传递 ,杆状病毒作为基因治疗外载体 ,能将目的基因传递给哺乳细胞 ,并直接对传递基因的表达产物产生专一性免疫反应 ;补体成份对杆状病毒向哺乳类细胞传递基因的效率有明显抑制作用 ,但假型杆状病毒对补体表现出抗性。杆状病毒介导基因传递可评价启动子在不同细胞中的强度。含有异源病毒基因组的杂交杆状病毒能发动病毒感染 ,并成功用于检验抗病毒药物的效果。杆状病毒作为安全有效的专一性基因传递载体 ,有望在将来发展成更有效的新一代基因治疗载体。(本文来源于《蚕业科学》期刊2004年03期）
郭丹,傅更锋,樊燕蓉,薛龙增[5]（2004）在《RNA干涉技术在哺乳类细胞和人类疾病基因功能研究中的应用》一文中研究指出RNA干涉技术是一种很有潜力的研究基因功能的新技术 ,它具有快捷、方便、高效和特异性高等特点 ,但用此技术研究哺乳类动物细胞基因功能和人类疾病相关基因功能才刚刚起步 ,本文对该技术在哺乳类细胞和人类疾病基因功能中的研究进展进行了评述(本文来源于《生物医学工程学杂志》期刊2004年01期）
竺可青,余应年,章锁江[6]（2003）在《MNNG对哺乳类细胞JNK/SAPK及p38MAPK作用及其信号源研究(英文)》一文中研究指出目的 :研究低浓度烷化剂N -甲基 -N’ -硝基 -N -亚硝基胍 (MNNG)对JNK/SAPK及p38MAPK通路的作用及其信号源。方法 :分别测定完整Vero细胞和脱核Vero细胞的JNK/SAPK及p38MAPK酶活性 ,并比较其结果。结果 :低浓度MNNG在完整Vero细胞和脱核Vero细胞中均抑制JNK/SAPK酶活性 ;在p38MAPK通路中 ,完整Vero细胞表现酶活性升高 ,而脱核Vero细胞该激活作用消失。结论 :低浓度MNNG抑制JNK/SAPK的作用不依赖于核内信号 ,而对p38MAPK的激活作用依赖与于核内信号。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2003年04期）
严乐勤,余应年,诸葛坚,谢海洋[7]（2000）在《人细胞色素P4502A6cDNA克隆及其在哺乳类细胞中的表达》一文中研究指出应用逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术和DNA重组技术从人肝组织中克隆细胞色素 P4502 A6( CYP2 A6) c DNA片段至克隆载体 p Blue-script SK( M1 3- )中 ,经限制性酶切图谱分析确证克隆的片段为 CYP2 A6c DNA,然后将该片段亚克隆入真核细胞表达载体 p REP9,用改良磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠肺 CHL细胞系 ,建立 CHL- 2 A6转基因细胞系 ,并对 CYP 2 A6特征表达酶香豆素 - 7-羟化酶 ( COH)活性进行了测定 ,结果显示 CHL-2 A6S9组分的 COH比活性是 ( 2 .58± 0 .68) nmol· min-1· g-1蛋白 ,而对照细胞 CHL测不到 COH活性 ,表明所转 CYP2 A6c DNA表达的蛋白质具有功能 .CHL - 2 A6的建立为药物代谢研究和毒理学研究提供了强有力的工具 .(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2000年01期）
胡文蔚,余应年,陈星若,宋韬,谢海洋[8]（1999）在《哺乳类细胞参与MNNG诱导的非定标性突变发生基因的分离和功能研究》一文中研究指出目的：遗传不稳定是存在于人类遗传性疾病及肿瘤中的一种重要现象，也可由环境致癌性理化因子诱发，但其发生的具体机制尚不清楚。本实验室已证实了烷化剂Ｎ－甲基－Ｎ’－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）可以诱发出ｖｅｒｏ细胞的遗传不稳定状态，表现为延迟发生的非损伤部位(本文来源于《癌变.畸变.突变》期刊1999年06期）
鲁靖,余应年,谢海洋[9]（1999）在《MNNG诱导的哺乳类细胞信号转导通路的改变》一文中研究指出目的：本实验室曾用烷化剂Ｎ－甲基－Ｎ’－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＮｍｅｔｈｙｌＮ’ｎｉｔｒｏＮｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ，ＭＮＮＧ）在非洲绿猴肾ｖｅｒｏ细胞上诱导出非定标性突变。进一步的研究提示细胞信号转导通路在非定标性突变的发生中扮演了重要(本文来源于《癌变.畸变.突变》期刊1999年06期）
刘东瀛[10]（1999）在《慢性持续性支原体感染导致恶性转化的哺乳类细胞中无支原体基因存在》一文中研究指出为了探讨支原体介导的细胞转化的可能机制,用抗生素除去支原体后,检测已发生永久转化的C3H细胞中有无支原体基因存在。 用完整的支原体基因组或克隆的支原体基因为探针通过斑点杂交检测,均未发现永久转化的C3H细胞中有支原体基因存在。对此,作者考虑到可能有支原体DNA小片段插入细胞DNA后促进某些癌基因表达,但不能为斑点杂交法检出。在此研究中,作者应用一种称为表象差异分析(representationaldifference analysis.RDA)的新技术检查永久转化细胞中有无支原体基因存在。RDA技术利用扣除(本文来源于《国外医学(分子生物学分册)》期刊1999年01期）
哺乳类细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文利用四株哺乳类细胞(两株正常细胞:小鼠皮肤细胞JB6-C41和人肝细胞HL-7702;两株肿瘤细胞:人肝癌细胞Bel-7402和小鼠神经瘤细胞Neuro-2a),通过MTT比色法、光学显微镜和电镜观察、Annexin V-FITC&PI双染法、TUNEL法和TBA比色法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid, OA)、利玛原甲藻(Prorocentrum lima)、东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)、米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)、相关亚历山大藻(Alexandrium affine)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense, AT-6)的提取物对哺乳类细胞增殖的影响,并就OA、利玛原甲藻脂溶性组分、米氏凯伦藻极性脂类组分对哺乳类细胞形态和结构的影响以及它们和相关亚历山大藻去藻过滤液未知毒性物质诱导细胞凋亡或细胞氧化损伤等致毒机制展开研究。结果显示:OA和利玛原甲藻的脂溶性组分显着抑制小鼠皮肤细胞、人肝细胞、人肝癌细胞和小鼠神经瘤细胞的增殖,且这种抑制作用呈剂量依赖性,其对四株细胞增殖的24h IC50分别为100ng/ml、85 ng/ml、65ng/ml、70ng/ml和6000cells/ml、4000cells/ml、2000cells/ml、1000cells/ml。米氏凯伦藻的极性脂类组分对四株细胞的增殖均有显着的抑制作用,而非极性组分和水溶性组分对四株细胞的增殖无明显的不利影响。相关亚历山大藻的去藻过滤液>5K组分对四株细胞的增殖均有明显的抑制作用,但藻细胞内容物无明显的不利影响。东海原甲藻的脂溶性组分、塔玛亚历山大藻(AT-6)的去藻过滤液和藻细胞内容物对四株细胞的增殖均无明显的抑制作用。这表明:OA和利玛原甲藻、米氏凯伦藻、相关亚历山大藻产生的一些毒性物质能够抑制哺乳类细胞的增殖。OA和利玛原甲藻脂溶性组分能导致四株细胞的形态和超微结构发生明显改变:细胞变圆,细胞膜皱褶、卷曲、发泡,细胞之间相互分离,部分细胞脱壁,可见膜包裹的凋亡小体;细胞表面微绒毛减少或消失,细胞核染色质凝集成团块状或边集,核膜破裂,细胞内容物以发泡的形式排出,细胞质显着空泡化,这些变化符合凋亡细胞的典型特征。Annexin V-FITC & PI双染法及TUNEL法检测也发现:OA、利玛原甲藻脂溶性组分能够诱导四株细胞发生凋亡,这与形态学观察的结果一致。Annexin V-FITC & PI双染法检测还发现:相关亚历山大藻的去藻过滤液>5K组分能够诱导四株哺乳类细胞凋亡。这表明:OA、利玛原甲藻脂溶性组分和相关亚历山大藻未知毒性物质可能通过诱导细胞凋亡而对哺乳类细胞造成影响。米氏凯伦藻极性脂类组分导致四株细胞变圆、脱壁、肿胀,细胞膜破裂,这表明细胞发生坏死而非凋亡,双染法的检测结果也进一步证明了细胞发生坏死。而且,这种未知毒性物质导致四株细胞培养液中丙二醛的含量均明显升高,表明:米氏凯伦藻内的未知毒性物质能够引发细胞脂质过氧化,对细胞造成氧化损伤,这与OA、利玛原甲藻脂溶性组分和相关亚历山大藻未知毒性物质对哺乳类细胞的影响机制明显不同。四株不同类型的哺乳类细胞对毒素或毒性物质的敏感性略有不同,但差异不明显。小鼠神经瘤细胞和人肝癌细胞略敏感,其次分别为人肝细胞和小鼠皮肤细胞。本研究首次将小鼠神经瘤细胞应用于DSP等赤潮藻毒素的毒性检测,发现:该细胞对毒素反应较敏感,检出限与其它化学或生物检测方法的检出限相当;而且,这些细胞毒性检测方法操作简便、快速,样品处理流程简单,所需样品量少,因此,应用该株细胞进行的细胞毒性测试方法具有发展为DSP等赤潮藻毒素毒性检测常规方法的潜能。Neuro-2a细胞既可用于PSP毒素毒性的检测,也可用于DSP等赤潮藻毒素的毒性检测,这将为赤潮藻毒素的快速检测提供便利。综上所述,DSP毒素和我国沿海的重要赤潮原因种(米氏凯伦藻、亚历山大藻等)能够产生毒素或毒性物质,并通过诱导细胞凋亡、引发氧化损伤等方式对哺乳类细胞造成毒性影响,因此,赤潮藻毒素或毒性物质通过食物链的传递进入人体后,有可能危害人类的健康,应引起我们的高度关注。另一方面,由于赤潮藻毒素或毒性物质对肿瘤细胞的抑制活性,其潜在的药用价值值得进一步去探索。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
哺乳类细胞论文参考文献
[1].曹丽丽.高、低剂量率γ线照射对哺乳类细胞生长存活及DNA损伤修复的影响[D].苏州大学.2011
[2].陈洋.DSP等赤潮藻毒素对哺乳类细胞的毒性效应及机制研究[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）.2008
[3].李元杰,徐方.哺乳类细胞DNA复制后修复的研究[J].宁夏医学院学报.2007
[4].贡成良,薛仁宇,曹广力.杆状病毒——一种新的哺乳类细胞传递基因载体[J].蚕业科学.2004
[5].郭丹,傅更锋,樊燕蓉,薛龙增.RNA干涉技术在哺乳类细胞和人类疾病基因功能研究中的应用[J].生物医学工程学杂志.2004
[6].竺可青,余应年,章锁江.MNNG对哺乳类细胞JNK/SAPK及p38MAPK作用及其信号源研究(英文)[J].中国病理生理杂志.2003
[7].严乐勤,余应年,诸葛坚,谢海洋.人细胞色素P4502A6cDNA克隆及其在哺乳类细胞中的表达[J].中国药理学与毒理学杂志.2000
[8].胡文蔚,余应年,陈星若,宋韬,谢海洋.哺乳类细胞参与MNNG诱导的非定标性突变发生基因的分离和功能研究[J].癌变.畸变.突变.1999
[9].鲁靖,余应年,谢海洋.MNNG诱导的哺乳类细胞信号转导通路的改变[J].癌变.畸变.突变.1999
[10].刘东瀛.慢性持续性支原体感染导致恶性转化的哺乳类细胞中无支原体基因存在[J].国外医学(分子生物学分册).1999
论文知识图
