食品中蜡样芽孢杆菌芽孢EMA-qPCR检测

论文摘要

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是我国常见的食源性致病菌之一。基于PCR技术的快速检测方法在蜡样芽孢杆菌检测中已得到广泛运用,然而该菌在食品中多以芽孢形态存在,常规DNA提取方法难以得到高质量的DNA样本用于qPCR检测。本文对多种DNA提取方法进行比较,结果表明,超声波振荡法能够有效提取蜡样芽孢杆菌芽孢DNA。同时,对实时荧光PCR检测方法进行了改良,将DNA染料叠氮溴化乙锭(EMA)与PCR技术相结合,能够有效消除灭活菌株造成的假阳性结果,提高检测的准确性。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 菌种
•   1.2 仪器设备
•   1.3 蜡样芽孢杆菌芽孢的制备
•   1.4 芽孢DNA提取
•     1.4.1 液氮研磨法
•     1.4.2 溶菌酶法
•     1.4.3 煮沸法
•     1.4.4 超声波破碎法
•   1.5 EMA使用浓度优化
•   1.6 EMA光照时间优化
•   1.7 荧光定量PCR检测
•   1.8 人工污染实验
• 2 结果与分析
•   2.1 芽孢的制备
•   2.2 DNA提取方法不同对实时荧光PCR的影响
•   2.3 EMA使用浓度优化
•   2.4 EMA光照时间优化
•   2.5 人工污染实验结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘新梅,程逸宇,吴海晶,任敏,冯秋实,杨军

关键词: 蜡样芽孢杆菌,超声波振荡法,实时荧光,叠氮溴化乙锭

来源: 食品安全导刊 2019年15期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,化学,轻工业手工业

单位: 南京市食品药品监督检验院

基金: 南京市科技计划项目“基于3D细胞传感的食源性致病菌毒力非靶向检测技术研究及应用示范”(编号:201716006)

分类号: TS201.3;O657.3

DOI: 10.16043/j.cnki.cfs.2019.15.139

页码: 175-177

总页数: 3

文件大小: 1944K

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