E3泛素连接酶Smurf1介导受体相互作用蛋白RIP2泛素化调控的研究

论文摘要

蛋白质泛素化是一种动态的翻译后修饰,在许多生物进程发挥着不可替代的作用,包括细胞周期的调控、信号转导和转录调节等。有研究表明泛素化修饰的异常与癌症、神经变性疾病和高血压等众多疾病相关。因此,泛素化系统成为国内外研究抗肿瘤药物的热衷靶点。E3泛素连接酶Smurfl自从被发现后,对其研究不断深入。Smurf1可参与多条信号通路的调控,如BMP信号通路、TGF-β信号通路、Wnt信号通路和MAPK信号通路等。Smurfl还能调控TRAF家族的蛋白水平进而影响NF-κB信号。因此Smurfl在细胞生长和形态发生、细胞迁移、细胞极性、自噬和免疫炎症中具有多种功能。受体相互作用蛋白2（RIP2）属于RIP家族蛋白一个成员。早先的研究表明,过表达RIP2可以激活NF-κB,介导TLR信号转导进程。但是,最新研究发现,在胞壁酰二肽（MDP）的刺激下,RIP2与NOD1和NOD2相互作用,激活IKK复合物,释放NF-κB进入细胞核,促使炎症因子的表达,使机体产生炎症反应。RIP2能和许多蛋白相互作用共同调控NOD信号转导,如XIAP和RIP2相互作用,共同调控NOD介导的NF-κB的激活。表明RIP2在炎症和免疫中的重要功能。本论文研究证明Smurfl可以下调RIP2的蛋白水平,两者在细胞内和体外存在相互结合,通过细胞内及体外泛素化实验验证Smurf1可以介导RIP2的泛素化修饰。以上为研究RIP2的蛋白稳定性调控机制及Smurf1在炎症信号通路中的新机制提供了重要的线索。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 前言
•   1.1 蛋白质泛素化修饰
•     1.1.1 泛素分子
•     1.1.2 泛素化修饰过程
•     1.1.3 多聚泛素化
•     1.1.4 单泛素化
•     1.1.5 泛素结构多样性的作用
•   1.2 泛素连接酶
•     1.2.1 RING家族E3泛素连接酶
•     1.2.2 HEC T家族E3泛素连接酶
•     1.2.3 RBR家族E3泛素连接酶
•     1.2.4 NEDD4亚家族连接酶
•     1.2.5 E3泛素连接酶S murfl
•   1.3 RIP家族蛋白
•     1.3.1 RIP家族蛋白概述
•     1.3.2 RIP2简介
•     1.3.3 RIP2的生物学功能
•   1.4 NF-κB概述
•     1.4.1 NF-κB组成
•     1.4.2 两种NF-κB信号通路
• 2. 材料与方法
•   2.1 实验材料
•     2.1.1 菌株
•     2.1.2 质粒
•     2.1.3 细胞株
•     2.1.4 试剂
•     2.1.5 酶
•     2.1.6 抗体
•     2.1.7 实验仪器和材料
•   2.2 实验方法
•     2.2.1 质粒构建相关的实验方法
•     2.2.2 细胞相关实验方法
•     2.2.3 体外相关实验方法
• 3. 结果与分析
•   3.1 E3泛素连接酶Smurf1下调RIP2的蛋白水平
•   3.2 Smurf1对RIP2的蛋白水平的影响可以被Chloroquine抑制
•   3.3 Smurf1与RIP2的相互作用
•     3.3.1 Smurf1与RIP2在细胞内的相互作用
•     3.3.2 Smurf1与RIP2在体外的相互作用
•   3.4 Smurf1能增强RIP2的泛素化
•     3.4.1 Smurf1在细胞内增强RIP2的泛素化
•     3.4.2 Smurf1在体外催化RIP2的泛素化
•     3.4.3 RIP2的第538、410和209位Lys都不是Smurf1介导的泛素化位点
• 4. 讨论与展望
•   4.1 Smurf1对RIP2的蛋白水平影响分析
•   4.2 Smurf1对RIP2的泛素化修饰分析
•   4.3 Smurf1介导RIP2泛素化的功能分析
• 参考文献
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 林丽鹏

导师: 王洪睿

关键词: 泛素化

来源: 厦门大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学,生物学

单位: 厦门大学

分类号: Q75

总页数: 72

文件大小: 4693K

下载量: 21