腺病毒论文_刘滴,吴辉,李云曌,杨俊,杨简

导读:本文包含了腺病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:腺病毒,肺炎,重症,蛋白,转染,质粒,合子。

腺病毒论文文献综述

刘滴,吴辉,李云曌,杨俊,杨简[1](2019)在《cFLIP_L和cFLIP_S腺病毒载体的构建及其在心肌细胞中的表达》一文中研究指出目的 :构建并鉴定cFLIP_L和cFLIP_S重组质粒,并观察其在乳鼠心肌细胞中表达并检测转染效率。方法 :利用基因合成技术获取cFLIP_L和cFLIP_S基因,分别连接pAd-CMV-GFPa1-IRES载体质粒,并转移至穿梭质粒pAdcFLIP_L和pAd-cFLIP_S,经挑选、扩培后进行酶切验证及测序鉴定、包装、扩增、纯化获得一定滴度的pAd-cFLIP_L和pAd-cFLIP_S,之后感染原代乳鼠心肌细胞,观察两者在心肌细胞中的荧光表达并用流式细胞仪检测转染效率。结果 :酶切验证与理论值相符,测序鉴定结果与目的基因序列一致;pAd-cFLIP_L和pAd-cFLIP_S感染人胚肾293A细胞后可见大量绿色荧光蛋白表达和聚集,10 d后出现典型的细胞病变,腺病毒包装成功,并测得滴度均为1×10~9pfu/ml;同时,在荧光显微镜下可见重组腺病毒感染可在乳鼠心肌细胞中稳定表达并发出绿色荧光,流式细胞仪检测结果显示其转染效率为90.30%±3.62%。结论 :成功构建cFLIP_L和cFLIP_S重组腺病毒表达载体且证实其能安全、有效地感染乳鼠心肌细胞。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2019年06期)

贾政,刘茜,邢正江,邹弘麟,李亚雄[2](2019)在《重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho构建的实验研究》一文中研究指出目的本研究旨在构建并制备增强型荧光蛋白(EGFP)基因和Klotho基因重组腺病毒载体AdEGFP-Klotho,并将其感染HEK293细胞,为基因治疗提供研究基础。方法设计含有NheⅠ与NotⅠ双酶切位点的引物,应用PCR方法扩增Klotho基因,将其连接到EGFP标记的pDC316-mCMV穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-Klotho,利用Polyfectin脂质体将骨架质粒和重组穿梭质粒共转染HEK293细胞进行同源重组,得到重组腺病毒Ad-EGFP-Klotho,并包装扩增,测定病毒颗粒数及滴度。采用PCR方法对重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho进行鉴定,并进行Klotho基因测序。结果经PCR和NheⅠ、NotⅠ双酶切鉴定,重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho中证实含有Klotho基因,测序结果和设计序列比对一致,重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho构建成功。滴度为2.0×1010 Tu/mL,成功感染HEK293细胞,感染复数(MOI)=100,感染效率达91.75%,从Ad-EGFP-Klotho重组腺病毒载体中可以检测到3 045bp的条带,表明目的基因已成功整合在重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho基因组中。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含有EGFP和Klotho基因的重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho,制备获得高滴度的病毒,可高效感染HEK293细胞并表达目的蛋白。(本文来源于《重庆医学》期刊2019年23期)

Yu-huan,BAI,Xiao-jing,YUN,Yan,XUE,Ting,ZHOU,Xin,SUN[3](2019)在《一种新的溶瘤腺病毒抑制肝癌细胞的生长(英文)》一文中研究指出目的:研究新型溶瘤腺病毒GP73-SphK1sR-Ad5对肝癌细胞生长的抑制作用。创新点:GP73-SphK 1sR-Ad5是一种新型的溶瘤腺病毒,可以特异及有效地抑制肝癌细胞生长,为肝癌的临床治疗提供新思路。方法:通过整合高尔基体蛋白73(GP73)及鞘氨基醇激酶1(SphK 1)构建了GP73-SphK1sR-Ad5腺病毒,进而转染肝癌Huh7细胞及正常HL7702肝细胞。通过实时定量PCR和蛋白印记实验检测Sph K1和E1A基因的表达;通过四氮唑盐比色分析法(MTT法)检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞凋亡率。构建Huh7异种移植小鼠模型,并注射GP73-SphK1sR-Ad5腺病毒。20天后,记录小鼠肿瘤体积和重量,以及存活时间。用苏木精-伊红(HE)染色法和透射电镜(TEM)观察肿瘤组织的病理变化。结果:GP73-SphK 1sR-Ad5转染显着上调了Huh7细胞中E1A的表达,下调了SphK 1的表达,降低了细胞活性,并提高了凋亡率,然而对HL7702细胞无明显影响。Huh7异种移植小鼠模型内注射GP73-SphK 1sR-Ad5显着降低了肿瘤的体积和重量,延长了小鼠的存活时间,并降低了肿瘤组织中的肿瘤浸润面积、血管密度及核变形和染色质浓缩的细胞数。结论:新型溶瘤腺病毒GP73-Sph K1s R-Ad5可以特异和有效地抑制肝癌进展。(本文来源于《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》期刊2019年12期)

岑瑞祥,赵凯,万浪,彭聪,曹炜[4](2019)在《缺氧诱导因子-1α和BCL-2/腺病毒E1B19 kDa相关蛋白3在中耳胆脂瘤表达及意义》一文中研究指出目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)和BCL-2/腺病毒E1B19KDa相关蛋白3(Bcl2/adenovirus E1B 19 kD interacting protein 3,BNIP3)在中耳胆脂瘤中的表达及胆脂瘤上皮的凋亡情况。方法采用免疫组织化学方法检测30例中耳胆脂瘤标本与18例外耳道皮肤标本中HIF-1α和BNIP3蛋白的表达情况,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,Tunel)检测20例中耳胆脂瘤标本和18例外耳道皮肤标本的凋亡情况。使用Pearson相关分析检验HIF-1α和BNIP3蛋白之间的相关性。结果 HIF-1α在胆脂瘤组和对照组的平均光密度分别为0.16±0.07和0.08±0.03,两组比较差异有统计学意义(t=4.279,P<0.01);BNIP3在胆脂瘤组和对照组的平均光密度分别为0.16±0.08和0.11±0.06,两组比较差异有统计学意义(t=2.463,P=0.0185);经pearson相关分析,在胆脂瘤上皮中,HIF-1α和BNIP3之间呈正相关(r=0.418,P=0.003);Tunel染色中,凋亡指数在胆脂瘤组和对照组分别为(52.8±12.5)%和(9.99±2.97)%,两组比较差异有统计学意义(t=14.166,P<0.01)。结论 HIF-1α和BNIP3在中耳胆脂瘤中的异常表达可能与胆脂瘤的高凋亡特性有关。(本文来源于《中国耳鼻咽喉头颈外科》期刊2019年11期)

李文桂,陈雅棠[5](2019)在《重组犬腺病毒2型疫苗的研制现状》一文中研究指出犬腺病毒2型引起的传染性喉气管炎是一种常见的动物传染病。犬腺病毒2型可诱导感染的宿主产生细胞、体液和黏膜免疫应答,可通过分子生物学技术改造为理想的疫苗载体,从而表达寄生虫和病毒的多种蛋白。这些病原体包括刚地弓形虫、犬细小病毒、猫瘟病毒、犬瘟热病毒、狂犬病毒、犬冠状病毒、汉城病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒等,本文拟就这方面的研制现状进行阐述。(本文来源于《国外医学(医学地理分册)》期刊2019年04期)

王炜川,陈璐璐,权香兰,李颖,金永民[6](2019)在《携带人端粒酶反转录酶启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35对乳腺癌干细胞的靶向作用》一文中研究指出目的探讨携带人端粒酶反转录酶启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35在靶向乳腺癌干细胞中的作用。方法乳腺癌细胞系MCF-7以球体形式在加入生长因子的无血清培养基中生长。同时构建携带TERT启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35,并通过溶瘤、MTT及体内抗肿瘤实验观察RCA-TERT-Ad35对干细胞样癌细胞的杀伤效果。结果与亲代细胞相比,MCF-7球体细胞显示出干细胞特性,且MCF-7球体细胞中hTERT基因过表达,其对细胞毒性剂紫杉醇具有耐药性。溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35在TERT过表达的细胞中进行复制并抑制细胞生长。在裸鼠移植瘤模型中,与RCA-Ad35相比,RCA-TERT-Ad35显着抑制肿瘤生长并改善小鼠的存活状态。结论溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35可优先杀伤TERT过表达的乳腺癌干细胞。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2019年11期)

刘艳艳[7](2019)在《丙种球蛋白联合抗感染佐治小儿重症腺病毒肺炎的临床疗效》一文中研究指出目的:分析丙种球蛋白联合抗感染药物佐治小儿重症腺病毒肺炎的临床疗效。方法:选取2018年2月~2019年6月收治的60例重症腺病毒肺炎患儿为研究对象,按照住院顺序分为对比组和研究组,各30例。对比组采用常规治疗的方法,研究组在常规治疗的基础上联合丙种球蛋白治疗,比较两组临床指标、并发症发生情况及临床疗效。结果:研究组呼吸机使用时间、持续发热时间、住院时间均短于对比组,P<0.05;研究组并发症总发生率低于对比组,P<0.05;研究组的治疗总有效率高于对比组,P<0.05。结论:重症腺病毒肺炎患儿使用丙种球蛋白联合抗感染药物治疗,有助于提高治疗效果,减少并发症发生情况,缩短呼吸机使用时间、持续发热时间及住院时间,缓解疾病痛苦,尽早恢复健康。(本文来源于《实用中西医结合临床》期刊2019年11期)

柴永笑,金前跃,李旭锋,王垚,丁培阳[8](2019)在《禽腺病毒4型XZ株增殖与纯化方法的建立》一文中研究指出2015年7月以来,禽腺病毒4型在中国的大部分地区暴发流行,并造成重大损失。为进一步对该病毒进行研究,采用两种方法对所分离的XZ株进行体外增殖培养,并利用透射电镜观察到完整的病毒粒子,同时采用超滤浓缩和凝胶层析的方法对病毒进行纯化。结果显示,成功建立了稳定的禽腺病毒4型XZ株增殖体系,以及温和、高效的病毒纯化工艺,且纯化病毒感染性强,具有很好的免疫原性。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期)

李攀,郎艳美,石艳玺[9](2019)在《2015年-2018年住院患儿腺病毒和合胞病毒肺炎的临床特征分析》一文中研究指出目的探讨腺病毒和合胞病毒肺炎患儿发病及临床特征,为早期诊断和临床治疗提供依据。方法选取2015年1月-2018年12月期间收治的ADV和RSV导致的肺炎患儿作为研究对象,根据感染的病毒类型分为腺病毒肺炎组60例和合胞病毒肺炎组67例。通过病例报告和医疗文书,分析比较2组肺炎患儿的季节分布、年龄分布、临床特征、实验室检查和并发症。结果 ADV组和RSV组患儿肺炎患病的季节分布情况和年龄分布情况相似,2组肺炎在春季和冬季的发病比例都高于夏季和秋季,且2组肺炎的发病主要分布在6个月~2岁,差异均无统计学意义(P>0.05)。与ADV组肺炎患儿比较,RSV组肺炎患儿体温>39.7℃、双肺闻及喘鸣音和肺炎高危因素的症状明显,差异具有统计学意义(P<0.05);气促、痰壅和严重咳嗽的症状与ADV组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2组肺炎患儿都存在C反应蛋白升高、白细胞升高、心肌损害、肝脏损害和血沉增快的表现,差异无统计学意义(P>0.05)。2组肺炎患儿都可见免疫低下、哮喘、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征、消化道出血、胸腔积液和肾功能异常等并发症。与ADV组肺炎患儿相比,RSV组肺炎患儿并发症多见细支气管炎和鼻炎、咽炎、喉炎,少见中毒性心肌炎、肝功能异常、中毒性肝炎、电解质紊乱、症状性腹泻和中毒性脑病(P<0.05)。结论临床上需要考虑腺病毒和合胞病毒感染的肺炎患儿的症状,在春冬2季需要对6个月~2岁的儿童做好预防措施,有高热、双肺闻及喘鸣音、肺炎高危因素或合并细支气管炎和鼻炎、咽炎、喉炎的患儿多考虑RSV肺炎,而合并中毒性心肌炎、肝功能异常、中毒性肝炎、电解质紊乱、症状性腹泻和中毒性脑病的患儿多考虑ADV肺炎。针对这2种肺炎不同的临床症状和并发症要对症下药,以提高治疗效果。(本文来源于《中国病案》期刊2019年11期)

李娟,刘秀云,殷菊,刘军,郭琰[10](2019)在《儿童重症腺病毒肺炎急性期临床特点分析》一文中研究指出目的总结儿童重症腺病毒肺炎急性期的临床特点。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2012-2017年收治的177例重症腺病毒肺炎急性期患儿的临床资料,回顾性分析患儿的临床表现、病原检测、并发症、治疗和转归。结果冬春两季的发病例数为117例(66.1%),发病月龄1.23~159.83个月,其中≤2岁者占74.6%(132/177)。体温>39℃者占97.7%(173/177),热程≥10 d者占71.2%(126/177)。所有患儿均有咳嗽,71.2%(126/177)存在喘息。40.7%(72/177)有循环系统并发症,35.6%(63/177)有消化系统损害,11.3%(20/177)有神经系统损害,19.2%(34/177)有血液系统损害。对血或鼻咽分泌物应用聚合酶链反应(PCR)方法检测的腺病毒阳性率为75.2%,咽部分泌物免疫荧光抗原检测的阳性率为61.8%,明显低于PCR检测方法(P <0.05)。应用静脉丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin, IVIG)1 g/(kg·d)、2 d者体温降至正常的时间为(2.24±1.09)d,明显短于应用IVIG 400 mg/(kg·d)、5 d者的(4.22±1.84)d,差异有统计学意义(P <0.001)。两种方案的IVIG对预后影响的差异无统计学意义(P> 0.05)。80.8%(143/177)的患儿需要使用糖皮质激素,平均应用时间为(9.94±5.63)d。根据是否发生闭塞性细支气管炎(BO)分为BO组和非BO组,两组患儿糖皮质激素开始使用时间的差异无统计学意义(P> 0.05)。结论重症腺病毒肺炎主要发生于2岁以下的婴幼儿,全部患儿有咳嗽,多为高热且持续时间长,多数患儿存在喘息。以心肌损害、呼吸衰竭和肝损害为常见并发症。咽部分泌物或血液的腺病毒PCR检查明显优于免疫荧光的抗原检测。应用IVIG 1 g/(kg·d)连用2 d可以有效控制体温。(本文来源于《北京医学》期刊2019年11期)

腺病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的本研究旨在构建并制备增强型荧光蛋白(EGFP)基因和Klotho基因重组腺病毒载体AdEGFP-Klotho,并将其感染HEK293细胞,为基因治疗提供研究基础。方法设计含有NheⅠ与NotⅠ双酶切位点的引物,应用PCR方法扩增Klotho基因,将其连接到EGFP标记的pDC316-mCMV穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-Klotho,利用Polyfectin脂质体将骨架质粒和重组穿梭质粒共转染HEK293细胞进行同源重组,得到重组腺病毒Ad-EGFP-Klotho,并包装扩增,测定病毒颗粒数及滴度。采用PCR方法对重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho进行鉴定,并进行Klotho基因测序。结果经PCR和NheⅠ、NotⅠ双酶切鉴定,重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho中证实含有Klotho基因,测序结果和设计序列比对一致,重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho构建成功。滴度为2.0×1010 Tu/mL,成功感染HEK293细胞,感染复数(MOI)=100,感染效率达91.75%,从Ad-EGFP-Klotho重组腺病毒载体中可以检测到3 045bp的条带,表明目的基因已成功整合在重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho基因组中。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含有EGFP和Klotho基因的重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho,制备获得高滴度的病毒,可高效感染HEK293细胞并表达目的蛋白。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

腺病毒论文参考文献

[1].刘滴,吴辉,李云曌,杨俊,杨简.cFLIP_L和cFLIP_S腺病毒载体的构建及其在心肌细胞中的表达[J].解剖学杂志.2019

[2].贾政,刘茜,邢正江,邹弘麟,李亚雄.重组腺病毒载体Ad-EGFP-Klotho构建的实验研究[J].重庆医学.2019

[3].Yu-huan,BAI,Xiao-jing,YUN,Yan,XUE,Ting,ZHOU,Xin,SUN.一种新的溶瘤腺病毒抑制肝癌细胞的生长(英文)[J].JournalofZhejiangUniversity-ScienceB(Biomedicine&Biotechnology).2019

[4].岑瑞祥,赵凯,万浪,彭聪,曹炜.缺氧诱导因子-1α和BCL-2/腺病毒E1B19kDa相关蛋白3在中耳胆脂瘤表达及意义[J].中国耳鼻咽喉头颈外科.2019

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[10].李娟,刘秀云,殷菊,刘军,郭琰.儿童重症腺病毒肺炎急性期临床特点分析[J].北京医学.2019

论文知识图

细胞内腺病毒空载Ad和~...αshRNA对足细胞的影响苏丹型埃博拉重组腺病毒的PCR鉴...不同类型细胞频率响应特性分析敲低APE1增强射线诱导的肝癌细...克隆形成分析敲低APE1增强射线诱导的...

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