导读:本文包含了缺血微环境论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:外周血间充质干细胞,通心络,糖尿病足大鼠模型,血管新生
缺血微环境论文文献综述
高怀林,郭勇英[1]（2018）在《通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血干细胞的微环境影响》一文中研究指出目的探讨通心络超微粉能否改善糖尿病足大鼠缺血下肢微环境,从而促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果。方法将70只雄性Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组,通心络组,西洛他唑组,干细胞组,通心络联合干细胞组,西洛他唑联合干细胞组,每组10只,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,采用放免法测定IL-1、IL-6和TNF-仪;取腓肠肌行冰冻切片荧光显微镜观察新生血管,采用Western blot法检测大鼠缺血肢肌组织ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量。结果(1)荧光显微镜观察结果显示:通心络联合干细胞组干细胞数和积分光密度多于干细胞组和西洛他唑联合干细胞组(P<0.01)。(2)结果显示:与对照组比较,模型组IL-1、IL-6、TNF-仪、ICAM-1和VCAM-1表达显着升高(P<0.01)。与模型组比较,通心络组和通心络联合干细胞组IL-1、IL-6、TNF-仪、ICAM-1和VCAM-1表达显着降低(P<0.01)。结论通心络通过降低糖尿病足大鼠缺血下肢肌组织的炎症水平,改善干细胞移植的微环境,提高外周血间充质干细胞局部肌肉移植后血管新生。(本文来源于《第十四届国际络病学大会论文集》期刊2018-03-16）
高怀林[2]（2017）在《通络治疗对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血干细胞的微环境影响》一文中研究指出目的：目的：探讨通心络超微粉能否改善糖尿病足大鼠缺血下肢微环境，从而促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果?方法：方法：将140只雄性Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型，成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型，以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组，造模大鼠随机分成6组：模型组，通心络组，西洛他唑组，干细胞组，通心络联合干细胞组，西洛他唑联合干细胞组，分别给予治疗干预28天后麻醉，腹主动脉取血，离心取上清，采用放免法测定IL-1、IL-6和TNF-α；取腓肠肌行冰冻切片荧光显微镜观察新生血管，采用Western blot法检测大鼠缺血肢肌组织ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量。结果：2.1干细胞标记及移植后观察在荧光显微镜紫外光激发下，干细胞细胞核发出蓝色荧光，表明干细胞被DAPI标记，干细胞数为(179±34)、荧光为强阳性、积分光密度(301.2±23.5)，见图1。在治疗28天荧光显微镜下观察移植后的干细胞：通心络联合干细胞组干细胞数和积分光密度多于干细胞组和西洛他唑联合干细胞组(P<0.01)，见图2、表1。2.2 HE染色普通光学显微镜观察各组大鼠缺血下肢肌组织病理变化对照组肌纤维排列稍有紊乱，肌节清晰可见，偶可见肌间质纤维化，少量炎细胞浸润，见图3 A。模型组肌纤维排列紊乱更加明显，肌间质部分纤维化，肌纤维萎缩，炎细胞浸润明显，见图3 B。各用药组肌纤维排列、肌间质纤维化及炎细胞浸润较模型组减轻，其中通心络和通心络联合干细胞减轻较明显，见图3 C-G。2.3透射电镜观察各组大鼠缺血下肢肌组织超微结构对照组：肌节、肌丝排列整齐，结构清晰，Z线、M线、A带、H带、I带清晰可见，肌原纤维间见线粒体和糖原颗粒存在，少部分线粒体双层膜结构模糊不清，肌浆网轻度扩张，肌膜完整，见图4A。模型组：部分肌丝融合、模糊、增宽，糖原堆积，肌原纤维稀疏、间隙增宽、有断裂，可见Z线增宽，部分线粒体水肿，嵴结构不清、断裂、溶解，有絮状变性，空泡变性，可见髓样化、致密化改变，外膜局部溶解、消失，内质网有扩张，核间隙增宽，见图4B。各用药组：与模型组比较，各用药组肌组织超微结构均可不同程度减轻，其中通心络和通心络联合干细胞结构病变减轻较为显着，见图4C-G。2.4各组大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α水平变化与对照组比较，模型组血清IL-1、IL-6和TNF-α水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较，干细胞组血清IL-1、IL-6和TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05)；余用药组IL-1、IL-6和TNF-α水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与干细胞组比较，通心络联合干细胞组血清IL-1、IL-6和TNF-α显著降低(P<0.01)，表2。2.5各组大鼠缺血下肢肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白变化与对照组比较，模型组ICAM-1和VCAM-1蛋白表达增加。与模型组比较，PB-MSCs肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)，余用药组肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)；各用药组组间比较肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)，见图5。结论：糖尿病足(dibetic foot, DF)的发病机制十分复杂，至今仍在不断的深入研究，近年来随着国内外研究发现炎症反应、氧化应激及晚期糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)是血管内皮损伤的重要机制，其与DF的发生发展密切相关，叁者协同作用于血管，加速血管病变的进展。目前应用干细胞移植治疗糖尿病足，是通过其可促进缺血肢体的新生血管形成，改善和恢复肢体血流，从而达到治疗目的[8]。中医脉络学说认为，基于中医脉与西医血管，脉络与中小血管、微血管、微循环在解剖形态学上的密切相关性，提出“脉络-血管系统病”概念[9]。糖尿病足是糖尿病日久累及肢体大、中、小、微血管的一类并发症，属于中医“消渴脱疽”范畴，可见糖尿病足亦属于“脉络-血管系统病”研究的范畴。通心络是脉络学说指导下研制的中药复方制剂，具有益气活血化瘀、搜风通络止痛[10]。既往研究[11,12]发现，组织缺血缺氧、缺血/再灌注损伤时，引发大量炎性因子释放强烈的氧化应激反应等，导致缺血缺氧组织区域微环境恶劣，导致移植后的干细胞大量死亡，致使其疗效受限；并且有实验[13]研究发现，从DF大鼠中提取的间充质干细胞移植治疗DF无改善肢体缺血、血管新生的作用。如何提高干细胞移植后的疗效，是目前干细胞移植的关键问题。因此本实验探讨通心络通过改善糖尿病足大鼠缺血下肢炎症反应，进而提高干细胞移植治疗后血管新生?本实验荧光显微镜下结果显示，通心络联合干细胞组可观察到植入的干细胞数和形成新生血管数多于单纯干细胞组和西洛他唑联合干细胞组。1减轻肌组织损伤本实验HE染色结果显示DF大鼠肌组织发生明显形态学改变，肌纤维排列紊乱，部分萎缩，炎细胞浸润，透射电镜观察显示部分肌丝融合、模糊、增宽，部分线粒体肿大，嵴结构不清、断裂、溶解，有絮状变性，空泡变性，可见髓体样化、致密化改变，外膜局部溶解、消失，内质网有扩张，核间隙增宽。各用药组可不同程度减轻肌组织学改变，其中通心络组和通心络联合干细胞组肌组织学改善显着。肌组织是干细胞移植后生存环境，肌组织病变可能影响了干细胞存活，因此改善肌组织损伤，可能提高干细胞存活率。本研究结果提示，通心络可以减轻肌组织损伤，可能提高干细胞存活率。2减轻炎症反应炎症标志物作为炎症过程的重要调节因子，在糖尿病足的发生、发展中可能具有重要作用[14]。TNF-α、IL-1β是重要的炎性趋化因子，能够诱导单核细胞和中性粒细胞趋化浸润到炎症部位，两者的协同作用进一步促进IL-6的表达及释放[15],IL-6作为强有力的促炎细胞因子，能扩大炎症反应的作用[16]，从而展开以TNF-α为首的炎症级联反应，形成恶性循环[17]。同时多种炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6的产生还使ICAM-1、VCAM-1的表达增加，血管通透性增加，促进局部形成血栓[18]，进而激发炎症连锁反应[19]。ICAM-1、VCAM-1是与炎症损伤相关的血管内皮因子，均可参与调节炎症反应过程[20]，正常状态下少量表达。本实验研究结果说明DF大鼠机体存在高IL-1、IL-6及TNF-α水平，机体存在ICAM-1和VCAM-1高表达，证明DF发病过程中多种炎症因子参与机体炎症反应，增加血管通透性，影响血管新生。用药组结果说明通络药物可以减轻炎症刺激，进而改善干细胞移植后微环境的炎症反应，提高干细胞移植后血管新生。因此推测中药通心络可能通过改善干细胞移植的局部微环境，促进干细胞移植后治疗性血管新生及侧支循环建立，改善缺血下肢血流灌注量，改善缺血血供。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集（中册）》期刊2017-12-06）
张静,马爱群,魏峰,王亭忠[3]（2017）在《大鼠骨髓间充质干细胞在心肌缺血微环境中Cav1.2的表达》一文中研究指出目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在心肌缺血微环境中向心肌细胞分化过程中Cav1.2的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型(n=52),并行心电图检查。将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记MSCs,贴壁培养,用心外膜下注射法将GFP标记的MSCs移植到心肌梗死周边区域;移植后7 d开胸取心脏组织,HE染色观心肌梗死区域病理变化。将移植后3,5,7 d的大鼠分为3 d组、5 d组、7 d组,每组10只动物,免疫荧光染色观察各组移植的MSCs上Cav1.2蛋白的表达;激光捕获显微切割技术分离各组心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用real-time PCR测定各组心肌组织中Cav1.2及未移植大鼠MSCs mRNA的相对表达量;移植后9 d,对移植区域行TUNEL凋亡染色。结果免疫荧光染色观察3 d组、5 d组、7 d组心肌组织中移植的MSCs均不表达Cav1.2;real-time PCR测定显示,3 d组、5 d组、7 d组中Cav1.2相对表达量与未移植的MSCs相比均无明显变化(P>0.05),移植后9 d未观察到MSCs的表达,TUNEL凋亡染色显示移植的MSCs发生了凋亡。结论在大鼠心肌缺血微环境中移植的MSCs不表达Cav1.2且不能长期存活。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2017年11期）
郭勇英,常丽萍,张军芳,高怀林[4]（2017）在《通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血间充质干细胞的微环境影响》一文中研究指出研究发现~[1],通心络联合外周血间充质干细胞移植可通过调节HIF-1/VEGF通路及miR-210表达来促进内皮细胞增殖、分化,进而促进新生血管形成。然而,局部恶劣的微环境,如缺血缺氧、炎症反应、氧化应激等,不利于心肌梗死区干细胞移植后的生存、分化,致使其疗效受限~[2]。因此,本实验研究就通心络是否改善糖尿病足(dibetic foot,DF)大鼠缺(本文来源于《中国药理学通报》期刊2017年07期）
陈静,李树清[5]（2016）在《缺血后适应对树鼩海马ASIC2a表达及微环境离子稳态调控机制的研究》一文中研究指出目的:研究树鼩脑缺血及缺血后适应(postconditioning,PC)对酸敏感性离子通道(acid-sensing ion channel,ASIC)2a表达及海马微环境离子稳态性的影响,探讨ASIC2a在PC脑保护效应中的作用机制。方法:建立光化学诱导的树鼩血栓性脑缺血模型及PC模型,在观察脑组织病理形态学改变的基础上,利用单泵等速微灌流系统对海马离子微环境进行动态监测,并通过免疫组化、RT-PCR及Western blotting技术对树鼩海马组织内ASIC2a的表达进行定位和定量研究。结果:树鼩皮层脑血栓形成后引起了同侧海马神经元的继发性损伤及海马神经元微环境的紊乱;PC处理可减轻海马神经元缺血损伤性改变,并使海马微环境离子稳态失衡得以明显改善;脑缺血诱导树鼩海马ASIC2a蛋白及m RNA表达一过性增强,PC处理使得ASIC2a表达水平更高、持续时间延长(P<0.05)。结论:神经元微环境内离子稳态性异常是海马神经元继发性损伤的重要原因;PC可通过诱导ASIC2a表达上调,以强化机体内源性损伤防御机制,这也是其改善神经元微环境离子稳态性、提高缺血耐受性的关键所在。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2016年08期）
陈静[6]（2016）在《缺血后适应对树鼩海马神经元微环境离子稳态的调控及机械—生物信号转导的脑保护机制研究》一文中研究指出[目的]研究脑缺血和缺血后适应对树鼩海马神经元微环境中离子稳态的影响,探讨机械敏感性分子ASIC2a和SGK1在脑缺血及缺血后适应中的消长变化及病理生理作用,揭示缺血后适应内源性神经保护效应的分子机制及调控环节。[方法]采用光化学法建立树晌皮层血栓性脑缺血模型,并于缺血后4h通过周期性、反复夹闭缺血侧颈总动脉(夹闭5min,再通5min,重复3个循环)建立缺血后适应模型。于缺血后4h、24h及72h点,通过激光多普勒血流仪测量皮层缺血区rCBF;以单泵等速微灌流系统和离子分析仪测定海马离子微环境的变化；在测定脑组织含水量的基础上,通过TTC染色、HE染色及电镜超微结构观察对缺血性脑损伤进行全面的病理形态学评价；采用western blotting和免疫组化技术检测树鼩皮层及海马ASIC2a、SGK1和p-SGK(Thr256)蛋白的表达；以逆转录-聚合酶链反应测定皮层及海马ASIC2a、SGK1mRNA的表达。同时,在海马内注射SGK1特异性抑制剂GSK-650394建立反向拮抗模型,观察上述指标的变化,进一步探讨SGK1在缺血后适应脑保护效应中的作用,及其与ASIC2a间的相互关系。[结果]光化学诱导树鼩皮层脑缺血后4h、24h及72h缺血区皮层rCBF均明显下降,以缺血后24h降低最为显着；实施缺血后适应处理可使缺血区皮层rCBF的下降程度明显减轻,与缺血组同期值相比具有显着性差异(P<0.01)。海马离子微环境检测表明,树鼩皮层缺血后,其海马微环境内出现了pH值、Na+、Ca2+、Cl含量的降低,K+含量的升高,变化以缺血后4h最为显着,其次为缺血后24h,72h无显着性差异；实施缺血后适应处理后,各组动物各时点内pH值、K+、Na+、Ca2+、Cl-含量的变化规律与缺血组相似,但变化程度明显减轻。脑缺血后树鼩皮层及海马脑水含量增加,以缺血后24h变化最为显着;后适应处理使各时间点皮层及海马脑水含量明显降低。TTC染色表明,光化学反应后4h,照射区皮层即出现明显的梗死灶,24h梗死面积最大,72h梗死面积减小；实施缺血后适应处理使各时间点皮层梗死面积减小,尤其在缺血后24h和72h,后适应组与缺血组同期值相比具有显着性差异。HE染色结果显示,光化学诱导树鼩皮层脑血栓形成后4h,在同侧海马区也检测到了海马神经元的继发性损伤,24h达高峰,72h损伤仍很明显；实施后适应处理可减轻缺血损伤性改变,后适应组在各时间点的海马CA1区组织学分级降低,海马神经元继发性损伤明显减轻。电镜观察显示,缺血后适应期间,树鼩皮层及海马神经元固缩减少、线粒体和内质网的病理改变明显减轻,细胞水肿改善。Western blotting和免疫组化结果表明,脑缺血能诱导树鼩皮层及海马ASIC2a、SGK1和p-SGK(Thr256)蛋白的表达一过性增加；后适应处理可使皮层及海马ASIC2a、SGK1和p-SGK(Thr256)蛋白的表达进一步增加且持续时间更久；同时,在皮层缺血区,后适应组于缺血后24h点出现了ASIC2a、SGK1和p-SGK(Thr256)蛋白表达保护性下调的“修整期”,以避免细胞代谢“透支”的影响。此外,在脑缺血及缺血后适应过程中,树鼩鼩皮层和海马ASIC2a与SGK1蛋白表达及活化的消长变化具有相关性。RT-PCR结果同样显示,脑缺血使树鼩皮层及海马ASIC2a、SGK1mRNA表达一过性增强；实施缺血后适应处理后ASIC2a、SGK1mRNA表达水平更高、持续时间更长。通过脑立体定位系统在树鼩海马内注射SGK1特异性抑制剂GSK-650394后,结果显示,GSK-650394组与溶剂对照DMSO组、缺血后适应组的同期值相比,叁种处理方法对缺血区rCBF变化、皮层梗死面积、海马神经元密度的影响无显着性差异；但GSK-650394组海马缺血微环境中Na+的降低却更为显着(与DMSO组相比,P<0.05)；脑水含量测定也显示,GSK-650394组降低缺血皮层及患侧海马脑水含量的效果不及DMSO组和缺血后适应组明显。免疫组化结果显示GSK-650394对皮层及海马内ASIC2a的表达有一定的抑制作用,ASIC2a阳性细胞数量减少,染色变浅；而Western blot及RT-PCR分析则显示,GSK-650394组ASIC2a蛋白及mRNA的表达量与DMSO组及后适应组相比略有降低,但尚未具有统计学差异。[结论]①缺血后适应处理可减小皮层梗死面积、增加海马存活神经元密度、缓解皮层及海马细胞超微结构的损伤,具有明显的脑保护作用。②缺血中心区扩布所导致的神经元微环境紊乱是海马细胞继发性损伤的重要原因；缺血后适应可通过增加rCBF、缓解海马离子微环境紊乱、减轻脑水肿等机制发挥脑保护效应。③脑缺血可诱导ASIC2a及SGK1表达及活化一过性增加；缺血后适应处理则可能更合理地激活ASIC2a及SGK1的表达及活化水平,从而强化机体的内源性损伤防御机制,起到改善缺血微环境离子稳态性,保护易受损神经元的作用。④在脑缺血及缺血后适应过程中,ASIC2a与SGK1蛋白表达及活化的消长变化具有相关性,阻断SGK1后并未完全阻断缺血后适应诱导的脑保护作用,提示,缺血后适应内源性神经保护效应机制复杂,可能是不同水平、多种细胞信息分子综合调控的结果。(本文来源于《昆明医科大学》期刊2016-05-01）
王小琴[7]（2016）在《脑缺血预处理对大鼠脑微环境的影响》一文中研究指出脑血管病(cerebrovascular diseases,CVD)尤其是缺血性脑血管病作为一种严重威胁人类健康的常见病,它具有“四高一多”(发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高,并发症多)的特点,已成为世界叁大致死疾病之一。脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning,CIP)它是指短暂的、亚致死性的缺血诱导脑组织产生内源性保护机制,可以提高脑组织对缺血的耐受性。这种脑缺血预处理诱导脑组织对后续致死性脑缺血产生迟发性的抵抗能力的现象称为脑缺血耐受(cerebral ischemic tolerance,CIT)。自从1990年,Kitagawa等人[1]发现这一现象后迅速成为全球生命科学界研究的新热点和重点,同时也取得了令人瞩目的成果。大量实验结果表明CIP可以诱导大脑内源性神经保护作用,但其具体发生机制远远未探明。为此本研究以CIP后微环境中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)、SOD、MDA、NO、NOS、TNF-α、IL-6变化作为研究的重点,进一步探讨其诱导内源性神经保护的机制。一旦将这些变化机制研究透彻,可能不仅会为缺血缺氧性脑病临床防治提供行之有效的策略,而且将会为药物、化学、物理、生物等方法进行预处理提供充分理论依据。将120只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组,假手术组,CIP组,每组40只,各组又分别分为1,3,6,12,24h 5个亚组。采用双侧颈总动脉夹闭法制作SD大鼠缺血预处理模型。各组大鼠脑缺血预处理10min后,分别在1,3,6,12,24h相应的时间点断头取脑,HE染色后光镜下观察脑组织病理变化,采用高效液相色谱法测定各组大鼠脑组织中Glu,Asp,Gly,GABA的含量,分光光度计法测定SOD、NOS活性和MDA、NO含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定TNF-α和IL-6含量。在大鼠脑组织中正常组与假手术组比较各指标均无统计学差异(P>0.05);与假手术组相比CIP组:Glu、Asp、GABA、Gly含量1h时显着增高(P<0.05),其中Glu、Asp在3h降至正常水平,GABA、Gly3h时达到高峰,随后逐渐降低,6h时恢复到基础水平;SOD活性1h时显着降低(P<0.05),随后呈升高趋势,3h升高至基础水平,24h时达到高峰(P<0.01),MDA含量1h显着升高(P<0.05),随后逐渐降低6h降至基础水平,12h低于基础水平(P<0.05)直到24h降至最低;NO含量6h时显着升高(P<0.05),12h达高峰,24h时降至基础水平,NOS含量3h开始升高(P<0.05),随后呈逐渐升高趋势,12h达高峰,24h时降至基础水平;TNF-α含量1h开始升高,6h达高峰,随后呈降低趋势,24h仍高于假手术组(P<0.05),IL-6含量3h开始升高(P<0.05),随后呈逐渐升高趋势,24h达高峰。上述结果提示,兴奋性氨基酸(external carotid artery,EAA)尤其是Glu、Asp升高的最早,持续时间最短,它们可能是内源性神经保护机制的启动因素,首先启动了快速相,引起了相关因子如SOD、NO、NOS等的变化,而炎症因子较其达峰时间较晚,持续时间较长,可认为与后期迟发相的保护作用相关。所有因子在CIP诱导的内源性神经保护机制中不是相互独立的,而是相互影响共同诱导CIT。(本文来源于《河北北方学院》期刊2016-03-01）
郭勇英,高怀林[8]（2015）在《通心络对糖尿病足大鼠缺血下肢移植外周血间充质干细胞的微环境影响》一文中研究指出目的:探讨通心络超微粉能否改善糖尿病足大鼠缺血下肢微环境,从而促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果。方法:将140只雄性Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组,通心络组,西洛他唑组,干细胞组,通心络联合干细胞组,西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28天后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,采用放免法测定IL-1、IL-6和TNF-α;取腓肠肌行冰冻切片荧光显微镜观察新生血管,采用Western blot法检测大鼠缺血肢肌组织ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量。结果:(1)荧光显微镜观察结果显示:通心络联合干细胞组干细胞数和积分光密度多于干细胞组和西洛他唑联合干细胞组组(P<0.01)。(2)结果显示:与对照组比较,模型组IL-1、IL-6、TNF-α、ICAM-1和VCAM-1表达显着升高高(P<0.01)。与模型组比较,通心络组和通心络联合干细胞组IL-1、IL-6、TNF-α、ICAM-1和VCAM-1表达显着降低(P<0.01)。结论:通心络通过降低糖尿病足大鼠缺血下肢肌组织的炎症水平,改善干细胞移植的微环境,提高外周血间充质干细胞局部肌肉移植后血管新生。(本文来源于《2015年糖尿病学术年会暨第十六次中医糖尿病大会论文集》期刊2015-10-23）
章翔,毛星刚,章薇[9]（2015）在《改善微环境促进脑缺血后移植神经干细胞存活治疗策略》一文中研究指出脑卒中(cerebral stroke,CS)作为常见的神经系统疾病之一,具有较高的致残和死亡率,尤其在发展中国家,它约占全球CS死亡人数的85.5%。其中缺血性脑卒中(ischemic cerebral stroke,ICS)的比例≥80%,其导致的神经功能缺损常严重地影响了患者的生活质量。本病日益增高的发生率更是给家庭和社会带来了沉重负担[1]。因此对ICS进行积极有效的防治,是神经科学工作者的责任,具有重要的社会、医(本文来源于《中华神经外科疾病研究杂志》期刊2015年04期）
张丹,李静,李玉苹,李翅翅[10]（2015）在《自噬减轻模拟缺血/再灌注微环境中肺微血管内皮细胞损伤》一文中研究指出目的:观察体外模拟缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)微环境下人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMVECs)的自噬变化,研究自噬在维持I/R条件下HPMVECs细胞存活及内皮屏障完整性中的作用。方法:用雷帕霉素(rapamycin,RAP)预处理HPMVECs,在缺糖缺氧/恢复糖和氧供(oxygen-glucose deprivation/oxygen-glucose restoration,OGD)模拟的I/R微环境中孵育细胞。应用Western blot及透射电镜法检测细胞自噬变化,用流式细胞术检测细胞凋亡,通透性小室法检测HPMVECs通透性。结果:OGD条件下HPMVECs的自噬水平明显升高,RAP预处理进一步上调了OGD条件下的细胞自噬。OGD组细胞凋亡率明显增高,细胞通透性增加。RAP预处理不仅降低了OGD引起的细胞凋亡率,而且减轻了OGD条件下细胞通透性。结论:自噬在I/R诱发的肺微血管内皮细胞损伤中发挥保护性作用,提高自噬水平有助于减少I/R条件下细胞凋亡并维持内皮屏障完整性。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年07期）
缺血微环境论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：目的：探讨通心络超微粉能否改善糖尿病足大鼠缺血下肢微环境，从而促进外周血间充质干细胞移植治疗血管新生效果?方法：方法：将140只雄性Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型，成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型，以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组，造模大鼠随机分成6组：模型组，通心络组，西洛他唑组，干细胞组，通心络联合干细胞组，西洛他唑联合干细胞组，分别给予治疗干预28天后麻醉，腹主动脉取血，离心取上清，采用放免法测定IL-1、IL-6和TNF-α；取腓肠肌行冰冻切片荧光显微镜观察新生血管，采用Western blot法检测大鼠缺血肢肌组织ICAM-1和VCAM-1蛋白表达量。结果：2.1干细胞标记及移植后观察在荧光显微镜紫外光激发下，干细胞细胞核发出蓝色荧光，表明干细胞被DAPI标记，干细胞数为(179±34)、荧光为强阳性、积分光密度(301.2±23.5)，见图1。在治疗28天荧光显微镜下观察移植后的干细胞：通心络联合干细胞组干细胞数和积分光密度多于干细胞组和西洛他唑联合干细胞组(P<0.01)，见图2、表1。2.2 HE染色普通光学显微镜观察各组大鼠缺血下肢肌组织病理变化对照组肌纤维排列稍有紊乱，肌节清晰可见，偶可见肌间质纤维化，少量炎细胞浸润，见图3 A。模型组肌纤维排列紊乱更加明显，肌间质部分纤维化，肌纤维萎缩，炎细胞浸润明显，见图3 B。各用药组肌纤维排列、肌间质纤维化及炎细胞浸润较模型组减轻，其中通心络和通心络联合干细胞减轻较明显，见图3 C-G。2.3透射电镜观察各组大鼠缺血下肢肌组织超微结构对照组：肌节、肌丝排列整齐，结构清晰，Z线、M线、A带、H带、I带清晰可见，肌原纤维间见线粒体和糖原颗粒存在，少部分线粒体双层膜结构模糊不清，肌浆网轻度扩张，肌膜完整，见图4A。模型组：部分肌丝融合、模糊、增宽，糖原堆积，肌原纤维稀疏、间隙增宽、有断裂，可见Z线增宽，部分线粒体水肿，嵴结构不清、断裂、溶解，有絮状变性，空泡变性，可见髓样化、致密化改变，外膜局部溶解、消失，内质网有扩张，核间隙增宽，见图4B。各用药组：与模型组比较，各用药组肌组织超微结构均可不同程度减轻，其中通心络和通心络联合干细胞结构病变减轻较为显着，见图4C-G。2.4各组大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α水平变化与对照组比较，模型组血清IL-1、IL-6和TNF-α水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较，干细胞组血清IL-1、IL-6和TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05)；余用药组IL-1、IL-6和TNF-α水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与干细胞组比较，通心络联合干细胞组血清IL-1、IL-6和TNF-α显著降低(P<0.01)，表2。2.5各组大鼠缺血下肢肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白变化与对照组比较，模型组ICAM-1和VCAM-1蛋白表达增加。与模型组比较，PB-MSCs肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)，余用药组肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)；各用药组组间比较肌组织中ICAM-1和VCAM-1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)，见图5。结论：糖尿病足(dibetic foot, DF)的发病机制十分复杂，至今仍在不断的深入研究，近年来随着国内外研究发现炎症反应、氧化应激及晚期糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)是血管内皮损伤的重要机制，其与DF的发生发展密切相关，叁者协同作用于血管，加速血管病变的进展。目前应用干细胞移植治疗糖尿病足，是通过其可促进缺血肢体的新生血管形成，改善和恢复肢体血流，从而达到治疗目的[8]。中医脉络学说认为，基于中医脉与西医血管，脉络与中小血管、微血管、微循环在解剖形态学上的密切相关性，提出“脉络-血管系统病”概念[9]。糖尿病足是糖尿病日久累及肢体大、中、小、微血管的一类并发症，属于中医“消渴脱疽”范畴，可见糖尿病足亦属于“脉络-血管系统病”研究的范畴。通心络是脉络学说指导下研制的中药复方制剂，具有益气活血化瘀、搜风通络止痛[10]。既往研究[11,12]发现，组织缺血缺氧、缺血/再灌注损伤时，引发大量炎性因子释放强烈的氧化应激反应等，导致缺血缺氧组织区域微环境恶劣，导致移植后的干细胞大量死亡，致使其疗效受限；并且有实验[13]研究发现，从DF大鼠中提取的间充质干细胞移植治疗DF无改善肢体缺血、血管新生的作用。如何提高干细胞移植后的疗效，是目前干细胞移植的关键问题。因此本实验探讨通心络通过改善糖尿病足大鼠缺血下肢炎症反应，进而提高干细胞移植治疗后血管新生?本实验荧光显微镜下结果显示，通心络联合干细胞组可观察到植入的干细胞数和形成新生血管数多于单纯干细胞组和西洛他唑联合干细胞组。1减轻肌组织损伤本实验HE染色结果显示DF大鼠肌组织发生明显形态学改变，肌纤维排列紊乱，部分萎缩，炎细胞浸润，透射电镜观察显示部分肌丝融合、模糊、增宽，部分线粒体肿大，嵴结构不清、断裂、溶解，有絮状变性，空泡变性，可见髓体样化、致密化改变，外膜局部溶解、消失，内质网有扩张，核间隙增宽。各用药组可不同程度减轻肌组织学改变，其中通心络组和通心络联合干细胞组肌组织学改善显着。肌组织是干细胞移植后生存环境，肌组织病变可能影响了干细胞存活，因此改善肌组织损伤，可能提高干细胞存活率。本研究结果提示，通心络可以减轻肌组织损伤，可能提高干细胞存活率。2减轻炎症反应炎症标志物作为炎症过程的重要调节因子，在糖尿病足的发生、发展中可能具有重要作用[14]。TNF-α、IL-1β是重要的炎性趋化因子，能够诱导单核细胞和中性粒细胞趋化浸润到炎症部位，两者的协同作用进一步促进IL-6的表达及释放[15],IL-6作为强有力的促炎细胞因子，能扩大炎症反应的作用[16]，从而展开以TNF-α为首的炎症级联反应，形成恶性循环[17]。同时多种炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6的产生还使ICAM-1、VCAM-1的表达增加，血管通透性增加，促进局部形成血栓[18]，进而激发炎症连锁反应[19]。ICAM-1、VCAM-1是与炎症损伤相关的血管内皮因子，均可参与调节炎症反应过程[20]，正常状态下少量表达。本实验研究结果说明DF大鼠机体存在高IL-1、IL-6及TNF-α水平，机体存在ICAM-1和VCAM-1高表达，证明DF发病过程中多种炎症因子参与机体炎症反应，增加血管通透性，影响血管新生。用药组结果说明通络药物可以减轻炎症刺激，进而改善干细胞移植后微环境的炎症反应，提高干细胞移植后血管新生。因此推测中药通心络可能通过改善干细胞移植的局部微环境，促进干细胞移植后治疗性血管新生及侧支循环建立，改善缺血下肢血流灌注量，改善缺血血供。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
缺血微环境论文参考文献
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