导读:本文包含了亚单位论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:单位,疫苗,免疫,抗原,受体,杆菌,毒素。
亚单位论文文献综述
何海,郝成武,凌晨,张飞,候凤[1](2019)在《猪多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素亚单位蛋白的制备及免疫原性研究》一文中研究指出为获得针对猪萎缩性鼻炎主要病原体——多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素的高免疫原性抗原,本试验构建、表达并验证该毒素的亚单位蛋白抗原,将猪多杀性巴氏杆菌毒素PMT基因与pMD19-T载体进行连接、转化,经序列分析鉴定后,分别使用BamHⅠ、HindⅢ与BlpⅠ限制性内切酶将其酶切为3个基因片段。将片段1(Tox1)、片段2(Tox2)和片段3(Tox3)分别亚克隆至原核表达载体pET32-b、pET32-a和pET32-b中,构建3个重组表达载体。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,分别进行SDS-PAGE与Western blotting检测,并使用小鼠与豚鼠初步研究其免疫原性。结果显示,构建的3个基因片段长度分别为776、409与410 bp,与GenBank中相关序列具有高度同源性;3个蛋白片段表达正常,表达量分别达到379.95、447.62与459.82μg/mL,SDS-PAGE验证条带分别为75、77与53 ku;因3个片段位置不同,仅Tox3有Western blotting检测条带,与理论预测相符;使用3种表达蛋白免疫小鼠与豚鼠后,二免后14 d,血清经试剂盒检测阳性率达到100%,对二免后14 d小鼠攻毒保护率达到93%。本研究成功构建了PMT的3个亚单位活性片段,且具有较好的免疫原性。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年11期)
张雪花,陆吉虎,华涛,卢宇,侯继波[2](2019)在《通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究》一文中研究指出H5亚型高致病性禽流感病毒因其变异快、感染性和致病性强等特点严重威胁着家禽业和人类健康。为研制具有广谱保护性的H5亚型禽流感病毒通用型亚单位疫苗,本研究分析和对比各分支H5亚型禽流感病毒的HA蛋白基因,获得HA蛋白基因共有序列,采用杆状病毒表达系统构建和表达重组HA蛋白。经IFA、Western Blot、微量血凝试验等方法鉴定重组HA蛋白,结果显示重组HA蛋白在昆虫细胞中得到正确表达,血凝效价达13log2,且与禽流感Re6、Re7和Re8阳性血清均具有较好的交叉反应活性。免疫效力试验结果显示,重组HA蛋白疫苗组血清抗体能与H5亚型禽流感病毒Re6、Re7和Re8检测抗原反应,且能诱导机体产生较高水平IFN-γ和IL-4。该研究结果可为H5亚型禽流感通用型亚单位疫苗研发提供试验基础和科学依据。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期)
赵凤仪,何明倩,王悦,张萌,胡诗倩[3](2019)在《人TSHR A亚单位重组腺相关病毒2/9载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建人促甲状腺素受体(TSHR)A亚单位重组腺相关病毒2/9杂合载体(rAAV2-9-hTSHR289-IRES-ZsGreen),为研究格雷夫斯病建立理想动物模型和探索基因预防提供更佳手段。方法以EcoRⅠ和BamHⅠ将腺相关病毒骨架质粒pAAV-IRES-ZsGreen和含hTSHR289的pDC315质粒双酶切,回收酶切病毒骨架质粒及目的片段进行连接,产物转化JM109感受态细菌,获取重组腺相关病毒骨架质粒pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen。经酶切电泳、测序鉴定后,将pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen、辅助质粒pHelper、包装质粒pAAV-2/9(AAV2-Rep,AAV9-Cap)采用磷酸钙法转染293AAV细胞系,获取大量rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen,经纯化后荧光显微镜下观察其包装效率,rQ-PCR法测定病毒滴度。将rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen感染HEK293细胞,ELISA法检测不同时间点hTSHR289蛋白表达水平。结果重组腺相关病毒骨架质粒pAAV-hTSHR289-IRES-ZsGreen经双酶切及测序鉴定,质粒构建正确;荧光显微镜下观察显示转染293AAV细胞72 h,病毒包装效率达92%~94%,rQ-PCR法测定的rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen病毒滴度为1×10~(13)vg/mL;ELISA法显示rAAV2/9介导的hTSHR289蛋白表达96 h明显高于72 h及48 h。结论成功构建rAAV2/9-hTSHR289-IRES-ZsGreen重组腺相关病毒载体并能有效转染和表达。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2019年06期)
李晓雯,田少江,丁洪成,章艳萍[4](2019)在《GABA_A受体α亚单位在糖尿病性神经病理性痛大鼠背根神经节中的表达》一文中研究指出目的:研究γ-氨基丁酸A型受体(GABA_A)在糖尿病致神经病理性疼痛(PDN)大鼠模型背根神经节(DRG)中的表达和功能。方法:正常健康雌性大鼠随机分为对照组(Control)和链脲佐菌素干预组(STZ),利用腹腔注射STZ的方法制备PDN模型,采集尾静脉血测量大鼠的血糖含量;应用热板实验检测热刺激缩足反射潜伏期;应用全细胞膜片钳技术检测PDN大鼠的L_4-L_6DRG神经元GABA受体介导的电流变化;应用Western Blot技术检测模型GABA_A受体α亚基表达情况。结果:与对照组相比,PDN的血糖浓度上调(P <0. 05);热刺激缩足反射潜伏期缩短(P <0. 05); DRG神经元GABA受体介导的内向电流明显减小(P <0. 01); DRG神经元GABA_A受体α亚基的表达量明显下调(P <0. 01),磷酸化的GABA_A受体α亚基表达量明显上调(P <0. 01)。结论:糖尿病致神经病理性疼痛时,GABA_A受体α亚基发生磷酸化,GABA介导的突触前抑制作用减弱。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2019年05期)
邓辉雄,喻顺,王革非[5](2019)在《基于免疫信息学的多价肠道病毒亚单位疫苗分子设计》一文中研究指出手足口病主要由EV-A71和CV-A16肠病毒引起,而近年来由CV-A10、CV-A6、CV-B3等肠道病毒引起的病例越来越多。手足口病暴发疫情日益复杂,往往伴随着多种肠道病毒的流行,对人类健康和经济造成巨大威胁。尽管目前已上市了EV-A71和CV-A16疫苗,并且一些多价肠道病毒疫苗也正在开发,但消除肠道病毒对人类生命健康的威胁仍然是一个巨大的挑战,如灭活EV-A71疫苗对其他肠道病毒的感染没有保护力。我们根据合成肽疫苗的原理,利用免疫信息学设计了一种针对EVA71、CV-A16、CV-A10、CV-A6、CVB3高效、安全的多价抗原表位疫苗。通过分析五种肠病毒株的蛋白质序列,筛选出高度保守且免疫原性强,对宿主无毒性作用的B细胞、HTL、CTL细胞抗原表位,进一步的分析确认了可以诱导IFN-γ以及IL-4非诱导型的HTL细胞抗原表位和T细胞表位相关MHC分子等位基因对应的人口覆盖率。多价肠道病毒疫苗的构建以通过合适的连接子将50s核糖体蛋白L7/L12佐剂和候选抗原表位按顺序连接,接着评估分析了构建疫苗的抗原性、过敏原性和物理学特性。对蛋白质疫苗二级结构分析及叁级结构同源建模、二硫键设计、重修和验证后分析确定了蛋白质疫苗的构象B细胞表位。与TLR4分子对接检验了配体和受体的稳定性。最后,计算机模拟克隆将疫苗的基因序列用p ET28a(+)构建表达载体以保证疫苗高效表达。本研究提供了一种经济、省时的方法来设计一种基于多价抗原表位的肠道病毒疫苗,该疫苗可以同时诱导多个级别的免疫反应,并对多种肠道病毒病原体提供保护。(本文来源于《新发与再发传染病研究论坛论文集》期刊2019-09-24)
曲航,黄宇,廖浩,裴文迪,黄琴[6](2019)在《神经精神性狼疮患者血清抗N-甲基-D-天[门]冬氨酸受体亚单位2A抗体水平及其临床意义》一文中研究指出目的探讨神经精神性狼疮(NPSLE)患者血清抗N-甲基-D-天[门]冬氨酸受体亚单位2A抗体(抗NR2A抗体)水平及其临床意义。方法将73例活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者分为NPSLE组36例和非NPSLE组37例。比较两组自身抗体及补体水平。评估NPSLE患者抗NR2A抗体水平与SLE疾病活动指数2000(SLEDAI-2000)评分、抗双链脱氧核糖核酸(dsDNA)抗体及补体水平的相关性。结果 NPSLE组患者的SLEDAI-2000评分、抗NR2A抗体及抗dsDNA抗体水平均高于非NPSLE组(均P<0.05),但认知障碍与无认知障碍NPSLE患者间抗NR2A抗体水平差异无统计学意义(P>0.05)。NPSLE组中,抗NR2A抗体水平与SLEDAI-2000评分、抗dsDNA抗体水平呈正相关,与C3、C4水平呈负相关(P<0.05)。抗核糖体P蛋白抗体(ARPPA)阳性的SLE患者抗NR2A抗体水平高于ARPPA阴性SLE患者(P<0.05)。结论抗NR2A抗体在NPSLE的发病过程中起重要作用,且与疾病活动度有关,但可能与认知障碍无关。(本文来源于《广西医学》期刊2019年17期)
刘武刚,张海雷,周绪斌,曾容愚[7](2019)在《在猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒感染猪场利用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗控制猪瘟的案例分析》一文中研究指出在某个存在多种病毒性病原混合感染的规模猪场,通过使用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗与猪瘟ST传代弱毒细胞苗进行免疫对比试验。免疫前该猪场猪瘟抗体水平比较低(平均ELISA阻断率低于40%),猪群表现为不稳定,存活率低,并且病原检测到猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型;与弱毒苗相比较,猪瘟E2亚单位疫苗免疫后,猪瘟抗体滴度显着升高,猪群成活率明显提升。临床应用结果表明E2亚单位疫苗可以突破免疫抑制的影响,在猪群存在猪蓝耳病和猪圆环病毒病等免疫抑制性疾病的情况下,仍可以稳定提高猪瘟抗体水平,提供有效保护,提升生产成绩。(本文来源于《猪业科学》期刊2019年08期)
何芳梅,任春晓,宋春霞,高惠霞,王晶晶[8](2019)在《蛋白酶体α6亚单位基因1233A/T位点多态性与脑梗死的关系》一文中研究指出目的探讨中国汉族人群中蛋白酶体α6亚单位(PSMA6)基因1233A/T(-1520C/T)位点的多态性与脑梗死的相关性。方法 2012年1月至2015年4月,选择脑梗死患者211例(病例组)和健康体检者201例(对照组),应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测PSMA6基因1233A/T位点单核苷酸多态性,并分析其基因型及等位基因频率在脑梗死患者和正常人群中的分布特点。结果两组CC、CT+TT基因型频率及C、T等位基因频率均无显着性差异(χ2<0.053, P> 0.05)。性别分层后,无论男性、女性,两组CC、CT、TT基因型频率和C等位基因频率均无显着性差异(χ2<2.735, P> 0.05)。结论 PSMA6基因1233A/T位点可能与脑梗死的发病无关。(本文来源于《中国康复理论与实践》期刊2019年08期)
李珍,余云舟[9](2019)在《E型肉毒毒素重组亚单位疫苗免疫原性研究》一文中研究指出研究背景:肉毒毒素是人类已知的生物和化学毒物中毒力最强的物质,中毒死亡率高,根据不同的血清学性质,肉毒毒素被分为A~G共7个型,其中E型肉毒毒素分子整体结构更为紧凑,能更快地进入细胞,中毒症状体现的更为迅速。近年来国内外加强了对肉毒毒素疫苗的研究,试图找到安全、有效的疫苗,其中最具研究前景的是新型重组亚单位疫苗。本研究对E型肉毒毒素各个结构功能表位抗原的免疫原性进行了研究与评价,目的是为了获得理想的功能表位抗原作为亚单位候选疫苗。目的:比较E型肉毒毒素各结构域抗原片段的免疫保护效力,试图找到能够引起显着保护作用的能表位抗原作为亚单位候选疫苗。方法:利用基因工程技术克隆了E型肉毒毒素各功能结构域的基因序列,并连接在原核表达载体pTIG-Trx上,获得了重组表达质粒,通过诱导表达条件的优化,实现了重组质粒在大肠杆菌中的高效可溶性表达,通过HisTrap~(TM) HP蛋白纯化柱纯化到了纯度较高、稳定性良好的重组抗原,并比较不同抗原片段的免疫保护效力。结果:本研究利用基因工程技术制备了E型肉毒毒素各结构域的抗原片段蛋白,并对各重组亚单位疫苗的免疫保护效力进行了探究,结果表明BoNT/E各功能结构域抗原中,Hc和HN-L抗原片段具有很好的免疫原性和免疫保护作用,Hc-C、HN、L抗原片段具有部分免疫保护作用,Hc-N无保护作用。结论:本研究制备的亚单位疫苗中Hc和HN-L具有良好的免疫原性,免疫后能刺激产生比较强的保护性免疫反应,二次免疫均能对10~4LD50的BoNT/E产生完全保护作用,基于最理想的亚单位疫苗应该是无毒的最小蛋白片段的考虑,HN-L片段较长,Hc更适合作为E型肉毒毒素的理想靶抗原进行深入研究。(本文来源于《第十四届生物毒素毒理学术大会暨第一届生物毒素——从生存适应到转化医学专题学术会议会刊》期刊2019-08-16)
宋丹,李鹏,刘翠翠,陈金顶,易琳[10](2019)在《胸膜肺炎放线杆菌Apx ⅢA、Apx ⅣA蛋白表达及重组亚单位疫苗的研究》一文中研究指出为研制以胸膜肺炎放线杆菌(APP) 4种外毒素蛋白(ApxⅠA、ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA)和外膜蛋白(OMP)为组分的亚单位疫苗,在本研究室已表达纯化的r ApxⅠA、r ApxⅡA、r OMP的基础上,本研究通过PCR扩增得到ApxⅢA、ApxⅣA基因,并分别将其克隆至表达载体p ET-32a中,测序验证后将重组质粒转化入宿主菌BL21 (DE3),经IPTG诱导表达后获得重组蛋白r ApxⅢA和r ApxⅣA。将获得的5种蛋白(rApxⅠA、r ApxⅡA、r ApxⅢA、r ApxⅣA和r OMP)按一定比例混合制备成亚单位疫苗免疫BALB/c雌鼠进行免疫效果测定,设灭活疫苗组(Ⅰ组)、弗氏佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅱ组)、白油佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅲ组)、灭活疫苗+白油佐剂乳化的亚单位疫苗组(Ⅳ组)和PBS组(Ⅴ组)。Western blot结果显示,表达了重组蛋白r ApxⅢA和r ApxⅣA且具有较好的反应原性;抗体检测结果显示,加强免疫后,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的r ApxⅠA、r ApxⅢA、r ApxⅣA和r OMP抗体水平基本一致(p>0.05),均显着高于Ⅴ组和Ⅰ组(p<0.05);攻毒保护试验结果显示,Ⅱ组与Ⅲ组保护率一致(p>0.05),显着高于Ⅴ组(p<0.05)。表明本研究中的亚单位疫苗具有一定的免疫保护效果,为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年08期)
亚单位论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
H5亚型高致病性禽流感病毒因其变异快、感染性和致病性强等特点严重威胁着家禽业和人类健康。为研制具有广谱保护性的H5亚型禽流感病毒通用型亚单位疫苗,本研究分析和对比各分支H5亚型禽流感病毒的HA蛋白基因,获得HA蛋白基因共有序列,采用杆状病毒表达系统构建和表达重组HA蛋白。经IFA、Western Blot、微量血凝试验等方法鉴定重组HA蛋白,结果显示重组HA蛋白在昆虫细胞中得到正确表达,血凝效价达13log2,且与禽流感Re6、Re7和Re8阳性血清均具有较好的交叉反应活性。免疫效力试验结果显示,重组HA蛋白疫苗组血清抗体能与H5亚型禽流感病毒Re6、Re7和Re8检测抗原反应,且能诱导机体产生较高水平IFN-γ和IL-4。该研究结果可为H5亚型禽流感通用型亚单位疫苗研发提供试验基础和科学依据。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亚单位论文参考文献
[1].何海,郝成武,凌晨,张飞,候凤.猪多杀性巴氏杆菌皮肤坏死毒素亚单位蛋白的制备及免疫原性研究[J].中国畜牧兽医.2019
[2].张雪花,陆吉虎,华涛,卢宇,侯继波.通用型H5亚型禽流感病毒亚单位疫苗抗原表达和免疫效力研究[J].病毒学报.2019
[3].赵凤仪,何明倩,王悦,张萌,胡诗倩.人TSHRA亚单位重组腺相关病毒2/9载体的构建及鉴定[J].西安交通大学学报(医学版).2019
[4].李晓雯,田少江,丁洪成,章艳萍.GABA_A受体α亚单位在糖尿病性神经病理性痛大鼠背根神经节中的表达[J].神经解剖学杂志.2019
[5].邓辉雄,喻顺,王革非.基于免疫信息学的多价肠道病毒亚单位疫苗分子设计[C].新发与再发传染病研究论坛论文集.2019
[6].曲航,黄宇,廖浩,裴文迪,黄琴.神经精神性狼疮患者血清抗N-甲基-D-天[门]冬氨酸受体亚单位2A抗体水平及其临床意义[J].广西医学.2019
[7].刘武刚,张海雷,周绪斌,曾容愚.在猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒感染猪场利用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗控制猪瘟的案例分析[J].猪业科学.2019
[8].何芳梅,任春晓,宋春霞,高惠霞,王晶晶.蛋白酶体α6亚单位基因1233A/T位点多态性与脑梗死的关系[J].中国康复理论与实践.2019
[9].李珍,余云舟.E型肉毒毒素重组亚单位疫苗免疫原性研究[C].第十四届生物毒素毒理学术大会暨第一届生物毒素——从生存适应到转化医学专题学术会议会刊.2019
[10].宋丹,李鹏,刘翠翠,陈金顶,易琳.胸膜肺炎放线杆菌ApxⅢA、ApxⅣA蛋白表达及重组亚单位疫苗的研究[J].中国预防兽医学报.2019