Halomonas sp.QHL1四氢嘧啶合成基因簇ectABC与上游调控序列的克隆及其功能分析

论文摘要

目的克隆中度嗜盐菌Halomonas sp.QHL1中的四氢嘧啶合成基因簇及上游调控序列并进行功能分析。方法通过PCR技术从Halomonas sp.QHL1中克隆获得ectABC基因簇及上游启动子序列（promoter+ectABC）,将其与表达载体pColdⅠDNA连接,转化至E.coil BL21（DE3）,用SDS-PAGE分析目的基因的异源表达、盐耐受实验检测重组菌株的耐盐能力。结果克隆得到大小为3335 bp的promoter+ectABC基因序列,并在E.coil BL21（DE3）中成功异源表达,重组菌株盐耐受能力明显提高。结论四氢嘧啶生物合成基因操纵子序列能够在E.coil BL21（DE3）中异源表达,且含有该序列的工程菌株耐盐能力显著提高。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 Halomonas sp.QHL1基因组DNA的提取
•     1.2.2 QHL1 ectABC基因簇及其上游启动子序列的克隆
•     1.2.3 重组表达载体的构建及验证
•     1.2.4 重组菌株的诱导表达与鉴定
•     1.2.5 重组菌株的盐耐受实验
• 2 结果与分析
•   2.1 ectABC基因簇及其上游启动子序列的克隆
•   2.2 重组表达质粒的构建
•   2.3 QHL1 ectABC基因簇及其上游启动子序列的异源表达
•   2.4 重组菌株E.coil BL21/pColdⅠDNA-promoter+ectABC的耐盐能力检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 石晴,朱德锐

关键词: 四氢嘧啶,基因簇,上游调控序列

来源: 中国高原医学与生物学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 青海大学医学院基础医学研究中心

基金: 国家自然科学基金项目(No.31560039),青海省科技计划项目(No.2015ZJY23,2015ZJ929Q)

分类号: Q75

DOI: 10.13452/j.cnki.jqmc.2019.01.006

页码: 30-35

总页数: 6

文件大小: 805K

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