鱼细胞系论文_杨敏,刘一萌

导读:本文包含了鱼细胞系论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞系,蛋白,核型,石斑鱼,多态性,乳酸,毒性。

鱼细胞系论文文献综述

杨敏,刘一萌^[1]（2015）在《南极鱼Ⅲ型抗冻蛋白基因在斑马鱼细胞系抗寒分子机制的研究》一文中研究指出冰冻海洋中生存的南极eelpout(Lycodichthys dearborni)体内能合成高浓度的Ⅲ型抗冻蛋白(AFPⅢ)。为了寻找新的AFPⅢ基因,构建了L.dearborni肝脏c DNA文库。通过斑点杂交筛选此文库,发现一个287 kb的c DNA克隆LD12。序列分析采用DNAssist 2.0和Clustal X 1.8软件。结果显示,LD12分子由12个串联重复的片段构成,每一个片段编码一个61个氨基酸(aa)的Ⅲ型抗冻蛋白分子和一个9aa的连接子。这是第一次在合成AFPⅢ的极地鱼类中发现这样的多聚蛋白结构基因。有趣的是,组成、结构和起源都不相同的抗冻糖蛋白AFGP,其基因也呈现类似的多聚蛋白结构的现象。因此,这种独特的多聚基因结构可能是鱼类基因组在适应极端寒。本文章从LD12 c DNA中克隆得到AFPⅢ的单体四聚体(LD4),通过转染得到斑马鱼细胞系中过表达的LD4.对LD4进行功能研究,发现LD4能够减少斑马鱼细胞在低温胁迫下的凋亡,揭示鱼类Ⅲ型抗冻蛋白的抵御低温胁迫的分子机制。(本文来源于《2015年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2015-11-05）

刘肖峰^[2]（2015）在《云纹石斑鱼细胞系的建立及初步应用研究》一文中研究指出鱼类细胞培养起始于1960年。Wolf和Quimby1960年1月启动虹鳟性腺原代培养,经历21个月连续传了48代,在1962年发表了第一个鱼类细胞系,即虹鳟性腺细胞系RTG-2。之后,鱼类细胞培养进展迅速。建立鱼类细胞系所用的材料来自于鱼的各种组织,包括胚胎、脑、眼睛、鳃、骨、肌肉、表皮、鳍条、肿瘤及内脏组织等。鱼类细胞系已应用于鱼类病毒学、毒理学、生理学、转基因、肿瘤发生、细胞骨架及DNA损伤修复等方面的研究。云纹石斑鱼(Epinephelus moara)生长速度快,肉质鲜美,价格昂贵,是中国沿海重要的养殖发展对象。然而,近年来虹彩病毒和其它病毒性疾病的爆发使得石斑鱼的工厂化养殖遭受很大的经济损失。石斑鱼可发生性别转变,雌性先性成熟然后再转换成雄性,是一种非常好的性反转模式研究动物。以云纹石斑鱼的心脏、脑与肾脏组织为材料,建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(Epinephelus moara heart cell line, EMH)、脑细胞系(Epinephelus moara brain cell line, EMB)以及肾脏细胞系(Epinephelus moara kidney cell line, EMK)。以云纹石斑鱼的脾脏与性腺组织为材料研究了其组织细胞的分离与培养。细胞系所用的培养基是在L15基本培养基中添加了HEPES,抗生素,胎牛血清(fetal bovine serum, FBS),β-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-ME)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的完全培养液。EMH细胞已传20多代,由成纤维细胞和上皮样细胞组成。EMB细胞已传60多代,主要由成纤维样细胞组成。EMK细胞已传50多代,由成纤维样细胞组成。本研究检测了温度及FBS浓度对EMH、EMB和EMK细胞生长的影响。EMH细胞在18℃℃-30℃℃之间均能正常生长,其最适生长温度为30℃C,在36℃C时不能正常生长。FBS浓度在10%～20%之间细胞均能快速生长,最适FBS浓度为15%。染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62%。EMB细胞在18℃-24℃之间,细胞的生长速度随着温度的升高而增加。但18℃生长最慢,在24℃与30℃时细胞能快速生长,其最适生长温度在24℃与30℃之间。在一定范围内,细胞的生长速度随FBS浓度的升高而明显增加,EMB细胞生长的最适FBS浓度为15%,染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为56%。EMK细胞的生长速度在18℃-24℃范围内随温度的升高而增加。18℃时细胞的生长速度较为缓慢,温度为24℃时细胞的生长速度最快,其最佳生长温度为24℃。在一定范围内,细胞的生长速度随FBS浓度的升高而明显增加,EMK细胞生长的最适FBS浓度为15%.染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为58%。用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)基因的质粒载体pEGFP-N3转入EMH、EMB与EMK细胞后,增强绿色荧光蛋白基因成功表达。EMH、EMB与EMK细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2015-05-20）

郭华荣^[3]（2001）在《海水鱼细胞系FG、SPH和RSBF的特性分析及其在典型海洋污染物毒性检测上的应用》一文中研究指出鱼类细胞培养已成为鱼类病毒学、肿瘤学、毒理学、遗传学和免疫学等研究的重要手段。本文首先从形态、蛋白质（同工酶）和DNA（RAPD分析）叁个层次水平对牙鲆鳃细胞系FG、鲈鱼心脏细胞系SPH和真鲷鳍细胞系RSBF的特性进行了分析，并分别与其所对应的原代培养组织作了比较。形态、蛋白质和DNA分析的结果表明：（1）叁株海水鱼细胞系的乳酸脱氢酶（LDH）酶谱彼此明显不同，可作为对它们进行种属鉴定和交叉污染鉴别的有效遗传标记；（2）与所对应的原代培养组织的LDH酶谱相比，细胞系FG的LDH酶谱维持不变，而细胞系SPH和RSBF的LDH酶谱变化较大；（3）与所对应的原代培养细胞的形态相比，细胞系FG的细胞形态没有明显改变，而细胞系SPH和RSBF的细胞形态则发生了明显改变；（4）60个DNA随机引物对叁株细胞系及其原代培养组织的RAPD分析表明，有35-48％的引物在细胞系及其原代培养组织之间产生完全相同的RAPD指纹，为这叁株细胞系种属来源的鉴别奠定了基础，另有27-32％的引物在细胞系及其原代培养组织之间产生不同的RAPD指纹，表明这叁株细胞系中发生了遗传变异；（5）FG、SPH和RSBF叁株细胞系与其所来源鱼类个体间的总遗传相似性指数大小为0.825-0.851，这表明了它们之间的同源性，同时为我们采用RAPD技术对其它细胞系进行种属鉴定提供了可供参考的实验数据；（6）筛选得到四个随机引物S-91、S-223、S-228和S-237，分别可以在这叁株海水鱼细胞系中扩增得到特异性的彼此明显不同的RAPD指纹，这些特异性RAPD指纹在各细胞系与其原代培养组织之间，以及在细胞系的传代培养过程中是稳定的，因而这四个引物对于这叁株细胞系的种属鉴定、交叉污染检测以及监测它们与其来源鱼类个体之间的遗传变异将非常有用。其次，170代以后的FG细胞发生了自发性肿瘤转化，具有了在细胞单层上聚集生长和堆积生长的能力，本文对转化前后细胞的形态、贴壁依赖性（软琼脂克隆形成实验）和遗传物质稳定性（RAPD分析）中国科学院海洋研究所博土学位论文进行分析的结果表明：FG细胞失去接触抑制和生长的密度抑制，获得在细胞单层上聚集生长和堆积生长能力的同时，也获得了在软琼脂中生长的能力3d 个克隆八’个接种细胞人RAPD分析表明，转化前后FG细胞的RAPD指纹发生了明显的变异。因此，FG细胞的自发性肿瘤转化也如哺乳动物细胞一样，包括一系列不断进行的细胞学和遗”传学变化，并最终导致其基因组DNA的遗传变异。最后，本文分析了聚乙烯亚胺oEI）和氯化镍在 RSBF细胞中的．细胞毒性和基因毒性，结果表明：鱼类细胞系RSBF可作为一个有效的检测水环境中污染物的细胞毒性和基因毒性效应的筛选系统；opD 分析可作为一个灵敏的非专一性的基因毒性检测终点；PEI对RSBF 细胞的高细胞毒性和基因毒性表明，我们在利用PEI作基因载体进行人类基因治疗和进行鱼类转基因实验时要格外慎重；镍及其化合物可能是导致鱼类肿瘤性疾病的原因之一。(本文来源于《中国科学院海洋研究所》期刊2001-05-01）

鱼细胞系论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

鱼类细胞培养起始于1960年。Wolf和Quimby1960年1月启动虹鳟性腺原代培养,经历21个月连续传了48代,在1962年发表了第一个鱼类细胞系,即虹鳟性腺细胞系RTG-2。之后,鱼类细胞培养进展迅速。建立鱼类细胞系所用的材料来自于鱼的各种组织,包括胚胎、脑、眼睛、鳃、骨、肌肉、表皮、鳍条、肿瘤及内脏组织等。鱼类细胞系已应用于鱼类病毒学、毒理学、生理学、转基因、肿瘤发生、细胞骨架及DNA损伤修复等方面的研究。云纹石斑鱼(Epinephelus moara)生长速度快,肉质鲜美,价格昂贵,是中国沿海重要的养殖发展对象。然而,近年来虹彩病毒和其它病毒性疾病的爆发使得石斑鱼的工厂化养殖遭受很大的经济损失。石斑鱼可发生性别转变,雌性先性成熟然后再转换成雄性,是一种非常好的性反转模式研究动物。以云纹石斑鱼的心脏、脑与肾脏组织为材料,建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(Epinephelus moara heart cell line, EMH)、脑细胞系(Epinephelus moara brain cell line, EMB)以及肾脏细胞系(Epinephelus moara kidney cell line, EMK)。以云纹石斑鱼的脾脏与性腺组织为材料研究了其组织细胞的分离与培养。细胞系所用的培养基是在L15基本培养基中添加了HEPES,抗生素,胎牛血清(fetal bovine serum, FBS),β-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-ME)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的完全培养液。EMH细胞已传20多代,由成纤维细胞和上皮样细胞组成。EMB细胞已传60多代,主要由成纤维样细胞组成。EMK细胞已传50多代,由成纤维样细胞组成。本研究检测了温度及FBS浓度对EMH、EMB和EMK细胞生长的影响。EMH细胞在18℃℃-30℃℃之间均能正常生长,其最适生长温度为30℃C,在36℃C时不能正常生长。FBS浓度在10%～20%之间细胞均能快速生长,最适FBS浓度为15%。染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62%。EMB细胞在18℃-24℃之间,细胞的生长速度随着温度的升高而增加。但18℃生长最慢,在24℃与30℃时细胞能快速生长,其最适生长温度在24℃与30℃之间。在一定范围内,细胞的生长速度随FBS浓度的升高而明显增加,EMB细胞生长的最适FBS浓度为15%,染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为56%。EMK细胞的生长速度在18℃-24℃范围内随温度的升高而增加。18℃时细胞的生长速度较为缓慢,温度为24℃时细胞的生长速度最快,其最佳生长温度为24℃。在一定范围内,细胞的生长速度随FBS浓度的升高而明显增加,EMK细胞生长的最适FBS浓度为15%.染色体分析表明具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为58%。用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)基因的质粒载体pEGFP-N3转入EMH、EMB与EMK细胞后,增强绿色荧光蛋白基因成功表达。EMH、EMB与EMK细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。