核移植论文_廖兆蒂,刘真,孙强

导读:本文包含了核移植论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胚胎,体细胞,基因,干细胞,囊胚,剑桥,供体。

核移植论文文献综述

廖兆蒂,刘真,孙强^[1]（2019）在《核移植技术的建立与发展》一文中研究指出核移植技术是指通过显微操作技术将供体细胞核转移到去核卵母细胞,进而获得重构胚胎的过程。从上世纪50年代开始到现在,核移植技术得到了广泛的发展和深入的研究,并在生命科学的多个领域发挥重要的作用。核移植技术的建立与发展可分为两个阶段:起始阶段开始于卵体积较大的两栖动物。这一阶段核移植技术主要用来研究细胞核的功能及与胞质之间相互作用。其后核移植技术在哺乳动物中的应用促进了该技术的更深入发展。相对于两栖动物,核移植技术在哺乳动物中的研究和应用也呈现更加深入、多元的特点。主要包括:不同哺乳动物物种及不同供体细胞类型的克隆研究;显微操作技术的发展和完善;重编程机制的研究及核移植效率的提高;核移植在濒危物种保护、个性化干细胞治疗及遗传修饰动物模型构建方面的应用等。该文将就这两个阶段核移植技术的发展历程进行综述并对其在非人灵长类动物模型构建中的应用进行展望。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2019年06期）

任吉龙,宋玉然,李伟,周琪,海棠^[2]（2019）在《通过集成CRISPR/Cas9、受精卵注射和核移植技术快速高效制备胰腺缺陷小型猪模型》一文中研究指出小型猪在体型大小,生理特点上与人类具有的很大的相似性,因此愈来愈多的应用于人类疾病模型及再生医学相关模型.多能性细胞的分化潜能赋予了其器官再生的能力,继大小鼠器官异种再造后人类器官在猪模型中的制备已经成为近几年的研究热点.为了得到胰腺缺陷小型猪,本研究应用CRISPR/Cas9技术,受精卵胞质注射技术联合核移植技术快速高效地获得了基因型相同的胰腺缺陷的小型猪模型,为小型猪疾病模型的制备,人类器官异体再造提供了借鉴意义.(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）

吴霄,庄站伟,马晓莉,黄思秀,李紫聪^[3]（2019）在《核移植介导的哺乳动物体细胞核重编程研究进展》一文中研究指出哺乳动物的体细胞核移植技术已经发展了20年有余,重构胚发育过程中的核重编程异常是制约这项技术应用的主要障碍。目前,提高克隆效率的方法主要是通过调节重编程过程中的表观遗传修饰来修复重编程的错误,从而提高核移植胚胎的发育效率。综述了核移植后早期胚胎发育过程中供体核重编程的异常,讨论了修复这些异常表观遗传修饰的研究进展,并对可能影响核移植胚胎发育的重编程事件及新兴技术进行展望。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年11期）

许洁^[4]（2019）在《Rapamycin对水牛成纤维细胞周期同期化以及核移植效率的影响》一文中研究指出体细胞核移植技术尽管在许多哺乳动物已获得了成功,但克隆效率偏低仍然制约着该技术的应用。供体细胞周期调控是提高核移植效率的重要途径之一,因供体和受体细胞的细胞周期协调与克隆效率关系非常密切。Rapamycin是一种mTOR(mammalian target of rapamycin,mTOR)蛋白特异性抑制剂,能阻断细胞由G1至S期的进程,将细胞周期静止在G1期。因此,本研究探讨了Rapamycin和血清饥饿对BEF细胞周期和体细胞核移植胚胎发育能力的影响,旨在寻找一种合适的供体细胞同期化方法,为提高水牛体细胞克隆效率提供理论和技术依据。首先,比较了不同浓度Rapamycin(0,0.5,1,2,4μM)处理对BEF细胞周期和活力的影响。结果发现,11μM Rapamycin处理组细胞的活力及G0/G1期的比例显着高于对照组和其他试验组(P<0.05)。比较Rapamycin处理BEF不同时间(0、48、72、96 h)对细胞周期的影响结果显示:1μM Rapamycin处理BEF 72 h和96 h细胞G0/G1期比例显着高于其他组(P<0.05)。其次,比较了Rapamycin和血清饥饿法处理对BEF细胞周期的影响。结果发现,Rapamycin同期化效率显着高于血清饥饿法(P<0.05);qPCR结果显示,Rapamycin和血清饥饿处理均能显着下调CyclinD1、Cyclin基因的表达(P<0.05),上调p27的表达水平(P<0.05),但是Rapamycin组p27的表达水平显着高于血清饥饿组(P<0.05);而且Rapamycin还显着下调了CDK2 的表达(P<0.05);Western blot结果显示,Rapamycin和血清饥饿都增加了p27蛋白的表达水平(P<0.05),降低了CyclinDl蛋白表达(P<0.05),但是Rapamycin也显着抑制了mTOR蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。接着,探究了Rapamycin和血清饥饿法处理对BEF生理特征的影响。Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡结果发现:血清饥饿组凋亡水平显着高于Rapamycin组(P<0.05);qPCR结果显示,Rapamycin显着上调了抑凋亡基因Bcl-2的表达水平(P<0.05),显着下调了促凋亡基因Casepase3、Casepase9的表达(P<0.05),而血清饥饿组显着上调了促凋亡基因Bad的表达水平(P<0.05);细胞活性氧检测发现,与Rapamycin处理组相比,血清饥饿处理显着增加了细胞ROS水平(P<0.05);对BEF细胞代谢相关基因表达的检测发现,Rapamycin处理组显着上调了代谢相关基因ACADVL、Ass、HMGCL的表达水平(P<0.05)。此外,BEF经Rapamycin处理后细胞具有正常染色体倍数的细胞比例显着高于血清饥饿组(P<0.05)。最后,比较了Rapamycin和血清饥饿处理BEF对其核移植后胚胎发育能力的影响。结果发现,BEF经Rapamycin处理用作供体细胞进行核移植,核移植胚胎的8细胞率和囊胚率显着高于血清饥饿组和对照组(P<0.05)。以上结果表明,(1)适宜浓度(1μM)的Rapamycin处理水牛耳部成纤维细胞一定时间(72 h)能够提高细胞活力和G0/G1期的比例。(2)Rapamycin处理水牛耳部成纤维细胞后G0/G1期的比例显着高于血清饥饿法,这一作用可能是因为Rapamycin通过抑制mTOR磷酸化水平影响了细胞周期相关基因的表达所致。(3)Rapamycin处理水牛耳部成纤维细胞后凋亡水平显着低于血清饥饿组,推测可能和Rapamycin降低细胞ROS水平、调控体内代谢有关。(4)Rapamycin显着提高了核移植胚胎发育能力,这一作用可能与Rapamycin提高BEF G0/G1期比例和细胞活力有关。(本文来源于《广西大学》期刊2019-06-01）

吴珊珊^[5]（2019）在《异种核移植早期胚胎线粒体发生异常机制研究》一文中研究指出异种体细胞核移植(inter-specific somatic cell nuclear transfer,iSCNT)胚胎易出现发育阻滞现象,线粒体功能异常可能是导致iSCNT合子基因组激活(Zygotic genome activation,ZGA)失败的重要原因。本研究对8-cell期牛-牛同种与羊-牛异种克隆胚胎RNA-Seq测序分析发现,在异种克隆胚胎中,与线粒体功能相关基因表达出现异常,如线粒体融合基因Mfn1和Mfn2、线粒体核糖体大亚基基因Mrpl48、线粒体外膜基因Tomm40、线粒体内膜基因Timm22和Timm23,以及线粒体促凋亡基因Caspase-2等。RT-qPCR结果显示,Mfn1、Mfn2、Timm22、Timm23、Tomm40和Mrpl48在异种克隆胚胎的表达量显着低于同种克隆胚胎,Caspase-2表达量显着高于同种克隆胚胎。同种克隆胚胎中的Tomm40、Timm22、Timm23和Mrpl48的表达量分别是异种克隆胚胎的15.38、11.01、9.38和2.61倍。蛋白免疫荧光分析发现,钠/钾离子转运蛋白ATP1B3、线粒体融合蛋白MFN1和MFN2在异种克隆胚胎的表达量显着低于同种克隆胚胎,线粒体核糖体大亚基蛋白MRPL48和线粒体外膜蛋白TOMM40没有显着差异。上述结果表明,线粒体功能异常可能是导致iSCNT胚胎在ZGA过程中发生发育阻滞的重要原因之一,线粒体融合基因Mfn1和Mfn2的异常表达,可能导致异种克隆胚胎发育阻滞。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-01）

蒋明^[6]（2019）在《MCRS1、CDX2和NANOG在体外受精和核移植牛囊胚内细胞团及滋养层细胞中的表达》一文中研究指出胎盘发育异常是目前公认的导致克隆牛体内发育失败的主要原因,而越来越多的证据表明在囊胚阶段滋养层和内细胞分化异常是引起胎盘发育异常的关键因素。哺乳动物的早期胚胎第一次细胞分化过程极其复杂,受到多种调控因子的影响,其中MCRS1、CDX2、NANOG在胚胎发育过程中起着十分重要的作用。MCRS1主要参与细胞的增殖和转化;CDX2在胚胎发育过程中的主要作用是维持胚胎生长、诱导细胞分化和器官的形成;NANOG基因对早期胚胎中胚胎干细胞的自我更新以及维持细胞多潜能性发挥着关键性的作用,其被认为是全能型或者多能性干细胞的重要标志物。截止目前,有关MCRS1、CDX2和NANOG在体外受精(In vitro fertilization,IVF)以及核移植囊胚内细胞团(ICM)和滋养层(TE)细胞的表达模式和作用的研究尚不够完善,主要原因是囊胚的内细胞团和滋养层细胞不易完全分离开来进行针对性的检测分析。本研究通过体外受精和核移植技术获得IVF和核移植囊胚,然后通过磁珠分选的方法分离纯化囊胚的ICM和TE细胞;进一步运用qRT-PCR技术研究两种囊胚的ICM和TE细胞中MCRS1、CDX2和NANOG的mRNA表达规律和差异,探讨分析MCRS1、CDX2和NANOG对牛早期胚胎发育过程中胚胎生长发育和细胞分化的影响。结果如下:1.通过磁珠分选技术将囊胚中的ICM和TE细胞进行分离,将两者以ConA-FITC和Hoescht 33342予以标记,荧光显微镜下观察区分出两种不同的细胞,即被两者都标记的为TE细胞,仅被Hoescht 33342标记的为ICM细胞。结果显示该法能有效分离两种细胞。统计学分析结果表明ICM的纯度为89.9%±1.0%,TE细胞的纯度为90.3%±1.0%,说明建立的分选方法可用于后续试验,为接下来研究ICM和TE细胞中基因表达奠定了基础。2.荧光定量PCR结果显示,在IVF囊胚中,MCRS1 mRNA和CDX2mRNA在TE细胞中的相对表达量均显着高于它们在ICM细胞的表达量;而NANOG mRNA则呈现相反的结果,其在ICM细胞中的相对表达量明显高于TE细胞。3.在核移植囊胚,荧光定量PCR结果显示,MCRS1 mRNA在TE细胞中的相对表达量显着高于ICM细胞的表达量,但显着低于IVF中的相对表达;CDX2 mRNA在TE细胞的相对表达量显着高于ICM细胞的表达量,但与IVF囊胚的无明显差异;NANOG mRNA在ICM细胞中的表达量显着高于TE细胞中的表达量,但较IVF囊胚中的相对表达量略低。结论:在奶牛胚胎发育的早期,囊胚出现胚胎发育的第一次分化,ICM和TE细胞中MCRS1、CDX2和NANOG等叁种基因呈差异性表达;MCRS1和CDX2 mRNA在IVF和核移植的囊胚中TE细胞的相对表达量均高于ICM细胞,前者在核移植囊胚中的相对表达量较IVF的低,CDX2 mRNA在两种囊胚无明显的表达差异,表明MCRS1和CDX2对牛早期胚胎发育中滋养层细胞的分裂分化起着重要作用,MCRS1对核移植胚胎发育具有重要影响。NANOG mRNA在牛IVF和核移植囊胚ICM细胞中的相对表达量均显着高于TE细胞的相对表达量,其在核移植囊胚中的相对表达量要低于IVF囊胚,提示NANOG对维持胚胎细胞的多潜能性及分裂成胚体起着关键性作用。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）

征月良^[7]（2018）在《核移植胚胎干细胞的制备、特性和应用概述》一文中研究指出从克隆胚胎中分离、培育而成的干细胞称为核移植胚胎干细胞。核移植胚胎干细胞有正常的核型,表现碱性磷酸酶活性,能分化成其他类型的细胞,对于疾病治疗研究具有重要的价值。本文概述核移植胚胎干细胞的制备、特性和应用,并讨论了人核移植胚胎干细胞的制备的伦理问题。(本文来源于《生物学教学》期刊2018年11期）

许琦敏^[8]（2018）在《干细胞治疗路很长，急不得》一文中研究指出“对于干细胞治疗，大家必须保持耐心，不能操之过急。”在昨天开幕的2018国际临床和转化医学论坛上，首次来沪的2012年诺贝尔生理学或医学奖得主、英国剑桥大学教授约翰·伯特兰·戈登在提及近年来十分火热的干细胞治疗时如是说。早在上世纪六十年代，戈登(本文来源于《文汇报》期刊2018-09-12）

秦逸人^[9]（2018）在《从蝾螈到克隆猴:核移植研究90周年记》一文中研究指出从第一例核移植动物到第一例体细胞核移植灵长类动物,核移植研究恰好迎来90周年。在这近百年的研究历程中,核移植研究不仅回答了一系列重大科学问题,且在许多方面已投入到实际应用。文章详述了核移植研究的发展历程、实际应用及其发展现状。(本文来源于《自然杂志》期刊2018年04期）

王巍,易军,唐慧,方东辉,甘佳^[10]（2018）在《牛核移植胚胎中IGF2/H19基因簇父源印记控制区甲基化模式研究》一文中研究指出为了揭示牛核移植胚胎异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈父源印记的IGF2/H19基因簇ICR区进行了BSP测序。结果表明:SCNT的父源基因在S期之前发生了主动去甲基化,伴随着DNA复制的开始,又发生了被动去甲基化。SCNT胚胎父源基因与IVF胚的甲基化重建能力相当;筛选了1个去甲基化抑制机制的易感位点,H19的转录起始点前468 bp开始的262 bp序列中的4号甲基化位点。(本文来源于《中国草食动物科学》期刊2018年04期）

核移植论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

小型猪在体型大小,生理特点上与人类具有的很大的相似性,因此愈来愈多的应用于人类疾病模型及再生医学相关模型.多能性细胞的分化潜能赋予了其器官再生的能力,继大小鼠器官异种再造后人类器官在猪模型中的制备已经成为近几年的研究热点.为了得到胰腺缺陷小型猪,本研究应用CRISPR/Cas9技术,受精卵胞质注射技术联合核移植技术快速高效地获得了基因型相同的胰腺缺陷的小型猪模型,为小型猪疾病模型的制备,人类器官异体再造提供了借鉴意义.

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

核移植论文参考文献

[1].廖兆蒂,刘真,孙强.核移植技术的建立与发展[J].中国细胞生物学学报.2019

[2].任吉龙,宋玉然,李伟,周琪,海棠.通过集成CRISPR/Cas9、受精卵注射和核移植技术快速高效制备胰腺缺陷小型猪模型[J].内蒙古大学学报(自然科学版).2019

[3].吴霄,庄站伟,马晓莉,黄思秀,李紫聪.核移植介导的哺乳动物体细胞核重编程研究进展[J].生物技术通报.2019

[4].许洁.Rapamycin对水牛成纤维细胞周期同期化以及核移植效率的影响[D].广西大学.2019

[5].吴珊珊.异种核移植早期胚胎线粒体发生异常机制研究[D].内蒙古大学.2019

[6].蒋明.MCRS1、CDX2和NANOG在体外受精和核移植牛囊胚内细胞团及滋养层细胞中的表达[D].西北农林科技大学.2019

[7].征月良.核移植胚胎干细胞的制备、特性和应用概述[J].生物学教学.2018

[8].许琦敏.干细胞治疗路很长，急不得[N].文汇报.2018

[9].秦逸人.从蝾螈到克隆猴:核移植研究90周年记[J].自然杂志.2018

[10].王巍,易军,唐慧,方东辉,甘佳.牛核移植胚胎中IGF2/H19基因簇父源印记控制区甲基化模式研究[J].中国草食动物科学.2018

论文知识图

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