拟南芥SB10基因在耐盐中的功能研究

论文摘要

为了研究拟南芥SB10基因在耐盐中的功能,我们利用CRISPR/Cas9技术构建载体敲除SB10基因,对转基因植株进行筛选成功获得SB10基因沉默的突变体材料。本研究通过观察突变体根长及萌发率等表型,测定突变体植株脯氨酸含量相关的抗逆生理指标,研究拟南芥SB10基因在耐盐中的功能。结果显示:NaCl胁迫下,sb10突变体的根长和萌发率明显高于野生型拟南芥,sb10突变体拟南芥植物体内脯氨酸含量明显高于野生型拟南芥。说明SB10基因功能的缺失可提高拟南芥植株的耐盐能力。该研究为SB10基因参与拟南芥植株耐盐中的分子作用途径及分析提供线索。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 SB10基因敲除载体构建成功
•   1.2 抗性苗筛选及SB10基因敲除转基因苗的鉴定分析
•   1.3 SB10在敲除突变体中的表达情况
•   1.4 萌发率和根长统计
•   1.5 脯氨酸含量测定
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 实验材料
•   3.2 SB10基因敲除载体构建
•     3.2.1 SB10基因敲除目标序列设计和制备
•     3.2.2 psgRNA-Cas9-SB10载体的构建
•     3.2.3 构建p CAMBIA1300-psgRNA-Cas9-SB10表达载体
•   3.3 农杆菌转化和拟南芥遗传转化
•   3.4 处理种植T0代材料筛选抗性苗
•   3.5 转基因拟南芥的检测及植物靶位点突变类型鉴定
•   3.6 半定量RT-PCR检测基因表达
•   3.7 表型统计及脯氨酸含量测定

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吕晶森,张斌,刘春林,阮颖

关键词: 拟南芥,突变体,胁迫

来源: 分子植物育种 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 湖南农业大学生物科学技术学院,湖南农业大学农学院

基金: 国家自然基金面上项目(31771838)资助

分类号: Q943.2

DOI: 10.13271/j.mpb.017.000092

页码: 92-98

总页数: 7

文件大小: 1824K

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