高效液相色谱法测定糖化血红蛋白的建立与评价

高效液相色谱法测定糖化血红蛋白的建立与评价

(北京首都国际机场医院100621)

摘要:目的分析并评价高效液相色谱法对于糖化血红蛋白进行测定的意义和价值。方法本研究的所有研究对象均选自我院在2016年3月到2017年3月接收的来我院进行健康体检的体检人群共计40例,将其设为健康对照组,同时选取同期来我院进行治疗的糖尿病患者40例设为本研究的观察组,通过糖化血红蛋白仪的高效液相色谱法进行糖化血红蛋白的测定。结果经过检测,糖化血红蛋白水平的相关系数为0.9467,线性结果表现良好,百分偏移值不超过3%,具有较好的准确度。对于不同保存时间的糖化血红蛋白的显示结果进行分析,在4℃的保存条件之下,对照组的全血标本以及糖尿病患者的全血标本在10d、30d、50d的检测结果都没有超出可以接受的范围(±3s),说明糖化血红蛋白仪对于糖化血红蛋白进行检测,需要至少稳定50日,选择观察组和对照组标本各1例,利用糖化血红蛋白仪连续测定20次,对批内精度进行计算,预测定20日,计算批间精密度,显示CV不超过5%。结论高效液相色谱法对于糖化血红蛋白进行检测的时候,其操作简单,检验迅速,具有较好的准确性,对于长期保存的标本来说,具有良好的稳定性。

关键词:高效液相色谱法;糖化血红蛋白;标本建立

现如今,我国的生活水平正在不断提升,也使得糖尿病发病率正在逐年的提高。我国的糖尿病流行病学调查报告可以得出,到了2009年时我国的15个省份对20岁以上的成年人进行糖尿病的检验,其发病率已经达到了9.7%,接近于10%。糖尿病的前期阶段发病率能够达到15.5%,这是一个非常引人注目的数据。到2013年的时候,我国糖尿病患者的人数居世界的各国首位,而且这个数字正在不断的增长,对于患者糖化血红蛋白水平进行检测,可以反映出最近两个月左右患者的血糖水平情况,能有效的帮助患者调整血糖的降糖方案。本研究基于此分析采用高效液相色谱方法对于糖化血红蛋白进行测定的效果,现将主要研究情况报道如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

本研究所有研究对象均选自我院在2016年3月到2017年3月接收的到我院进行身体检查的健康人,共计涉及到40例,设为本研究的对照组,选择同期来我院进行治疗的糖尿病患者40例社会本研究的观察组。对照组中男性18例,女性22例,最大年龄为71岁,最小年龄为21岁,平均年龄为(52.4±12.4)岁;观察组中男性19例,女性21例,最大年龄为68岁,最小年龄为22岁,平均年龄为(53.4±11.7)岁。所有研究对象通过统计学分析检验,除病情以外,P>0.05,无差异,不具有统计学意义,可比较。

1.2方法

通过选择采用血红蛋白仪器对于健康对照组和观察组的全写标准糖化血红蛋白进行检测,糖化血红蛋白的检测选择采用高效液相色谱方法进行测定。样本需要在样本仓自动进行稀释和混合,后被注入分析柱当中。色谱仓的双泵把之前设置好的递增离子浓度缓冲液输入到分析柱当中,血红蛋白通过和分析柱当中的物质的离子发生反应,进而相互作用,产生分离。分离而得的血红蛋白,随后通过流动池,通过415nm滤光片,对于各个血红蛋白成分进行测定,选择690nm的滤光片对于背景吸收进行校正。临床数据的管理软件需要每次分析过程所收集到的原始数据,并作出归纳与整理分析。通过两个水平的校准品对于糖化血红蛋白的数值进行校正和计算,并且能够自动生成1例报告,需要涉及到峰值保留的时间和色相谱。在此基础之上做好线性实验、精密度试验、准确度试验和稳定性试验。

2.结果

经过检测,糖化血红蛋白水平的相关系数为0.9467,线性结果表现良好,百分偏移值不超过3%,具有较好的准确度。对于不同保存时间的糖化血红蛋白的显示结果进行分析,在4℃的保存条件之下,对照组的全血标本以及糖尿病患者的全血标本在10d、30d、50d的检测结果都没有超出可以接受的范围(±3s),说明糖化血红蛋白仪对于糖化血红蛋白进行检测,需要至少稳定50日,选择观察组和对照组标本各1例,利用糖化血红蛋白仪连续测定20次,对批内精度进行计算,预测定20日,计算批间精密度,显示CV不超过5%。

3.讨论

长期以来糖尿病在临床上一直都是威胁着人类健康的一种严重的慢性代谢性疾病。特别是二型糖尿病及发病机制和人的胰岛素抵抗存在关联。血红蛋白的控制情况会对于糖尿病的预后和并发症产生严重的影响,有效地控制血红蛋白,能够更好地缓慢有效地控制血红蛋白,能够更好地延缓并发症的发生,控制患者病情的发展。

通过相关的调查可以得出,我国的糖尿病的血红蛋白的控制情况并不是十分的乐观,血清葡萄糖是糖尿病监测当中常用的指标,但是这种指标会受到饮食和药物等各种因素的影响,因此只能够对于患者当前的血糖情况进行反应,却无法判断患者整体的血糖情况。糖化血红蛋白是一种能够反映糖尿病患者最近三个月左右的血糖水平的指标,它具有较好的稳定性,所以在目前来说是筛选和长期进行血糖控制,并且对于患者进行疗效评估的一种有效的监测指标。

本研究分析高效液相色谱方法对于糖化血红蛋白进行检测的有效性,通过本研究的调查和分析,能够得出,高效液相色谱方法对于糖化血红蛋白测定具有较好的价值,是一种值得推广使用的方法。而且本实验当中体现出了几个方面的创新性,通过应用高效液相色谱方法对于糖化血红蛋白进行检测,具有较高的准确度,这种方法能够分离和消除异常的血红蛋白,对于不稳定的糖化血红蛋白以及氨甲酰血红蛋白对检测结果的影响予以消除。它具有良好的精度,批内CV控制位0.58%~1.18%。而且线性相对较宽,糖化血红蛋白的浓度控制在3.8~18.6mg/dl,其范围是线性的。它能够从全写当中进行自动取样,稀释样本,并且对于结果进行分析,可在很大限度上减少医务人员感染的风险,也能够降低人员因为操作而带来的误差。它能够在很大程度上进行快速的检测,每一例标本的检测时间最长为三分钟。

综上所述,高效液相色谱法对于糖化血红蛋白进行检测的时候,其操作简单,检验迅速,具有较好的准确性,对于长期保存的标本来说,具有良好的稳定性。

参考文献

[1]杨朝美,马珍.微粒色谱法和高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的相关性研究[J].检验医学与临床,2015,05(05):524-525.

[2]张海燕.探讨用高效液相色谱法与用胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的效果分析[J].当代医药论丛,2014,30(04):58-59.

[3]姜莹,肖鸽飞,赵军,陈福光,黄琳.两种不同原理的方法测定糖化血红蛋白的结果比对评估[J].检验医学与临床,2014,16(01):96-97.

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