甲氟喹联合X射线对胶质瘤细胞的杀伤作用及机制研究

论文摘要

放射治疗是是常用的胶质瘤治疗手段,但在放射治疗的过程中,由于胶质瘤细胞对X射线具有放射抵抗性,导致放射治疗效果不佳。放疗增敏剂能加强X射线的杀伤作用,增加放射治疗的效果。但放疗增敏剂存在一些缺点如:放疗增敏剂本身毒性大,不能顺利达到病灶等,因而限制了放疗增敏剂的应用。辐照损伤后的肿瘤细胞需要合成大量蛋白质来修复损伤。研究表明,甲氟喹能通过作用于80S核糖体亚基抑制蛋白质合成,且可通过线粒体途径诱导细胞凋亡;同时,甲氟喹具有能顺利到达病灶和毒性较低的优点。于是,本论文以上述几点为理论基础,研究了甲氟喹对胶质瘤细胞的放疗增敏作用。本文用细胞克隆形成实验方法评估甲氟喹对U251细胞和C6细胞的放疗增敏效果,并进一步对甲氟喹的U251细胞放疗增敏机制进行研究。采用CCK-8检测法研究甲氟喹联合X射线作用后1,3,6天后U251细胞存活率情况;并观察甲氟喹联合X射线作用后1,3,6天U251细胞的凋亡、自噬及衰老发生的水平,确定甲氟喹增敏U251细胞的细胞死亡形式;最后利用流式细胞仪检测了甲氟喹联合X射线作用后的U251细胞细胞周期、胞浆钙离子和胞浆活性氧水平,研究甲氟喹联合X射线作用后U251细胞死亡机制。本文结果显示,甲氟喹能明显降低X射线照射的胶质瘤细胞的存活分数,U251细胞的最大放疗增敏比为1.64,C6细胞的最大放疗增敏比为1.51,因而甲氟喹对胶质瘤细胞具有良好的放疗增敏效果。在死亡模式研究中,甲氟喹联合X射线作用后第一天U251细胞存活率下降并不明显,这与第一天U251细胞凋亡不明显,而保护性自噬水平升高有关;X射线联合甲氟喹作用于U251细胞第3天细胞凋亡的增加以及保护性自噬水平的下降;联合作用第六天后细胞凋亡进一步上升,但并不表现出衰老现象;因而甲氟喹放疗增敏效果主要归结于U251细胞发生细胞凋亡。甲氟喹联合X射线作用后于U251细胞凋亡的增加是由于胞浆活性氧水平升高诱导的。本论文研究甲氟喹的胶质瘤细胞放疗增敏效应,并探讨了其放疗增敏的机制,为甲氟喹放疗增敏剂的临床应用研究提供一定的理论依据。

论文目录

• 摘要
• abstract
• 注释表
• 缩略词
• 第一章 绪论
•   1.1 研究背景
•     1.1.1 胶质瘤的放射治疗现状
•     1.1.2 电离辐射作用于生物的时间效应
•     1.1.3 电离辐射诱导肿瘤细胞死亡的方式
•     1.1.4 细胞凋亡的机制
•     1.1.5 放疗增敏剂
•     1.1.6 细胞周期与与放疗敏感性
•     1.1.7 甲氟喹
•   1.2 研究意义
•   1.3 研究内容
• 第二章 材料与方法
•   2.1 实验材料与试剂
•     2.1.1 细胞系
•     2.1.2 细胞培养试剂
•     2.1.3 细胞处理试剂
•     2.1.4 细胞检测试剂
•   2.2 实验仪器
•     2.2.1 放射源及照射条件
•     2.2.2 其他仪器
•   2.3 实验方法
•     2.3.1 试剂配制
•     2.3.2 细胞复苏
•     2.3.3 细胞传代
•     2.3.4 细胞冻存
•     2.3.5 细胞计数
•     2.3.6 细胞毒性实验
•     2.3.7 克隆形成实验
•     2.3.8 细胞凋亡检测
•     2.3.9 细胞自噬检测
•     2.3.10 细胞衰老检测
•     2.3.11 细胞周期检测
•     2.3.12 细胞胞浆钙离子检测
•     2.3.13 细胞胞浆活性氧检测
•     2.3.14 统计方法
• 第三章 结果与讨论
•   3.1 甲氟喹对胶质瘤细胞放疗增敏作用的研究
•     3.1.1 甲氟喹对胶质瘤细胞的毒性作用
•     3.1.2 甲氟喹对胶质瘤细胞的放疗增敏效应
•   3.2 甲氟喹联合X射线作用后的U251 细胞死亡形式探究
•     3.2.1 甲氟喹联合X射线作用后第一天U251 细胞存活率变化及其机制
•     3.2.2 甲氟喹联合X射线作用后第三天U251 细胞存活率变化及其机制
•     3.2.3 甲氟喹联合X射线作用后第六天U251 细胞存活率变化及其机制
•   3.3 甲氟喹联合X射线诱导细胞凋亡的机制研究
•     3.3.1 甲氟喹联合X射线作用后第三天U251 细胞周期的分布
•     3.3.2 甲氟喹联合X射线作用后第三天U251 细胞胞浆钙离子水平
•     3.3.3 甲氟喹联合X射线作用后第三天U251 细胞胞浆ROS水平
• 第四章 总结与展望
•   4.1 总结
•   4.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 在学期间的研究成果及发表的学术论文

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 周倬

导师: 张晓红

关键词: 放疗增敏,甲氟喹,凋亡,自噬,活性氧,胶质瘤

来源: 南京航空航天大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 物理学,临床医学,神经病学,肿瘤学,肿瘤学,特种医学

单位: 南京航空航天大学

分类号: R739.41;R730.55;O434.1

DOI: 10.27239/d.cnki.gnhhu.2019.001624

总页数: 71

文件大小: 3967K

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