己烷雌酚免疫原的合成及其鼠源抗血清的制备

论文摘要

目的合成己烷雌酚（hexestrol,HES）免疫原,并制备其鼠源多抗血清。方法在HES的适当位点上引入活性基团羧基（-COOH）得到HES的半抗原,采用EDC/NHS法合成人工免疫原HES-BSA和检测抗原HES-OVA,经紫外扫描和SDS-PAGE鉴定HES与载体蛋白BSA、OVA是否成功偶联;用免疫原（HES-BSA）免疫3只BALB/c小鼠,获得抗HES多抗血清（polyclonal antibody serum,pAbs）,ELISA法检测其效价,间接竞争ELISA法检测其敏感性,交叉反应（cross-reactivity,CR）试验检测其特异性。结果免疫的1号小鼠pAbs效价达到1. 28×104,2号和3号小鼠均在6. 4×103以上;1号小鼠HES pAbs对HES的50%抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）为19. 93 ng/mL,除与己烯雌酚有11. 63%的CR外,与其他结构类似物无CR。结论获得了效价高及敏感、特异的多抗血清,为进一步的免疫学快速检测提供了技术支持。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要试剂及仪器
•   1.2 实验动物
•   1.3 HES免疫原的合成
•   1.4 HES免疫原的鉴定
•     1.4.1 紫外扫描
•     1.4.2 SDS-PAGE
•   1.5 抗HES多抗血清 （polyclonal antibody serum, p Abs） 的制备
•   1.6 HES p Abs的鉴定
•     1.6.1 效价检测
•     1.6.2 敏感性检测
•     1.6.3 特异性检测
• 2 结果
•   2.1 HES免疫原的鉴定
•     2.1.1 紫外扫描
•     2.1.2 SDS-PAGE
•   2.2 HES pAbs的鉴定
•     2.2.1 效价
•     2.2.2 敏感性
•     2.2.3 特异性
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨兴东,段宇莹,李琳

关键词: 己烷雌酚,免疫原,抗血清

来源: 中国生物制品学杂志 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 周口师范学院食品药品检验检测中心

基金: 河南省自然科学基金(182300410093),河南省科技攻关项目(182102310683)

分类号: TQ467

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002682

页码: 798-802

总页数: 5

文件大小: 224K

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