导读:本文包含了前体蛋白加工酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:淀粉,蛋白,阿尔,硫胺素,通道,结构,多肽。
前体蛋白加工酶论文文献综述
康绍叁[1]（2014）在《前体蛋白加工酶PACE4在前列腺癌中的表达及功能研究》一文中研究指出目的：探讨前体蛋白加工酶PACE4在前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH).前列腺上皮内瘤变(Prostate intraepithelial neoplasia,PIN)及前列腺癌(Prostate cancer,PCa)组织中的表达及其与前列腺癌临床分期、血清PSA水平、Gleason评分之间的关系；在细胞水平验证PACE4的表达与细胞增殖能力和侵袭能力的关系,预测分析PACE4的干扰niRNA,验证miR-124对前列腺癌细胞系DU145中PACE4表达调节以及细胞增值、迁徙和侵袭特性的影响,为前列腺癌的诊断、监测以及随诊提供新的可供参考的标志物,为前列腺癌的治疗提供新的靶点。方法：应用免疫组化SP法检测PACE4在72例前列腺癌、10例前列腺上皮内瘤变和40例良性前列腺增生症组织中的表达,并与前列腺癌临床分期、血清PSA水平及Gleason评分之间的关系进行统计学分析；培养前列腺癌细胞系DU-145、PC.3.LNCaP.C42和前列腺增生细胞株BPH-1,细胞计数、软琼脂克隆实验和侵袭实验验证细胞株的增殖能力和侵袭能力,应用Realtime PCR.Westernblot检测各细胞株中PACE4及相关信号分子的表达状况,应用免疫荧光染色显示各细胞中PACE4的表达。预测分析PACE4的干扰miRNA,检测PACE4高表达、低表达和不表达的DU-145.C42和BPH-1中所预测niRNA的表达,根据上述实验结果,通过与信息库比对预测miR-124直接靶向PACE4-3'UTR,利用双荧光素酶报告系统实验确定目标miRNAs,构建pMIR-Report-PACE43'UTR报告质粒和pMIR-Report-mut-PACE43'UTR报告质粒,转染293T细胞和荧光素酶报告分析系统分析结果。设计、合成miR-124的oligo片段和inhibitor片段,脂质体LipofectamineTM RNAiMAX将其转染进入DU-145、C42和BPH-1细胞内,Realtime PCR和Westernbloting检测细胞内PACE4mRNA和蛋白水平的表达。利用流式细胞仪检测DU145细胞转染miR-124以后的细胞周期变化,分析细胞增殖能力；利用Martrix胶侵袭实验检测细胞侵袭能力变化。采用免疫细胞染色检测转染miR-124后,DU-145细胞表达MUC1的变化,并将实验结果进行分析。结果：(1)PACE4在PCa.PIN及BPH中的阳性率分别为92%、80%及20%,PCa和BPH两组中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),而在PCa和PIN中的阳性表达无明显差异(P>0.05).PACE4在前列腺癌中的表达与患者临床分期.血清PSA水平、肿瘤分级(Gleason评分)密切相关(P<0.05).PACE4阳性率与肿瘤临床分期呈正相关(P<0.01),Ⅰ期和Ⅲ期、Ⅳ期之间差异有统计学意义(P<0.05);与Gleason评分呈正相关(P<0.01),随肿瘤Gleason评分的增高PACE4阳性率呈上升趋势。术前PSA水平<10ng/ml和>20ng/ml两组组间差异有统计学意义(P<0.05)。PACE4在有无骨转移两组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)培养前列腺癌细胞株DU-145、PC3、LNCaP、C42及前列腺增生细胞株BPH-1,其中DU-145细胞的增殖能力和侵袭能力最强,C42在PCa细胞株中增殖能力和侵袭能力最弱。利用Realtime PCR和Western blot检测细胞中PACE4及相关信号分子的表达,发现PACE4在DU-145中表达最高,前列腺癌细胞株中C42较少,所有细胞株中BPH-1最少,同时其关信号分子基因水平IGFBP3和THBS1表达及Furin、Seprine2、MUC、CDK6高表达,蛋白水平P53、MUC1及PTEN高表达,细胞免疫荧光显示DU145细胞中PACE4的表达也最高,以上结果提示PACE4表达水平与前列腺癌恶性程度及侵犯转移密切相关。(3)利用生物学软件预测分析PACE4的干扰miRNAs,根据预测结果选取mir-9-5p、mir-506-3p、hsa-mir-124-3p、mir-590-5p和mir-21-5p,选用明确的PACE4高表达、低表达和不表达的DU-145、C42和BPH-1通过Realtime PCR检测以上miRNAs的表达,发现miR-124、miR-21在DU-145中的表达明显低于在BPH-1中的表达,miR-124、miR-21在DU-145和BPH-1中表达存在明显差异(P<0.05)；双荧光素酶检测niRNA与PACE43'UTR的关系,并转染293T细胞,荧光素酶报告分析系统分析结果,过表达miR-124和miR-21后,报告系统的荧光值显着减少(P<0.05),提示miR-124、miR-21与PACE43'UTR存在靶向关系；将miR-124转染进入DU-145、C42和BPH-1细胞内,Realtime PCR和、Vestern blot检测细胞内PACE4mRNA和蛋白水平的表达,并检测细胞转染miR-124以后的细胞周期变化,分析细胞增殖能力及侵袭能力的变化。发现将miR-124转染DU-145细胞后,转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力减低,细胞周期阻滞,而转染了miR-124inhibitor片段C42细胞和BPH-1细胞的细胞增殖、迁移和侵袭能力升高,细胞表达MUC1水平也同时升高,而转染miR-124后DU145细胞表达MUC-1显着减少。提示miRNA可通过抑制PACE的表达使细胞的增殖和迁移能力下降,细胞的恶性都减少。结论：前列腺癌组织中PACE4高表达,并与前列腺癌的临床分期、血清PSA水平及Gleason评分有密切相关,提示PACE4可作为前列腺癌的一个有价值的诊断指标。预测分析PACE4的干扰miRNA, miR-124可直接靶向PACE4-3'UTR,将miR-124转染DU-145后细胞增殖、迁移和侵袭能力减低,细胞周期阻滞,提示miR-124可通过抑制PACE4的转录来抑制前列腺癌的增值和转移。(本文来源于《天津医科大学》期刊2014-05-01）
刘石[2]（2014）在《N端结构域对淀粉样前体蛋白加工的调控研究》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种没有有效治疗手段的神经退行性疾病,而且β淀粉样肽(beta-amyloid peptide,Aβ)通常认为与AD致病联系密切。Aβ是通过淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)经过一系列分泌酶加工产生的。然而,作为一个具有较大胞外区域的Ⅰ型跨膜蛋白,APP蛋白的N端结构域如何影响其自身的加工和Aβ的产生依旧没有清楚阐释。本实验我们主要研究了 N端结构域对APP蛋白加工的影响,通过对APP蛋白的N端结构域进行系统性删除,并且对比各结构域删除后下游产物的变化,我们初步得到了以下两个结构域可能对Aβ的产量具有极大的调控作用:分别是ACIDIC结构域和CAPPD结构域。然而产生这些变化背后的机制还需要进一步的研究分析。(本文来源于《兰州大学》期刊2014-04-01）
成佳兴[3]（2010）在《前体蛋白加工酶5在小鼠围着床期子宫中的表达研究》一文中研究指出前体蛋白加工酶5是前体蛋白加工酶(proprotein convertase,PCs)家族成员之一。大多数蛋白在合成时都是以无活性的前体形式存在的,只有通过PCs的剪切最终转变为生物活性形式。实验表明PCSK5水解的底物是一些生长因子和受体等,例如表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)和激活素(Activin A)等,已有实验证明其中的一些生长因子在小鼠着床过程中起着重要作用,推测PCSK5可能在胚胎着床中起作用,然而有关PCSK5在小鼠围着床期的表达还没明确的报道。本研究利用原位杂交方法,检测了PCSK5 mRNA在小鼠早期妊娠、假孕、延迟着床及激活、人工蜕膜化、性腺类固醇激素处理的小鼠子宫中的表达,并利用RT-PCR检测了PCSK5 mRNA在子宫基质细胞体外诱导蜕膜化中的表达。在小鼠妊娠第1-4天子宫中,检测不到PCSK5 mRNA信号,当妊娠第5天胚胎着床时,PCSK5 mRNA在胚胎着床位点处周围的基质细胞中呈很强的特异性表达。在妊娠第6-8天,PCSK5 mRNA在初级蜕膜区有高水平表达。说明PCSK可能参与胚胎的着床和基质细胞的蜕膜化过程。在假孕和延迟着床的小鼠子宫中没有检测到PCSK5 mRNA的表达,在延迟着床激活模型中PCSK5 mRNA的表达呈现类似正常妊娠第5天的特异性强表达,说明PCSK5的表达方式属于胚胎着床特异性表达,并且受活化胚泡的诱导。人工诱导蜕膜化的子宫中,PCSK5 mRNA在初级蜕膜区有高水平表达。在子宫基质细胞体外诱导蜕膜化中,PCSK5 mRNA随着细胞蜕膜化的进行而逐渐升高。PCSK5可能参与基质细胞的蜕膜化过程。(本文来源于《东北农业大学》期刊2010-04-07）
冯晓丰[4]（2009）在《前体蛋白加工酶类ADAM17及PC7与肿瘤生长相关性的初步探讨》一文中研究指出ADAMs(Disintegrin metalloproteases, ADAM)是近年来发现的一类与细胞膜结合的基质金属蛋白酶,迄今文献报道已有4 0多种ADAM s,其大部分成员都含有金属蛋白酶结构域,可加工TNF-a,所有的EGFR配体(EGF,HB-EGF等),TNF受体I和II、ErbB2、ErbB4的受体,APP等大量蛋白,在细胞外基质的降解、细胞-细胞的黏连、细胞-基质的黏连、细胞融合及信号转导等细胞活动中具有重要作用。已有的初步研究,ADAM10、17是以跨膜前体蛋白的形式定位于质膜和Glogi体的反面(trans face)膜表面,它们的激活也需要上游金属转换酶的加工。有研究显示A D A M l 0、17在一些肿瘤和组织细胞中高表达,ADAM17在神经胶质瘤细胞中有促细胞增殖作用,因此有必要研究在其它肿瘤细胞中,它是否也能发挥促细胞增殖的作用。在2008年自然杂志的一篇综述文章专门阐述了ADAM家族成员可能在肿瘤发生及转移过程中所发挥的“信号通路剪刀”的作用。而ADAM l 0,17便是其主要成员,它们可通过水解加工活化表皮生长因子,转化生长因子等一些膜蛋白的胞外区,进而可能有促进肿瘤细胞增殖的作用。真核细胞中许多具有生物活性的多肽和蛋白前体在分泌过程中需被加工激活成为成熟型的蛋白才能发挥作用。上游前体蛋白转化酶PCs(proprotein convertase)是胞浆内存在的一类具有加工功能的酶,其成员包括Furin,PC1/3, PC2, PC4, PC7/8/LPC, PACE, PC5/6等。其靶分子包括众多生长因子的受体如TGF-βR,体肝细胞生长因子HB-EGFR,PDGFR-A,PDGFR-B,胰岛素样生长因子受体等;降解ECM的酶MMP,MT-MMPs等及解整合素金属蛋白酶ADAMs,TADAMS等。另外有研究表明Furin,PC7对ADAM10有加工作用,PC7能识别ADAM10的RKKR位点,释放N-端前肽序列,促使其前体成熟,故PC7可看作ADAM10的主要激活酶。因此,我们推测Furin,PC7可能通过对VEGF-C,IGF-I等蛋白加工的直接途径或通过对ADAM10,17加工的间接途径在肿瘤发生发展过程中发挥作用。目前已在乳腺癌,卵巢癌(9)等肿瘤组织中检测到ADAM10,17, PC7的高表达,但它在各种肿瘤发生及转移过程中是否发挥作用及如何发挥作用,都有待进一步研究。因此我们拟探讨ADAM17及PC7与肿瘤细胞生长之间的关系,通过构建大鼠PC7的真核表达载体及利用已构建的ADAM17真核表达载体,瞬时转染对数生长期的肿瘤细胞;采用Western blotting检测ADAM17及PC7蛋白水平在肿瘤细胞中的表达情况; MTT法和FACS检测观察转染后对细胞生长的影响;RT-PCR检测PC7和ADAM10在基因水平上的表达。酶切和基因测序结果证实含PC7目的基因的质粒构建成功;RT-PCR结果表PC7在mRNA水平上有表达;Western blotting显示转染细胞后ADAM17, PC7得到表达;但PC7在mRNA水平对ADAM10的表达影响不大;MTT和FACS检测结果说ADAM17对Hela细胞生长有促进作用, PC7可能对MCF-7和Hela细胞生长的没有影响。(本文来源于《华中科技大学》期刊2009-05-01）
张骑鹏[5]（2008）在《硫胺素缺乏对β-淀粉样多肽前体蛋白加工和Aβ生成的作用及机制研究》一文中研究指出阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年痴呆的最常见类型,其神经病理学特征主要表现为沉积在细胞外的老年斑(Senile plaques,SPs)和细胞内聚集的神经纤维缠结(Neurofibrillary tangles,NFTs)以及区域性的神经元丧失。目前,对于AD的发病原因及其病理机制了解甚少,尚没有有效的治疗方法。β-淀粉样多肽(β-Amyloid peptide,Aβ)是SPs的主要成分,来源于β-淀粉样多肽前体蛋白(Amyloid precursor protein,APP)的蛋白剪切。大量研究表明Aβ的代谢异常可能是AD起始性的病理环节。研究Aβ的代谢对于探讨AD的发病机理较为重要。硫胺素(Thiamine)即维生素B_1,是人体必需的营养成分。硫胺素在体内主要以焦磷酸硫胺素(Thiamine pyrophosphate,TPP)的形式存在,TPP是糖代谢途径中的丙酮酸脱氢酶复合体,α-酮戊二酸脱氢酶复合体以及磷酸戊糖途径中的转酮醇的辅酶因子。硫胺素在维持脑内氧化代谢平衡方面也发挥了重要作用。硫胺素缺乏(Thiamine deficiency,TD)会导致以上叁种酶类的活性下降、叁羧酸循环发生障碍、叁磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)产生受阻。此外,硫胺素缺乏过程中产生了大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS),导致了氧化应激的发生。主要依靠糖代谢提供能量的神经组织对硫胺素缺乏高度敏感,硫胺素缺乏的中枢神经表现称为脑型维生素B_1缺乏症,也称韦尼克—科尔萨科夫综合症(Wernicke-Korsakoff's syndrome,WKS),病人除了有明显的认知丧失、记忆力减退外,晚期WKS病人出现脑室扩大,神经元死亡。其脑内的KGDHC活性也明显降低。在硫胺素缺乏动物模型上,硫胺素缺乏处理的小鼠脑内出现了神经元死亡,小胶质细胞、星型胶质细胞肥大、增生等神经退行性疾病的共同病理表现。此外,研究显示,在AD病人中,TPP含量和TPP依赖型的酶类的活性都有明显的下降,表明硫胺素缺乏可能在AD病理中起了一定的作用。但硫胺素缺乏在AD中的具体作用尚未得到系统的研究。我们在体外培养的稳定转染了瑞典型突变APP基因(APPsw)的人源神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)上和C57BL/6J小鼠上成功诱导了TD模型,并通过酶连免疫吸附实验、免疫印迹实验、免疫组织化学等技术手段系统地研究了TD对APP加工(APP processing)的影响以及其可能的机制。首先,在APPsw SH-SY5Y细胞上,TD处理5天导致了大约13.5%的细胞死亡,发生凋亡的细胞增加了2倍。MTT法检测表明TD处理5天导致细胞活力下降了大约50%。第二,酶连免疫吸附实验测定Aβ的结果显示:TD处理显着增加细胞外和细胞内的Aβ的含量。与对照组(胞外的Aβ_(40)和Aβ_(42)分别是5.52±0.12和0.66±0.23 pg/ml·mg)相比,TD5天组胞外的Aβ_(40)和Aβ_(42)分别上升到18.57±2.31和3.85±0.52pg/ml·mg;细胞内的Aβ_(40)和Aβ_(42)分别从对照组的23.4±5.1 7和7.06±1.03 pg/mg分别上升到86.03±8.19和23.52±1.02 pg/mg。第叁,免疫印迹实验显示在TD过程中,细胞中成熟形式的APP蛋白水平降低,不成熟形式的APP蛋白水平没有明显变化。说明在TD过程中APP的表达水平没有增加,应该不是导致Aβ积累的原因。第四,酶活力测定的结果表明负责APP加工的β-分泌酶的活性在TD过程中明显增高,而γ-分泌酶的活性在这一过程中没有显着性变化。前人研究结果证实β-site APP cleaving enzyme 1(BACEl)具有β-分泌酶的活性,我们分别从转录以及翻译水平研究了BACE1基因的表达情况,发现在TD处理过程中,BACE1基因的mRNA水平没有明显变化,BACE1的蛋白总量也没有明显改变。然而,与对照组相比,BACE1蛋白的成熟形式增加了大约2倍,而不成熟形式的BACE1降低了大约50%。表明β-分泌酶的活性调节不是通过增加BACE1基因的转录水平或翻译水平,而是通过促进BACE1蛋白的翻译后修饰(BACE1蛋白的成熟过程)来实现的。为了进一步确定β-分泌酶的活性在TD过程中明显增高,我们检测了TD过程中β-分泌酶产物:β-C terminalfragment(β-CTF)的变化,免疫印迹结果显示β-CTF含量在TD过程中明显增高。第五,TD处理5天后,补充硫胺素24小时明显地减弱了BACE1蛋白的成熟过程,下调β-分泌酶的活性,降低了Aβ的积累。表明补充硫胺素对TD引起的Aβ的积累具有一定的补救作用。第六,在TD处理5天时,向培养液中添加β-分泌酶抑制剂24小时可以抑制Aβ和β-CTF的积累。第七,TD增加了细胞内活性氧的积累,抗氧化剂Trolox不仅可以降低TD导致的细胞内活性氧的积累,也抑制了BACE1蛋白的成熟过程和Aβ的积累。表明氧化应激可能是TD引起Aβ积累的内在机制。最后,在TD处理过程中,添加低浓度(250pmol/L)的化学合成的Aβ到培养液里明显加剧了TD导致的氧化应激。表明Aβ的积累增强了TD引发的氧化应激。以上的离体实验结果在TD小鼠模型上得到了验证:(1)TD处理9天或更长时间会导致丘脑区域的丘脑中线旁丘脑核(Submedial thalamic nucleus,SmTN)出现明显的神经元死亡;(2)在TD小鼠丘脑区域,Aβ_(40)和Aβ_(42)含量显着增加:对照组和TD10天组的Aβ_(40)分别是0.97±0.15和3.34±0.33 pmol/g;Aβ_(42)分别是0.16±0.01和0.49±0.02 pmol/g;(3)TD处理8天后补充硫胺素可以减少丘脑区域Aβ_(42)的积累。综上,我们的实验结果表明:(1)由TD引起的氧化应激导致了APP蛋白加工过程中产生了更多的Aβ;(2)氧化应激的作用靶点是BACE1蛋白。进一步,TD对β-分泌酶的活性调节是通过促进BACE1蛋白的翻译后修饰(BACE1蛋白的成熟过程)来实现的;(3)Aβ的积累也加剧了TD导致的氧化应激。提示氧化应激和Aβ的积累之间存在着正反馈的效应。本工作发现硫胺素缺乏引起的氧化应激促进了APP加工中产生更多的Aβ,Aβ的积累反过来加剧了硫胺素缺乏导致的氧化应激。氧化应激和Aβ的积累之间存在着正反馈的效应。这一效应很可能参与了AD的发生、发展。最后,体外、体内补充硫胺素实验都表明及时补充硫胺素可以缓解硫胺素缺乏对APP加工的影响,表明对于出现硫胺素缺乏相关症状的AD病人,考虑及时补充硫胺素是有益的。(本文来源于《复旦大学》期刊2008-09-30）
王苏明[6]（2008）在《蝎毒BmBKTx1结构与功能的研究前体蛋白加工酶furin的研究》一文中研究指出本论文主要涉及叁个方面的工作。第一部分:蝎毒BmBKTx1双功能面的研究;第二部分:前体蛋白加工酶furin在胞内定位的研究;第叁部分:基于组蛋白H1.2片段的furin抑制剂的研究。1.蝎毒BmBKTx1双功能面的研究在漫长的3.5亿年的生存选择中,蝎子逐渐进化出了形形色色,功能各异的神经活性多肽,这些多肽是它们进攻与防御的主要武器,大多作用于各类Na~+和K~+通道。钾离子通道是生物体中最基础的功能蛋白之一,对钾离子有高度离子选择通透性,在生理的变化过程中起着重要的作用。目前,蝎活性多肽已经成为研究K~+通道的药理,生理,结构和功能特性的最有力的工具。BmBKTx1是从东亚马氏钳蝎中纯化到的一个新型短链毒素。它由31个氨基酸残基组成,含3对二硫键,与SK(低电导钙激活型钾通道)毒素的一级结构比较相似,但仅仅具有比较弱的SK阻断活性。实验表明BmBKTx1对高电导钙激活型钾通道(BK)有明显的抑制作用,同时它不具有对电压门控型钾通道(Kv)的抑制活力。BmBKTx1是第一个报道的能同时作用于BK和SK的蝎毒素,它具有一定的昆虫选择性,也是第一个能作用于果蝇BK通道(dSlo)的蝎毒素。BmBKTx1是第一个被确认的能够同时作用于BK通道和SK通道的蝎毒素。它有可能是通过两个不同的功能面来作用于这两个通道。为了证明这个假设,本文在大肠杆菌中重组表达了BmBKTx1的野生型和它的两个突变体,K21A-Y30A和R9A-K11A,并测定了它们对蟑螂的BK通道(pSlo)和大鼠的SK2通道的阻断活性。结果表明突变体K21A-Y30A对BK通道的阻断活性有着明显的降低,但是对SK通道的阻断活性没有变化。而突变体R9A-K11A对BK通道和SK通道的阻断活性均没有变化。这些结果证实了BmBKTx1具有双功能面的假设,并且确认了它的BK功能面位于毒素C端的β折叠上。这些结果可以促进BmBKTx1在BK通道疾病的治疗,搜寻钾通道毒素,以及杀虫剂等方面的应用开发。2.Mint3与furin相互作用调控了furin在高尔基体上的定位多肽或蛋白质以前体形式合成后,需要前体蛋白加工酶的剪切才能获得完全的生物活性。这些前体蛋白加工酶成为生物体内重要的生理病理过程的调控者。Furin是发现得最早且功能研究最为清楚的哺乳动物前体加工酶,许多重要的生理过程需要furin的参与,如多肽与蛋白质激素的合成与分泌、膜受体的成熟、血浆蛋白前体的激活等;同时多种疾病的发生也与furin密切相关,如病毒外壳蛋白和细菌外毒素的加工活化以及肿瘤的转移等。现阶段虽然对furin的细胞内定位和自身加工成熟有较多研究,但很多具体机制和细节并不清楚。因此,对furin相互作用蛋白质的鉴定和功能分析不仅具有重要的理论意义,也有利于开发抗病毒和抗细菌外毒素的先导药物。前体加工酶furin在细胞内分泌后,在质膜,内吞体和高尔基体(TGN)之间循环,主要分布于高尔基体。Mint3是Mint接头蛋白家族的成员,可以调控膜蛋白的运输和分泌。迄今为止,对于在furin的运输和定位过程中,mint3所起的作用仍然了解得很少。本文通过免疫共沉淀和免疫荧光共定位的实验,证明了mint3和furin可以相互作用,并且它们在HeLa细胞里共定位于高尔基体。通过RNA干扰的方法下调内源mint3的表达之后,furin的高尔基体定位被破坏,同时增加了其在内吞体中的分布。进一步的实验表明mint3通过PTB结构域(phosphotyrosinebinding domain)与furin相结合,并调控了furin在高尔基体上的定位。此外,对furin进行突变发现,mint3主要通过和furin的酸性多肽信号区相互作用来调节furin的分布。我们的实验结果第一次发现,mint3通过PTB结构域与furin的酸性多肽信号区相互作用调控了furin在高尔基体上的特异性定位。这些结果阐明了一条新的furin在细胞内定位和转运的途径,提供了furin相关疾病的新的药物靶点,有利于治疗学方面的发展。3.基于组蛋白H1-2片段的furin抑制剂的设计改造在哺乳动物的许多生理和病理活动中,前体加工酶furin起到了非常重要的作用,例如对病毒糖蛋白和细菌毒素的激活。寻找小分子量,无毒性,高活力的furin抑制剂是解决该类疾病的非常有吸引力的药物设计途径。本文根据furin的抑制剂histone H1.2的C端片段设计和合成了一系列的短肽抑制剂。将抑制剂的活性位点替换成为furin的最佳底物识别位点,可以极大地增强抑制剂的抑制活性。在所设计的短肽抑制剂中,抑制活力最好的是一条14肽的抑制剂,对furin的抑制常数K_j达到17nM。尽管大多数合成的短肽都是可逆性的抑制剂,但是其中的一条9肽对furin有很高的稳定性,在37℃共保温3h后仍保留有全部的抑制活力。这些短肽抑制剂可以成为新的furin介导疾病的药物设计模板。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2008-09-20）
韩锦铂[7]（2006）在《前体蛋白加工酶furin的天然抑制剂及相互作用蛋白研究》一文中研究指出多肽或蛋白质以前体形式合成后,需要前体加工酶的剪切加工才能获得完全的生物活性。Furin是发现得最早且功能研究最为清楚的哺乳动物前体加工酶,许多重要的生理过程需要furin的参与,如多肽与蛋白质激素的合成与分泌、膜受体的成熟、血浆蛋白前体的激活等;同时多种疾病的发生也与furin密切相关,如病毒外壳蛋白和细菌外毒素的加工活化以及肿瘤的转移等。尽管十几年来人们通过基因工程改造和多肽库筛选等方法得到了一些有效的furin抑制剂,但其天然抑制剂一直未曾找到;另外,虽然对furin的细胞内定位和自身加工成熟有较多研究,但很多具体机制和细节并不清楚。因此,对furin天然抑制剂的寻找和进一步改造以及对furin相互作用蛋白质的鉴定和功能分析不仅具有重要的理论意义,也有利于开发抗病毒和抗细菌外毒素的先导药物。本研究采用蛋白纯化的方法从猪肝脏组织中纯化到叁个具有强抑制活力的furin抑制剂并鉴定为组蛋白H1的C-端不同长度的片段,通过位点改造得到保持抑制活性的14肽抑制剂,为进一步面向临床的开发研究提供实验依据。同时表明组蛋白H1与furin相互作用并参与了furin体内活性的调节。此外,通过对接头蛋白mint3与furin相互作用的研究发现mint3调控了furin在高尔基体的定位;通过蛋白质组学的方法分析了furin P结构域相互作用的蛋白,并初步确定了NMMHC-A通过结合该结构域促进了furin的成熟。本论文可分为两个部分,第一部分为furin抑制剂研究,包括furin天然抑制剂的纯化及改造(第一章)和组蛋白H1参与furin体内活性调节(第二章);第二部分为furin相互作用蛋白研究,包括mint3与furin的相互作用调控了furin的高尔基体定位(第叁章)和furin的P结构域相互作用蛋白质的分析(第四章)。(本文来源于《中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）》期刊2006-12-01）
Hynan,L.S,Baskin,F,Rosenberg,R.N,张平[8]（2006）在《血小板淀粉样前体蛋白加工过程:1种阿尔茨海默病的生物标记物》一文中研究指出The amyloid precursor protein (APP) in brain is processed either by an amyloidogenic pathway by β -secretase and γ -secretase to yield Aβ (β -amyloid 4 kDa) peptide or by α -secretase within the β -amyloid domain to yield non-amyloidogenic products. We have studied blood platelet levels of a 22- kDa fragment containing the Aβ .(β -amyloid 4 kDa) peptide, β -secretase (BACE1), α -secretase (ADAM10), and APP isoform ratios of the 120- 130 kDa to 110 kDa peptides from 31 Alzheimer's disease (AD) patients and 10 age-matched healthy control subjects. We found increased levels of Aβ 4, increased activation of β -secretase (BACE1), decreased activation of α -secretase (ADAM10) and decreased APP ratios in AD patients compared to normal control subjects. These observations indicate that the blood platelet APP is processed by the same amyloidogenic and non-amyloidogenic pathways as utilized in brain and that APP processing in AD patients is altered compared to control subjects and may be a useful bio-marker for the diagnosis of AD, the progression of disease and for monitoring drug responses in clinical trials.(本文来源于《世界核心医学期刊文摘(神经病学分册)》期刊2006年05期）
前体蛋白加工酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种没有有效治疗手段的神经退行性疾病,而且β淀粉样肽(beta-amyloid peptide,Aβ)通常认为与AD致病联系密切。Aβ是通过淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)经过一系列分泌酶加工产生的。然而,作为一个具有较大胞外区域的Ⅰ型跨膜蛋白,APP蛋白的N端结构域如何影响其自身的加工和Aβ的产生依旧没有清楚阐释。本实验我们主要研究了 N端结构域对APP蛋白加工的影响,通过对APP蛋白的N端结构域进行系统性删除,并且对比各结构域删除后下游产物的变化,我们初步得到了以下两个结构域可能对Aβ的产量具有极大的调控作用:分别是ACIDIC结构域和CAPPD结构域。然而产生这些变化背后的机制还需要进一步的研究分析。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
前体蛋白加工酶论文参考文献
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