产几丁质脱乙酰酶海洋细菌的筛选鉴定及产酶条件优化

论文摘要

从海洋样品中筛选产几丁质脱乙酰酶的细菌,对高产菌株进行鉴定,并利用响应面法优化其发酵条件。结果表明,利用添加硝基乙酰苯胺的平板,根据黄色变色圈从海州湾海域海泥样品中筛选获得一株产几丁质脱乙酰酶的细菌MCDA3-3。通过形态学、生理生化特征以及16S r DNA序列分析,将该菌株鉴定为海洋硝酸盐还原菌（Nitratireductor aquimarinus）。利用单因素和响应面法优化菌株MCDA3-3发酵产酶培养基和培养条件,获得最佳发酵培养基配方为木薯淀粉1.1%,玉米浆1.0%,Fe Cl3·6H2O 0.045%,陈海水配制,p H 5.7;最佳发酵条件为接种量4%,30℃、180 r/min发酵48 h。在此条件下酶活为4.07 U/m L,是优化前的2.3倍。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 样品来源
•     1.1.2 试剂及培养基
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 产几丁质脱乙酰酶菌株的筛选
•     1.3.2 菌株MCDA3-3的鉴定
•     1.3.3 菌株MCDA3-3的16S r DNA扩增及分析
•     1.3.4 培养基成分对菌株MCDA3-3发酵产酶的影响
•     1.3.5 发酵条件对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     1.3.6 响应面法优化菌株MCDA3-3产酶条件
•     1.3.7 几丁质脱乙酰酶酶活力的测定
•     1.3.8 数据处理与分析
• 2 结果与分析
•   2.1 产几丁质脱乙酰酶菌株的筛选
•   2.2 菌株MCDA3-3的鉴定
•     2.2.1 菌株MCDA3-3的形态学特征
•     2.2.2 菌株MCDA3-3的生理生化特征
•     2.2.3 菌株MCDA3-3的16S r DNA扩增及分析
•   2.3 培养基成分对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.3.1 碳源对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.3.2 氮源对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.3.3 无机盐对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.3.4 培养基初始p H值对菌株MCDA3-3产酶的影响
•   2.4 发酵条件对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.4.1 发酵时间对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.4.2 发酵温度对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.4.3 接种量对菌株MCDA3-3产酶的影响
•     2.4.4 转速对菌株MCDA3-3产酶的影响
•   2.5 响应面法优化菌株MCDA3-3产CDA的发酵条件
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 柴金龙,王敏卜,杭加豪,张春光,陈丽,焦豫良,李宜泳,房耀维,刘姝

关键词: 几丁质脱乙酰酶,海洋细菌,响应面法,发酵条件优化

来源: 中国酿造 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 江苏海洋大学海洋生命与水产学院,江苏省海洋资源开发研究院,江苏海洋大学海洋资源与环境学院

基金: 国家自然科学基金项目(31772016),江苏省海洋科技创新专项(HY2018-10),江苏省“六大人才高峰”第十三批高层次人才项目(SWYY-195),江苏省“333高层次人才培养工程”,连云港市“521高层次人才培养工程”,江苏省大学生创新创业训练计划项目(SY20191164140100,X201911641401001)

分类号: Q93-335

页码: 89-95

总页数: 7

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