导读:本文包含了细胞内转导途径论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:柯萨奇病毒,OL细胞,OL,BDV细胞,I型IFN信号转导途径
细胞内转导途径论文文献综述
翟爱霞,颜冬梅,王海萍,卜桐,崔乐乐[1]（2019）在《CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响》一文中研究指出探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(interferon regulatory factor, IRF)7细胞定位的影响。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞0、2、4、6、12和24 h,qPCR检测I型IFN mRNA和miR-155表达水平。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,CVB感染4 h,观察IRF7细胞定位情况。CVB感染OL细胞2、4、12和24 h,IFN-αmRNA和miR-155表达水平显着增加,IFN-βmRNA表达水平在4、12和24 h显着增加;CVB感染OL/BDV细胞IFN-α和IFN-βmRNA表达水平除0 h均显着增加,但miR-155表达仅在12和24 h显着增加。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白由细胞浆转移至细胞核内。综上所述,CVB可诱导OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN、miR-155的表达,促进IRF7入核,从而激活I型IFN信号转导途径。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2019年04期）
张祥,杨洛,徐雄峰,唐凤娟,郝亚荣[2]（2019）在《松果菊苷通过p53/p38MAPK/caspase信号转导途径改善db/db小鼠心肌细胞凋亡的机制研究》一文中研究指出目的研究肉苁蓉提取物松果菊苷(Echinacoside,ECH)对糖尿病心肌病db/db小鼠模型心肌细胞是否具有保护作用及可能的作用机制。方法将29只SPF级6周龄雄性db/db小鼠和db/m小鼠适应性饲养1周后,按照随机数字表法取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)与松果菊苷干预组(db/db+ECH组,n=10)。其中db/db组和db/m组每日按照0.05 ml/10 g标准进行生理盐水灌胃2周。db/db+ECH组小鼠按松果菊苷300 mg/(kg·d)灌胃2周。每周监测叁组的小鼠体重,观察小鼠摄食、饮水及活动情况。于第10周用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖(FBG)。采用HE染色观察心肌组织病理改变,采用Tunel染色法测定心肌细胞凋亡率,采用免疫印迹(Western blot)法检测凋亡相关蛋白p53、p38MAPK、caspase-3和caspase-8的表达水平,采用real-time PCR测定心肌细胞p53、p38MAPK mRNA和caspase mRNA、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平。结果与db/m组相比,db/db组小鼠的体重、血糖和血脂水平显着升高(P<0.05或P<0.01)。HE染色切片显示,与db/m组比较,db/db组小鼠的心肌细胞可见明显肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱;而db/db+ECH组小鼠的心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则。Tunel染色观察心肌细胞凋亡指数显示,相较于db/m组,db/db组小鼠的心肌细胞凋亡程度显着增高(P<0.01),同时伴有p53蛋白、p38MAPK蛋白、caspase-3和caspase-8蛋白表达量显着升高(P<0.01),且p53、p38MAPK m RNA和caspase mRNA、Bax mRNA表达量明显上升,Bcl-2 mRNA水平下调即Bcl-2/Bax水平降低(P<0.01)。与db/db组比较,db/db+ECH组上述指标均有明显降低,且Tunel染色观察小鼠心肌细胞凋亡指数显着下降(P<0.01)。结论松果菊苷能够明显改善db/db小鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与通过p53/p38MAPK/caspase信号转导途径有关。(本文来源于《中国当代医药》期刊2019年13期）
赵学涛[3]（2018）在《ADAMTS8通过调控ERK信号转导途径靶向抑制肝癌细胞增殖、侵袭活性研究》一文中研究指出第一部分肝癌组织中ADAMTS8表达与肝癌患者临床特征的相关性分析目的:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是消化系统最常见恶性肿瘤之一。具有血小板结合蛋白结构域的去整合素金属蛋白酶(A disintegrin and metallopeptidase with thrombospondin motifs,ADAMTS)是一种分泌型金属蛋白酶,参与调控肿瘤细胞的生长和侵袭。本研究旨在探讨ADAMTS8的表达在肝癌中的临床意义及其作为肿瘤标准物在HCC诊断治疗中的应用价值。方法:1.收集61例肝癌患者的肿瘤组织及29例相邻的非肿瘤组织,免疫组化检测ADAMTS8表达,并分析ADAMTS8的表达水平与患者性别、年龄、临床分期、是否发生转移、是否伴肝硬化、肿瘤数量、瘤组织大小、分化程度等临床特征之间的联系,从而分析ADAMTS8在肝癌中的临床意义。2.通过Western blotting技术检测肝癌患者的肿瘤组织及相邻的非肿瘤组织中ADAMTS8表达水平。结果:1.HCC组织中ADAMTS8蛋白的表达免疫组织化学分析结果显示,ADAMTS8蛋白表达主要在细胞的胞质和胞膜,细胞核不染色。ADAMTS8阳性表达在61例HCC组织中占19例,表达率为29.5%;ADAMTS8阳性表达在29例对应癌旁组织中占20例,表达率为69.7%。统计学分析表明,HCC组织中ADAMTS8蛋白的表达水平均比癌旁组织明显减低(P<0.01)。2.ADAMTS8蛋白的表达水平与肝癌患者临床病理参数的关系癌组织中ADAMTS8的表达水平与患者的临床分期及肿瘤是否发生转移均明显相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、是否伴肝硬化、肿瘤数量、瘤组织大小、分化程度均无明显相关(P>0.05)。瘤组织中ADAMTS8呈低表达的患者临床分期往往较晚,同时更易发生肿瘤转移。3.Western blotting检测肝癌组织中ADAMTS8蛋白表达Western blotting检测显示,61例HCC患者癌组织中ADAMTS8蛋白表达水平均较癌旁正常组织明显减低(P<0.05)。这表明Western blotting结果与免疫组化的检测结果是一致的。第二部分ADAMTS8抑制肝癌细胞的生物活性及其机制研究目的:探讨在体内、外环境中,ADAMTS8对HCC细胞生物学活性的影响及其相关机制,为ADAMTS8作为新靶点应用于HCC的综合治疗提供科学依据。方法:1.通过Western blotting技术检测肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2,、Lm-3及正常肝细胞株LO-2中ADAMTS8的表达水平。2.设计并体外转录合成针对人ADAMTS8基因的特异性荧光标记的ADAMTS8过表达质粒,并携带嘌呤霉素抗性筛选标记。通过脂质体(Lipofectamine TM2000)将ADAMTS8过表达质粒转染入HepG2细胞。利用Western blot检测ADAMTS8在HepG2细胞中的过表达情况。3.MTS法检测转染ADAMTS8过表达质粒后,肝癌细胞株HepG2增殖活性的变化及顺铂对该细胞株的杀伤作用。4.流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测转染ADAMTS8过表达质粒后,肝癌细胞株HepG2细胞凋亡水平的变化。5.通过Transwell小室及细胞划痕实验检测转染ADAMTS8过表达质粒后,肝癌细胞株HepG2侵袭、迁移能力的变化。6.通过Western blotting实验测定转染ADAMTS8过表达质粒后,肝癌细胞株HepG2其ERK、p-ERK、Stat3、p-Stat3、Akt、p-Akt、P53、P21蛋白表达水平的变化。结果:1.Western blotting结果显示肝癌细胞株HepG2中ADAMTS8蛋白表达缺失,而SMMC-7721、lm-3及LO-2细胞中均可检测到ADAMTS8蛋白的表达,所以在后续研究中,我们将HepG2作为研究对象。2.将ADAMTS8过表达质粒转染HepG2细胞后,转染效率为40-50%;使用0.6ug/ml的嘌呤霉素筛选后,转染效率达到90%以上。3.MTS结果显示,转染ADAMTS8后,肝癌细胞株HepG2增殖活性明显下降(P<0.05),同时顺铂对HepG2细胞的抑制作用明显增强(P<0.05)。4.FCM结果显示,转染ADAMTS8后,肝癌细胞株HepG2的凋亡水平明显增加(6.03±1.92%vs.1.91±0.98%;6.03±1.92%vs.1.83±0.95%),且差异具有统计学意义(P<0.01)。5.Transwell小室及细胞划痕实验结果显示,转染ADAMTS8后,肝癌细胞株HepG2的侵袭、迁移能力均明显减低(P<0.01)。6.Western blotting实验结果表明,转染ADAMTS8后,肝癌细胞株HepG2表达p-ERK的水平均明显下降,而表达P21和P53的水平均明显增加(P<0.05)。第叁部分ADAMTS8抑制肝癌细胞裸鼠移植瘤生长的作用研究目的:构建肝癌HepG2细胞荷瘤裸鼠模型,研究稳定转染ADAMTS8在体内环境中对肝癌细胞的抑制作用。方法:1.通过皮下注射肝癌细胞系HepG2细胞构建荷瘤裸鼠Balb-c/null动物模型,实验分为3组,对照组:裸鼠肩胛骨旁注射未转染HepG2细胞100μl;空载体组:裸鼠肩胛骨旁注射转染空载体HepG2细胞100μl;空载体组:裸鼠肩胛骨旁注射稳定转染ADAMTS8的HepG2细胞100μl。每只裸鼠均注射1×106个细胞,第28d引颈处死各组裸鼠。2.荷瘤裸鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠0.04ml进行麻醉,待动物呼吸均匀,不再活动,安静后,将裸鼠移植瘤向上侧卧放于暗箱底部。设置拍摄目标大小和高度后,进行拍摄预检,根据图像适当调整裸鼠位置,使适应镜头覆盖范围,并调整大小和高度的设置,使对焦准确,拍摄清晰。再以475nm波长激发光,进行曝光时间预检,选取合理的曝光时间为2s,最后进行活体成像拍照。以捕获移植瘤荧光发光能量值(counts per second CPS)评价移植瘤活性程度。3.肿瘤体积的测量:每周一次观察肿瘤组织的大小,使用卡尺测量肿瘤的长短径,按照公式计算肿瘤的体积,并绘制生长曲线。4.Western blot检测移植瘤p53和p-ERK的蛋白表达水平结果:1.采用体内注射的方法将转染ADAMTS8的HepG2细胞种植到裸鼠皮下,每周测量小鼠移植瘤体积,实验结果表明:稳定转染ADAMTS8的HepG2细胞增殖速度较对照组和空载体组明显下降。2.体内成像系统观察结果显示,在体内环境中,稳定转染ADAMTS8的HepG2细胞活性程度比对照组和空载体组明显下降。3.Western blotting实验结果表明,转染ADAMTS8的移植瘤组织中表达p-ERK的水平明显下降,而表达P53的水平均明显增加(P<0.05)。结论:1.肝癌组织中ADAMTS8的表达水平与肝细胞癌患者临床分期及肿瘤转移密切相关,低表达ADAMTS8的患者临床分期往往较晚,且更易发生肿瘤转移,因此肝癌组织中ADAMTS8的低表达可作为肝细胞癌患者病情进展的预测指标之一。2.过表达ADAMTS8在体外能够促进细胞凋亡,抑制细胞增殖和侵袭,同时下调ERK信号通路且上调P21和P53表达,提示ADAMTS8作为促凋亡肿瘤抑制因子通过抑制ERK通路的活性,从而抑制肝癌细胞的增殖和侵袭活性。3.在体内环境中,稳定转染ADAMTS8依然可通过抑制ERK通路和P53表达,而明显抑制HCC移植瘤的生长、侵袭活性,进一步提示了ADAMTS8具有作为新靶点应用于HCC的综合治疗的潜力。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-10-01）
潘颖,闫波,王传博,汪洪杰,王齐[4]（2018）在《IL-27通过STAT1信号转导途径诱导HepG2.2.15细胞表达MxA发挥抗病毒效应》一文中研究指出目的研究白细胞介素27(IL-27)对Hep G2. 2. 15细胞乙型肝炎病毒(HBV)复制、抗原分泌的影响及其机制。方法以(0、20、50) ng/m L IL-27处理Hep G2. 2. 15细胞,采用荧光定量PCR检测细胞上清液HBV-DNA水平,ELISA检测细胞上清液HBV表面抗原(Hbs Ag)和HBV e抗原(HBe Ag)含量;免疫细胞化学染色法检测细胞HBV核心抗原(HBc Ag)的表达和定位,Western blot法检测细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、黏病毒抗性蛋白A(MxA)的蛋白水平。结果不同剂量IL-27处理后,Hep G2. 2. 15细胞上清中HBV-DNA、HBs Ag、HBe Ag及细胞内HBc Ag含量逐渐下降;随着IL-27剂量升高,细胞内p-STAT1表达水平显着上升,而STAT1表达未见明显变化;进一步研究发现,IL-27能诱导Hep G2. 2. 15细胞表达重要抗病毒蛋白Mx A,呈剂量和时间依赖性。结论 IL-27通过激活STAT1信号途径诱导Mx A表达发挥抗HBV活性。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年06期）
张程,吴琼,黄天淼,黄煌,刘宇博[5]（2017）在《小鼠肝癌细胞中Caveolin-1通过JNK、p38、ERK信号转导途径调控pofut1表达》一文中研究指出Pofut1是0-岩藻糖基转移酶家族成员之一,它负责将岩藻糖从UDP-Fuc转移到正确折迭的EGF样重复序列的丝氨酸或苏氨酸残基上,形成O-Fucose修饰。在L02细胞中敲除pofut1后Notch1表达降低,细胞增殖和黏附能力明显下降,提示pofut1通过影响Notch信号通路在肿瘤中发挥抑癌基因样作用。窖蛋白(Caveo1in-1,Cav-1)是胞膜窖的主要结构和功能蛋白,参与调控胆固醇转运、细胞内吞、信号转导以及肿瘤的恶性行为。Cav-1可通过上调基质金属蛋白酶诱导剂CD147的N-聚糖水平,诱导基质金属蛋白酶分泌,进一步促进小鼠肝癌细胞的迁移和侵袭,在肝癌中发挥癌基因样作用。但是,Cav-1对Pofut1的调控及其作用机制,尚未见报道。本研究首先发现在Cav-1基因敲除的C57小鼠中,pofutlmRNA水平表达明显降低,提示Cav-1可能在转录水平上调控pofut1的表达。利用Western Blot、qPCR、ChIP、双荧光素酶报告基因分析方法,发现:1)在无Cav-1表达的Hepal-6细胞中过表达Cav-1后,JNK、p38、ERK信号通路活性增强,pofut 1表达升高,在有Cav-1表达的Hca-F细胞中敲低Cav-1后,JNK、p38、ERK信号通路活性降低,pofut1表达降低;2)转录因子CREB、sp1、NF1、c-Myc均可结合往pofut1启动子区发挥转录因子作用启动pofut1转录,且在Hepal-6中过表达Cav-1后转录因子转录活性增强,在Hca-F中敲低Cav-1后转录因子转录活性降低;3)征Hepal-6细胞中过表达Cav-1后分别加入JNK、ERK、p38通路抑制剂,转录因子CREB、sp1、NF1、c-Myc转录活性降低,由Cav-1表达升高引起的pofut1表达升高均被明显抑制。结果说明,在Cav-1可通过影响JNK、ERK、p38信号通路活性,影响下游转录因子CREB、sp1、NF1、c-Myc转录活性,从而调控pofut1表达。以上结果揭示了Cav-1对pofut1的调控机制,为研究肝癌的发生发展提供了新的思路和实验依据。(本文来源于《2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集》期刊2017-08-21）
季丙元[6]（2017）在《KOR与B2R异源二聚体介导的细胞内信号转导途径及其作用的研究》一文中研究指出κ型阿片受体(κ-opioid receptor,KOR)和缓激肽2型受体(bradykinin B2 receptor,B2R)都属于G蛋白偶联受体家族成员,二者及其配体强啡肽(dynorphin,DYN)和缓激肽(bradykinin,BK)广泛分布于心血管系统和中枢神经系统。目前,有关KOR和B2R两种受体相互作用的研究未见报道。本课题运用生物物理方法研究二者间的异源二聚化作用,以及形成异源二聚体后对细胞内信号转导途径的影响,探讨KOR/B2R异源二聚体在细胞内的信号转导机制及其在神经保护作用中的分子机制,为神经损伤等神经系统疾病的治疗和药物研发提供新的思路和实验依据。本课题利用pcDNA3.1-KOR和pcDNA3.1-B2R质粒建立了稳定表达KOR、B2R或KOR/B2R的HEK293细胞。pcDNA3.1-KOR和EGFP-B2R共转染HEK293细胞,进行免疫荧光染色,共聚焦扫描显微镜结果显示KOR与B2R在细胞中的分布高度一致,且主要定位于细胞膜。RT-PCR结果显示KOR和B2R均内源性表达于SH-SY5Y细胞,这些结果为下一步进行二聚体的研究奠定了基础。本研究构建了KOR-Rluc和B2R-mVenus两种重组质粒,共同或单独转染HEK293细胞。生物发光检测和荧光检测确保各组受体表达水平一致,BRET检测结果显示,KOR-Rluc与B2R-mVenus共转染组的BRET值与其它阴性对照组相比差异显着,表明KOR和B2R之间能够发生相互作用。在饱和实验中,固定供体KOR-Rluc的量不变,受体B2R-m Venus的量逐渐增加,结果显示,KOR-Rluc和B2R-mVenus共转染组的BRET值呈现双曲线形式增加,最终达到平台期,对照组pcDNA3.1-Rluc和B2R-mVenus共转染组以及mVenus和KOR-Rluc共转染组BRET值没有明显增加,是一种非特异性的线性关系。竞争性结合实验显示,随着未标记受体转染量的增加,两受体间的BRET值逐渐降低。BRET饱和实验和竞争性结合实验说明,KOR和B2R间的相互作用是特异的,而不是由受体过表达导致的分子间的随机碰撞引起的,排除了受体过表达引起的假阳性。FRET技术进一步证实了细胞中KOR和B2R间的相互作用。在共转染KOR-CFP和B2R-mVenus的细胞中,FRET信号明显强于受体单转组和阴性对照组。KOR-CFP和B2R-mVenus间的FRET现象可发生在CHO等不同类型的细胞中,表明二者的相互作用不受细胞类型的限制,没有细胞类型的偏向性。邻位连接分析技术(proximity ligation assay,PLA)更直观地证实,KOR和B2R可发生相互作用形成异源二聚体。本课题对camp、camp应答元件(campresponseelement,cre)、血清反应元件(serumresponseelement,sre)和camp应答元件结合蛋白(camp-responseelement-bindingprotein,creb)等信号分子进行了检测。与hek293-kor和hek293-b2r细胞相比,dyna(1-13)显着提高了hek293-kor/b2r细胞中camp的表达水平,而bk不能通过kor/b2r二聚体影响camp的表达。camp作为细胞内第二信使,通常是gαs蛋白下游信号中间分子,受gαs活化程度的影响。为研究二聚体和g蛋白间的偶联关系,实验采用gαs-rluc8、gαi2-rluc8或gαq-rluc8与kor-mvenus、b2r-mvenus或kor-mvenus和b2r共同转染hek293细胞,同时转染未标记的gβ1和gγ2蛋白亚基,进行bret分析。在dyna(1-13)刺激后,与单独表达kor或b2r的细胞相比,kor-mvenus和rluc8-gαs共转染组的bret信号显着增强,提示激动剂刺激后kor/b2r二聚体倾向于结合并激活gαs蛋白亚基。为检测kor和b2r二聚体对下游信号的影响,本研究运用双报告基因检测系统检测了细胞中cre和sre的活性。共转染组细胞中cre-luc的活性要显着高于kor或b2r单转染组,sre的活性显着低于kor单转染组,和对照组hek293细胞相比没有明显变化。实验显示,当激动剂dyna(1-13)刺激hek293-kor/b2r细胞时,kor和b2r间的异源二聚化作用增强了cre的活性,而cre的活性依赖于pka的激活。本实验进一步阐明了,kor/b2r异源二聚体能够和gαs结合进而增强cre的活性。通常,gpcr与gαs结合可激活腺苷酸环化酶,进而增强creb的磷酸化水平。为确定kor/b2r二聚体能否影响creb的磷酸化,在用激动剂dyna(1-13)处理后,westernblot对creb的活化水平进行了浓度依赖和时间依赖性检测。用浓度为10-7m的dyna(1-13)处理各组细胞0-60分钟,5分钟时,hek293-kor/b2r细胞中creb的活化水平有明显的增强,并随时间逐渐降低。在浓度依赖性实验中,当dyna(1-13)的浓度增强时,hek293-kor/b2r细胞中creb的磷酸化水平随着激动剂dyna(1-13)浓度的增加而逐渐增强。在sh-sy5y细胞中,creb的磷酸化水平同样表现出浓度依赖性增强。分别用pka抑制剂h89和plc抑制剂u73122对细胞进行预处理,只有hek293-kor/b2r细胞中磷酸化creb的表达要水平明显受到h89的抑制,而其它单转组未受到明显的影响。u73122未对共转染组creb的活性产生较为明显的影响。这充分说明,hek293-kor/b2r细胞中kor/b2r二聚体对creb的激活是通过gαs/camp/pka信号途径介导的,而非plc/pkc信号途径。为更有力地证实kor/b2r二聚体对creb磷酸化的影响,我们用shrna-kor或shRNA-B2R对SH-SY5Y细胞中KOR和B2R受体进行干扰。蛋白免疫印迹结果显示,KOR-shRNA和B2R-shRNA显着降低了SH-SY5Y细胞中KOR和B2R的表达,同时Dyn A(1-13)诱导的CREB的磷酸化水平明显降低。有趣的是,B2R的沉默同样降低了Dyn A(1-13)诱导的CREB磷酸化水平,这说明在SH-SY5Y细胞中,KOR和B2R是作为一个复合物发挥作用,在Dyn A(1-13)的刺激下可增强CREB磷酸化的表达。本实验通过多种方法证实,KOR和B2R能够在细胞内发生相互作用形成异源二聚体,并显着影响细胞内信号转导途径。为检测二聚体特异的信号转导对细胞功能的影响,我们利用CCK-8细胞活性分析系统对细胞增殖活性进行了分析。结果显示,Dyn A(1-13)能显着增强HEK293-KOR/B2R细胞的增殖,并呈现出剂量依赖效应,而HEK293-KOR和HEK293-B2R细胞的活性没有发生改变。如前所述,Dyn A(1-13)能显着增强人SH-SY5Y细胞中CREB的磷酸化,与此相对应,Dyn A(1-13)同样能显着促进SH-SY5Y细胞的增殖。本课题首次证明了KOR和B2R两种GPCR能组成性的相互作用形成异源二聚体,并能诱导产生新的细胞内信号转导途径。KOR/B2R异源二聚体介导的Gαs/cAMP/PKA信号通路的活化增强了CREB的磷酸化水平,促进了SH-SY5Y细胞的增殖。本研究初步阐明了KOR/B2R异源二聚体的信号转导机制及其在神经保护过程中的分子机制,为神经损伤等神经疾病的治疗和相关药物的设计提供了有价值的参考依据。(本文来源于《山东农业大学》期刊2017-05-10）
侯杰[7]（2017）在《维生素D对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞α干扰素JAK-STAT信号转导途径的影响》一文中研究指出目的研究维生素D对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞α干扰素JAK-STAT信号转导途径分子及其抗病毒蛋白表达的影响。方法选择2015年2月至2016年1月期间安徽医科大学第二附属医院感染科门63名就诊慢性乙型肝炎患者及23名健康志愿者,Ficoll密度梯度离心法分离外周血中PBMCs。以不同浓度IFN-α和VD处理PBMCs,分为空白处理、IFN-α单独处理、VD单独处理以及IFN-α+VD联合处理。Western Blot技术分析PBMCs中JAK-STAT信号途径分子(STAT1、STAT2、IRF9)及抗病毒蛋白(Mx A)的表达水平,以探究VD对慢性乙型肝炎患者PBMCs IFN-αJAK-STAT信号转导途径表达的影响。结果经不同浓度IFN-α处理后,慢性乙型肝炎患者PBMCs JAK-STAT信号转导途径分子STAT1、STAT2、IRF-9及Mx A蛋白表达显着增高,400 IU/ml IFN-α处理时,JAK-STAT信号转导途径分子表达量最高(P<0.05)。经不同浓度VD处理后,PBMCs JAK-STAT信号转导途径分子STAT1、STAT2、IRF-9及Mx A蛋白表达升高,0.1nmol/ml VD处理时,JAK-STAT信号转导途径分子表达量最高(P<0.05);与IFN-α单独处理相比,VD与IFN-α联合处理患者PBMCs后,细胞内STAT1、STAT2、IRF9及Mx A蛋白的表达量明显上升(P<0.05)。与健康人群相比,慢性乙型肝炎患者PBMCs JAK-STAT信号转导途径分子STAT1、STAT2、IRF-9及抗病毒蛋白Mx A表达明显降低(P<0.05)。结论VD与IFN-α联合作用能够显著增强慢性乙型肝炎患者PBMCs JAK-STAT信号转导途径分子STAT1、STAT2、IRF-9及抗病毒蛋白Mx A的表达,进而与IFN-α发挥协同抗病毒效应。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2017-03-01）
艾红英[8]（2016）在《鼠李糖乳杆菌肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽基因表达的影响及其信号转导途径》一文中研究指出抗菌肽是生物体天然免疫的重要成分,它们不仅具有广谱抗菌作用,还可作为细胞间免疫效应分子通过多重机制发挥免疫调节功能和抗感染作用。防御素和Cathelicidins是动物体内发现的两个主要抗菌肽家族,在维持机体抗感染方面发挥重要作用。鼠李糖乳杆菌是一种肠道益生菌,从中提取的细胞壁肽聚糖在鼠李糖乳杆菌发挥免疫调节作用特别是促进抗菌肽表达方面起重要作用。然而有关肽聚糖促进抗菌肽的表达而提高机体天然免疫和获得性免疫应答能力的调控机制仍未完全阐明。因此,本试验研究不同剂量的鼠李糖乳杆菌肽聚糖对鸡外周血单核细胞中抗菌肽β-防御素9(β-defensin 9,AvBD9)和Cathelicidin-B1(Cath-B1)基因表达的影响,并确定其最佳刺激浓度。同时,采用荧光定量PCR的方法检测肽聚糖促进抗菌肽表达对可能相关受体基因表达的影响。此外,利用特异性抗Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)抗体封闭、特异性抑制剂抑制相关分子等方法进一步探讨鼠李糖乳杆菌肽聚糖调控AvBD9、Cath-B1基因表达的可能信号转导途径。试验结果如下:(1)不同浓度的鼠李糖乳杆菌细胞壁完整肽聚糖均能不同程度的促进鸡外周血单核细胞内AvBD9、Cath-B1基因的表达。且我们发现促进AvBD9基因表达的最佳刺激浓度为200μg/ml,促进Cath-B1基因表达的最佳浓度为150μg/ml。(2)200μg/ml鼠李糖乳杆菌肽聚糖可促进鸡外周血单核细胞TLR2以及NOD样受体1(NOD1)、NALP3的表达,且NOD1的表达量极显着高于对照组(P<0.01)。(3)使用抗体封闭TLR2以及用抑制剂抑制NOD1后,与肽聚糖组相比,AvBD9和Cath-B1 mRNA的表达水平均显着下降。且用Western blot检测发现,TLR2抗体和NOD1抑制剂预处理后NF-κB p65、P38、JNK蛋白的磷酸化与非磷酸化的比值显着下降(P﹤0.05)。(4)使用NF-kB特异性抑制剂PDTC,JNK MAPK特异性抑制剂SP600125,p38 MAPK特异性抑制剂SB203580,ERK1/2 MAPK特异性抑制剂SCH772984预处理鸡外周血单核细胞后,PDTC、SB203580、SP600125均不同程度的降低鼠李糖乳杆菌肽聚糖诱导的AvBD9、Cath-B1基因的表达,且PDTC抑制AvBD9、Cath-B1基因表达的幅度显着高于SB203580、SP600125。而SCH772984预处理后,AvBD9、Cath-B1基因的表达量反而不同程度的上调了。综上所述,鼠李糖乳杆菌完整肽聚糖可促进鸡外周血单核细胞中AvBD9、Cath-B1基因的表达,且对于不同的基因肽聚糖的最佳刺激浓度不同。鼠李糖乳杆菌肽聚糖可促进细胞表面TLR2受体、胞内NOD1、NALP3受体基因的表达,这表明肽聚糖促进抗菌肽的表达可能是由TLR2或NOD1、NALP3介导。鼠李糖乳杆菌肽聚糖可通过TLR2或NOD1介导的NF-κB和MAPK信号途径上调鸡外周血单核细胞AvBD9、Cath-B1的表达而发挥益生作用,提高鸡抗感染天然免疫功能。(本文来源于《江西农业大学》期刊2016-06-01）
付芬[9]（2016）在《硒蛋白S对过氧化氢诱导的血管平滑肌细胞向成骨细胞分化及相关信号转导途径的影响》一文中研究指出血管钙化是糖尿病、动脉粥样硬化和慢性肾病中一种高度流行的病理特征,主要表现为血管壁上钙磷酸盐过量沉积,是一个复杂且高度调节的、与骨形成类似的主动过程。血管中层即血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)层钙化对于血管的钙化具有重要意义。氧化应激调控血管成骨分化的过程,促进VSMCs向成骨细胞样表型分化。硒蛋白S(SelS)作为葡萄糖调节蛋白,有着丰富的生物功能,与糖尿病及心血管疾病有关。本论文采用β-甘油磷酸钠和地塞米松培养VSMCs来建立体外血管钙化模型,并以RNA干扰技术使SelS表达降低,探索了SelS在过氧化氢(H_2O_2)诱导的VSMCs向成骨细胞分化进程中的作用及对相关信号途径的影响。我们发现,VSMCs中SelS的表达受到H_2O_2的调节,表现为其蛋白质表达水平随着H_2O_2浓度的升高而升高。SelS表达降低加剧了H_2O_2对钙化的VSMCs的氧化损伤,促进了细胞基质中钙沉积、碱性磷酸酶活性(ALP)的增长及成骨细胞特异转录因子Runx2、ALP的蛋白表达水平升高。实时荧光定量PCR(RT-PCR)结果也显示,在SelS表达降低后,Runx2和其它骨相关标记物I型胶原蛋白(Col I)和骨钙素(OC)的mRNA水平进一步升高。以丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)作为氧化应激标记,SelS表达降低提高了MDA在钙化的VSMCs中的积累,但对SOD活性无显着性影响。随后探索了SelS发挥作用的信号途径,发现在钙化的VSMCs内Akt信号途径比ERK信号途径更迅速地响应氧化应激,且SelS表达降低促进了H_2O_2诱导的ERK和Akt信号途径的激活。总而言之,本论文认为SelS在VSMCs中响应氧化应激,SelS表达降低通过激活ERK和Akt信号途径促进了氧化应激诱导的VSMCs向成骨细胞分化的进程,这些结果提示SelS可能对氧化应激诱导的血管钙化有一定程度的抑制作用。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
林思文,王丽丽,施剑明,殷明[10]（2016）在《骨髓间充质干细胞成骨分化中信号转导途径与雌激素受体的关系》一文中研究指出妇女在绝经后由于体内雌激素生成及分泌减少,骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化能力减弱,导致成骨细胞生成减少,骨骼不能对适度负荷产生足够的适应性骨重建,容易引起骨质疏松,甚至发生骨折。雌激素可以通过直接调节、旁分泌和细胞凋亡等机制作用于成骨细胞和破骨细胞而发挥作用,促进成骨细胞及抑制破骨细胞增殖,影响骨代谢,防治骨质疏松〔1〕。对于预防及治疗绝经后妇女骨质疏松,保持体内雌激素水平尤为重要〔2〕。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2016年05期）
细胞内转导途径论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究肉苁蓉提取物松果菊苷(Echinacoside,ECH)对糖尿病心肌病db/db小鼠模型心肌细胞是否具有保护作用及可能的作用机制。方法将29只SPF级6周龄雄性db/db小鼠和db/m小鼠适应性饲养1周后,按照随机数字表法取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)与松果菊苷干预组(db/db+ECH组,n=10)。其中db/db组和db/m组每日按照0.05 ml/10 g标准进行生理盐水灌胃2周。db/db+ECH组小鼠按松果菊苷300 mg/(kg·d)灌胃2周。每周监测叁组的小鼠体重,观察小鼠摄食、饮水及活动情况。于第10周用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖(FBG)。采用HE染色观察心肌组织病理改变,采用Tunel染色法测定心肌细胞凋亡率,采用免疫印迹(Western blot)法检测凋亡相关蛋白p53、p38MAPK、caspase-3和caspase-8的表达水平,采用real-time PCR测定心肌细胞p53、p38MAPK mRNA和caspase mRNA、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平。结果与db/m组相比,db/db组小鼠的体重、血糖和血脂水平显着升高(P<0.05或P<0.01)。HE染色切片显示,与db/m组比较,db/db组小鼠的心肌细胞可见明显肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱;而db/db+ECH组小鼠的心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则。Tunel染色观察心肌细胞凋亡指数显示,相较于db/m组,db/db组小鼠的心肌细胞凋亡程度显着增高(P<0.01),同时伴有p53蛋白、p38MAPK蛋白、caspase-3和caspase-8蛋白表达量显着升高(P<0.01),且p53、p38MAPK m RNA和caspase mRNA、Bax mRNA表达量明显上升,Bcl-2 mRNA水平下调即Bcl-2/Bax水平降低(P<0.01)。与db/db组比较,db/db+ECH组上述指标均有明显降低,且Tunel染色观察小鼠心肌细胞凋亡指数显着下降(P<0.01)。结论松果菊苷能够明显改善db/db小鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与通过p53/p38MAPK/caspase信号转导途径有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞内转导途径论文参考文献
[1].翟爱霞,颜冬梅,王海萍,卜桐,崔乐乐.CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响[J].微生物学杂志.2019
[2].张祥,杨洛,徐雄峰,唐凤娟,郝亚荣.松果菊苷通过p53/p38MAPK/caspase信号转导途径改善db/db小鼠心肌细胞凋亡的机制研究[J].中国当代医药.2019
[3].赵学涛.ADAMTS8通过调控ERK信号转导途径靶向抑制肝癌细胞增殖、侵袭活性研究[D].河北医科大学.2018
[4].潘颖,闫波,王传博,汪洪杰,王齐.IL-27通过STAT1信号转导途径诱导HepG2.2.15细胞表达MxA发挥抗病毒效应[J].细胞与分子免疫学杂志.2018
[5].张程,吴琼,黄天淼,黄煌,刘宇博.小鼠肝癌细胞中Caveolin-1通过JNK、p38、ERK信号转导途径调控pofut1表达[C].2017第七届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集.2017
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[8].艾红英.鼠李糖乳杆菌肽聚糖对鸡外周血单核细胞抗菌肽基因表达的影响及其信号转导途径[D].江西农业大学.2016
[9].付芬.硒蛋白S对过氧化氢诱导的血管平滑肌细胞向成骨细胞分化及相关信号转导途径的影响[D].华中科技大学.2016
[10].林思文,王丽丽,施剑明,殷明.骨髓间充质干细胞成骨分化中信号转导途径与雌激素受体的关系[J].中国老年学杂志.2016
标签：柯萨奇病毒; OL细胞; OL; BDV细胞; I型IFN信号转导途径;