不同杂交瘤细胞株单链抗体的构建及性质比较

论文摘要

不同的杂交瘤细胞株,分泌的抗黄曲霉毒素单克隆抗体的灵敏度也大不相同,通过筛选获得三株杂交瘤细胞,分别命名为2C10、2E6和2H1,其中2C10分泌的单克隆抗体在酶联免疫吸附(ELISA)试验中具有最高的灵敏度,2E6次之,2H1再次之。为了能够更好的展现和理解抗体和抗原之间的反应关系,以及最大程度的提高重组抗体的灵敏度,实验通过构建3株细胞株的单链抗体,并在E. coli BL21(DE3)中表达纯化单链抗体蛋白质,采用竞争ELISA法展现了不同的单克隆抗体与所对应的单链抗体灵敏度之间的关系。结果表明,灵敏度最好的单克隆抗体2C10所对应的单链抗体,其灵敏度也是最好的,2E6的次之,2H1的再次之。同时实验也表明,人工合成的单链抗体的灵敏度较其所对应的单克隆抗体的灵敏度要下降许多。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 引物设计与目的基因扩增
•     1.2.2 重组质粒pET-30a-pelB-scFv-2C10/2E62H1的构建和鉴定
•     1.2.3重组质粒pET-30a-pelB-scFv的表达及鉴定
•     1.2.4 抗AFB1 scFvs-2C10/2E6/2H1的性质分析
• 2 结果与分析
•   2.1 目的基因scFv-2C10/2E6/2H1扩增
•   2.2 株间氨基酸序列同源性比较
•   2.3 重组质粒pET-30a-pelB-scFv的构建及鉴定
•   2.4 重组质粒pET-30a-pelB-scFv的表达及鉴定
•   2.5 抗AFB1scFv-2C10/2E6/2H1的性质分析
• 3 结语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡莉,刘爱平,王小红

关键词: 黄曲霉毒素,单克隆抗体,单链抗体

来源: 食品与生物技术学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 黄淮学院生物与食品工程学院,四川农业大学食品学院,华中农业大学食品科技学院

基金: 国家自然科学基金项目（31271876）

分类号: Q78

页码: 70-77

总页数: 8

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