免疫酶标记论文-马骏爽,窦文超,赵广英

免疫酶标记论文-马骏爽,窦文超,赵广英

导读:本文包含了免疫酶标记论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:免疫磁性纳米微球,纳米金,氧化石墨烯,免疫传感器

免疫酶标记论文文献综述

马骏爽,窦文超,赵广英[1](2017)在《还原氧化石墨烯/纳米金非酶标记免疫传感器检测单核细胞增生李斯特氏菌》一文中研究指出为构建用于快速检测单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)的非酶标记免疫传感器,本研究以还原氧化石墨烯为基板固定的Au NPs作为电化学标记,以免疫磁性纳米微球(IMNPS)为捕获探针。以修饰单核细胞增生李斯特菌抗体(Anti-L.monocytogenes)的还原氧化石墨烯/纳米金(r GO/Au NPs)作为非酶标记物与富集L.monocytogenes的IMNPS形成夹心结构,在外加磁场的作用下将夹心结构复合物吸附在丝网印刷碳电极(SPCE)表面,采用差分脉冲伏安法进行分析。该免疫传感器检测L.monocytogenes的DPV响应信号在10~3 cfu/m L~10~9 cfu/mL具有良好的线性关系,线性回归方程为y=0.02933x-0.01996,R~2=0.99367,检出限为1.8×10~4 cfu/mL(S/N=3),即在检测3μL的检测样品中54 cfu的L.monocytogenes即可被检出。本研究所制备的电化学免疫传感器,成本低,操作简便,在实际应用中具有良好的前景。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年04期)

赵芳[2](2015)在《基于大豆过氧化物酶标记免疫蛋白芯片研制》一文中研究指出蛋白芯片是将不同种类的蛋白质分子固定在固相芯片表面,由于每一种蛋白分子都排列成有序的点阵,在不同的位置上固定相应的蛋白,根据确定的蛋白位点与待检测的分子的对应关系,可以在一次检测反应中实现多种分子的同时检测,具有一次性检测样品大,样品消耗低,检测成本低,检测结果准等优点,对于多种生物标志物的联合筛查具有重要的意义。本文以硝酸纤维素膜(NC膜)为固相载体,同时将两种或多种抗体固定在NC膜表面,制备了血清学标志物多组分组合芯片,使用大豆过氧化氢酶(SBP)代替常规的辣根过氧化氢酶(HRP)作为标记酶制备生物探针,通过夹心免疫方法将待测目标物和上述生物探针捕获到NC膜表面,利用化学发光法检测目标物的浓度,建立基于大豆过氧物酶标记探针的目标分析物的化学发光分析方法。具体研究工作如下:(1)构建唐氏综合征产前筛查血清学组合芯片,实现对游离雌叁醇(uE3)、抑制素A (Inhibin-A)、甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG)四项血清学标志物的同时检测。在NC膜表面的不同位置同时固定四种捕获抗体,构建出四种抗体的组合芯片;通过夹心免疫反应将四种待测抗原,生物素标记的对应检测抗体,SBP标记的链酶亲和素(SA)依次结合到芯片表面,利用大豆过氧化物酶催化化学发光反应,使用化学发光免疫成像的方法实现对四种抗原的同时检测。(2)在上述多组分检测芯片的基础上,将总前列腺特异抗原(t-PSA)和游离前列腺特异抗原(f-PSA)有序的固定在NC膜上,制备了基于SBP标记抗体的PSA免疫检测试剂盒,在单孔内可同时检测两种抗原并平行测定3次。(本文来源于《东南大学》期刊2015-12-30)

王日楠,王培龙,安悦,苏晓鸥[3](2015)在《Au@Pt纳米材料作为模拟酶标记酶联免疫测定克伦特罗》一文中研究指出基于Au@Pt纳米材料模拟催化,建立了竞争酶联免疫测定克伦特罗的新方法。优化了克伦特罗抗原与Au@Pt纳米材料偶联条件及Au@Pt标记酶联免疫检测体系的反应温度,H2O2用量等关键参数。在优化条件下,建立的Au@Pt标记酶联免疫检测体系的线性范围为0.0~2.0 ng/m L,线性相关系数为0.9912,检测限为0.1 ng/m L,低于常规辣根过氧化酶标记酶联免疫吸附试剂盒检测限。在羊尿液样品中添加不同浓度的克伦特罗的回收率高于77.5%。方法用于实际饲喂的羊尿样的检测,其检测结果与液相色谱-串联质谱测定结果能够较好吻合。(本文来源于《分析试验室》期刊2015年07期)

李爱萍,朱丽雯,张娟,周建伟[4](2015)在《辣根过氧化物酶标记JWA抗体及其在免疫检测反应中的应用》一文中研究指出目的:运用辣根过氧化物酶标记JWA单克隆抗体,并且将标记的抗体应用于ELISA法和western blot等免疫检测反应中。方法:运用高碘酸盐-四氢硼化钠氧化还原体系活化辣根过氧化物酶,活化的辣根过氧化物酶按1∶1标记JWA单克隆抗体;将HRP标记的抗体分别运用直接和双夹心ELISA测试;同时将标记单克隆抗体运用于western blot检测。结果:辣根过氧化物酶成功标记JWA单克隆抗体。其中HRP-JWA(4C9)抗体在直接法ELISA试验中和多肽的结合能力高于HRP-JWA(7C3);其在450 nm处的最大吸光度值为0.96。双夹心ELISA实验中,预先包被JWA(4C9)单抗,检测抗体使用HRP-JWA(7C3)可以得到较好的实验结果,在450nm处的最大吸光度值为1.30。在western blot实验HRP-JWA抗体浓度1.0μg·m L-1可以检测出SGC7901细胞中目的蛋白。结论:运用氧化还原方法成功标记JWA单克隆抗体,并可以初步应用于免疫反应的检测。(本文来源于《药学与临床研究》期刊2015年02期)

Kumari,G,L,谢冰[5](2014)在《抗体和酶标记物的不同组合对孕酮酶联免疫吸附试验的影响》一文中研究指出在类固醇的免疫测定中,抗体和酶标抗原正确组合的筛选决定ELISA的灵敏度和特异性。有报道称,采用异源系统法制备针对孕酮不同部位的抗体,可更好地检测孕酮。分别针对孕酮11α-半戊二酸酯-BSA(P-11-HG-BSA)、孕酮11α-半琥珀酸酯-BSA(P-11-HS-BSA)、孕-3-O-羧甲基肟-BSA(P-3-CMO-BSA)和孕酮-3-O-羧甲基肟-OVA(P-3-CMO-OVA)4个不同抗体与酶标记的P-11-HG、P-11-HS、孕酮11α-羧甲基醚(P-11-CME)、P-3-CMO、17-羟-3-O-羧甲基肟(17-P-3-CMO)和孕酮4-羧甲基硫醚(P-4-CMTE)组合进行检测。这些是用青霉素酶、碱性磷酸酶(ALP)和辣根过氧化物酶(HRP)不同标记的。当抗针对P-11-HS-BSA的抗体与分别标记有青霉素酶、碱性磷酸酶和HRP的P-3-CMO进行检测时,酶的类型对该测定法的性能无影响。研究发现,使用P-3-CMO-OVA作为免疫原和P-3-CMO-HRP作为标记的同源检测法,以及抗P-11-HS-BSA的抗体与P-3-CMO-HRP结合的异源ELISA法可灵敏地测定孕酮。使用17α-羟基孕酮-3-O-羧甲基肟-HRP与抗P-3-CMO-BSA和P-11-HS-BSA的相同抗体也被证明比P-3-CMO-HRP更好。结果表明,ELISA的灵敏度和特异性很大程度上依赖于所制备抗体的性质,而酶标记的选择可被控制。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2014年03期)

陈丽莉[6](2011)在《集群酶标记物的研究及其在化学发光免疫分析中的应用》一文中研究指出本文围绕一种基于介孔二氧化硅纳米粒子作为集群酶标记物载体的制备以及其在化学发光免疫分析方面的应用展开。化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay CLIA)因其同时具有化学发光法的高灵敏度和免疫分析法的高选择性,使其在免疫分析方法中应用越来越广泛。而基于纳米粒子作为集群酶标记物的免疫分析方法则是一个新兴的研究课题。全文由两章组成:第1章:综述这一章主要介绍了化学发光免疫分析的研究进展,重点总结了集群标记物在免疫分析中的应用。第2章:研究报告研究报告包括四个部分的内容:1.介孔二氧化硅纳米粒子的合成和表征合成了粒径在70±10nm的介孔二氧化硅纳米粒子,并对其形貌、粒径进行了透射电镜的表征,发现所合成的纳米粒子孔径均一、粒径较均匀、分散性良好,适合作为酶、抗体等生物样品的标记载体。2.基于介孔二氧化硅纳米粒子作为集群酶标记物的超灵敏的化学发光传感器测定癌胚抗原建立了一种超灵敏的基于辣根过氧化物酶标记介孔二氧化硅纳米粒子的集群酶标记物的化学发光免疫分析传感器检测癌胚抗原的方法。首先通过3-氨丙基叁乙氧基硅烷将介孔二氧化硅表面进行氨基硅烷化,然后利用戊二醛法将辣根过氧化物酶和癌胚抗原二抗同时固定于纳米粒子表面形成MSN-HRP-Ab2复合物。由于介孔二氧化硅纳米粒子的大比表面积增大了免疫反应中HRP的量,因此大大增强了化学发光信号,提高了方法的灵敏度。该方法简单、低成本、灵敏度高并且成功应用于血清中癌胚抗原的检测。灵敏度比传统的免疫分析方法提高了10倍。3.基于介孔二氧化硅纳米粒子作为集群酶标记物的化学发光免疫分析检测金黄色葡萄球菌肠毒素B建立了一种基于介孔二氧化硅纳米粒子作为集群酶标记物的化学发光免疫分析方法及其对金黄色葡萄球菌肠毒素B的检测。首先将介孔二氧化硅纳米粒子进行氨基硅烷化处理,然后采用戊二醛标记方法将辣根过氧化物酶和金黄色葡萄球菌肠毒素B二抗同时固定于纳米粒子表面形成MSN-HRP-Ab2复合物。通过优化标记于介孔二氧化硅纳米粒子表面的酶和抗体分子之间的比例来获得更强的化学发光信号,提高了方法的灵敏度。该方法操作简单、成本低、灵敏度高并且成功应用于对水体、食品、以及血清中金黄色葡萄球菌肠毒素B的检测。该方法适用于所有生物样品的分析检测。4.流动注射化学发光免疫分析检测猪肉中的盐酸克伦特罗残留建立了一种快速检测猪肉中盐酸克伦特罗的流动注射-化学发光免疫分析方法。采用过氧化脲作为luminol-CH4N2O·H2O2-HRP化学发光体系氧化剂,联苯硼酸作为增强剂,流动注射化学发光方法检测竞争免疫反应后的上清酶标复合物。该方法灵敏度高、简单可靠、仪器便宜,成功应用于猪肉中克伦特罗残留的检测,结果令人满意,是一种有效快速的食品安全分析检测方法。综上所述,本论文提出了一种基于介孔二氧化硅纳米粒子的新型集群酶标记物及其制备方法。实验证明,与传统的直接将酶分子标记到抗体(或抗原)分子的方法相比,该方法具有操作灵活,过程可控,重复性高,纯化容易,且具有一定的信号放大能力的优点。因此,该标记方法具有极大的应用价值。(本文来源于《陕西师范大学》期刊2011-05-01)

郭洁,李志士,宋薇,韩晓霞,赵冰[7](2009)在《SERS研究辣根酶标记的免疫反应》一文中研究指出近年来,表面增强拉曼散射(SERS)和表面增强共振拉曼散射(SERRS)以其超灵敏的特点越来越多地被用做化学,生物的分析检测工具,甚至可以实现单分子检测。酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种常用的免疫分析方法,已应用于抗原抗体的定量检测。而辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)在ELISA中是一种十分常见的标记用酶,它是从辣根中提取的一种过氧化物酶,一(本文来源于《第十五届全国光散射学术会议论文摘要集》期刊2009-10-18)

柯荣秦[8](2008)在《辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒的制备及其在免疫分析中的应用》一文中研究指出本文围绕一种基于二氧化硅纳米颗粒的免疫酶标记物的制备方法展开。酶联免疫分析(Enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)是所有免疫分析方法中应用最为广泛的方法,而基于纳米颗粒作为标记物的免疫分析方法则是一个新兴的研究热点,本论文将这两者结合在一起开展了相关的研究。第一章为绪论,介绍了酶联免疫分析的研究进展,重点介绍了酶联免疫分析的各种标记放大手段。第二章是辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒的制备及其在夹心法ELISA中的应用。这一章详细介绍了辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒的及其抗体复合物制备过程,并以乙肝表面抗原为检测模型进行实际应用。我们通过油包水(W/O)型微乳体系,制备了直径为50±5 nm的二氧化硅纳米颗粒,以此为载体,制备了抗体-酶-硅纳米颗粒复合物。通过氨基硅烷修饰在硅纳米颗粒的表面引入氨基,然后利用高碘酸钠氧化法将HRP标记在颗粒表面,最后通过氧化葡聚糖的桥接作用将乙肝表面的抗体分子标记到酶标记的纳米颗粒表面。我们考察了叁种不同氨基硅烷对于HRP标记效率的影响,利用免疫分析的效果来考察HRP和抗体分子不同的用量对于酶标记二氧化硅纳米颗粒-抗体复合物标记效果的影响。最后在最优的条件下检测乙肝表面抗原,其灵敏度达到0.06 ng/mL,线性范围0.15-12.5 ng/mL,对260份血清样品的检测结果与传统的ELISA完全一致,对30份阳性血清样品的检测结果与传统ELISA相关性良好,相关系数r为0.992。第叁章介绍了辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒在氯霉素检测中的应用,在这一章中通过检测小分子药物氯霉素的实验来考察辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒在竞争型ELISA中应用的可行性。实验中,我们采用了叁种不同的免疫分析策略以及两种氨基硅烷制备的酶标记物对氯霉素进行检测。该方法对氯霉素检测的灵敏度最低可以达到0.012 ng/mL,而且线性良好。以我们最终选定的策略和标记物进行回收率实验,回收率在85.01%-101.23%之间,CV在6.89%-25.66%,而且与传统的ELISA相关性良好。综上所述,本论文提出了一种基于二氧化硅纳米颗粒的新型酶标记物及其制备方法。实验证明,与传统的直接将酶分子标记到抗体(或抗原)分子的方法相比,该方法具有操作灵活,过程可控,重复性高,纯化容易,且具有一定的信号放大能力的优点。因此,该标记方法具有极大的应用价值。(本文来源于《厦门大学》期刊2008-06-01)

王培荣,邰怡[9](2005)在《免疫酶标记法快速检测肠杆菌科细菌共同抗原》一文中研究指出临床上送检的脑脊液、腹水、胆汁、中段尿等无菌性体液标本常常受到细菌的污染,而肠杆菌科细菌是其主要的污染菌。为了及时、准确地鉴定无菌性体液标本是否受到污染,以提高检验工作的质量,我们把酶标检测肠杆菌科细菌共同抗原(EnterobacterialCommonantigen,ECA)的方法应用于临床,使肠杆菌科细菌的鉴定于2小时内鉴定到科,现报道如下。(本文来源于《中国社区医师(综合版)》期刊2005年11期)

李小蓉[10](2005)在《基于碳纳米管和酶标记的电化学免疫传感器的研究》一文中研究指出近年来,免疫传感器作为一种新兴的生物传感器以其鉴定物质的高度特异性、敏感性和稳定性,显示出广阔的应用前景。电化学免疫传感器是将免疫技术与电化学检测相结合的一种新型免疫传感器,因其选择性好,分析速度快,灵敏度高,不受样品颜色、浊度的影响(即样品可以不经处理,直接进行检测),所需仪器设备相对简单,在免疫传感器研究中起着越来越重要的地位,已逐渐应用于食品工业、环境检测和临床医学等领域。 将纳米材料引入分析化学研究中,已成为分析化学的一个研究热点,已取得许多创新性研究成果。其中碳纳米管因其独特的力学、电子特性及化学稳定性,得到了人们的广泛关注。它具有粒径小、比表面积大、表面反应活性高、催化效率高等优异性质,还可作为固体促进剂,用于实现酶直接电化学,使它在电化学领域有着广阔的应用前景。利用碳纳米管修饰普通电极,或利用碳纳米管制作碳糊电极已被应用于生物小分子、气体的催化、生物大分子等的电化学研究中。本论文研究工作旨在研究纳米粒子组装电极上电化学检测信号的增强作用,结合生物分子识别物质—抗原/抗体的特异性,研制新型纳米组装电化学免疫传感器。本论文分别以辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶为标记酶,研制了两种高灵敏度、高选择性、简单的碳纳米管组装电化学免疫传感器。 第一章 引言 详细介绍了电化学免疫传感器的分类、抗原/抗体的固定化方法和免疫分析方法,评述了电化学免疫传感器的研究进展:简要地概述了碳纳米管在电化学领域中的应用:展望了电化学免疫传感器的发展趋势。 第二章 以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的碳纳米管组装电化学免疫传感器的研究 以碳纳米管修饰玻碳电极为工作电极,研究了HRP-对苯二酚(HQ)-H_2O_2体系的电化学催化行为。比较碳纳米管修饰玻碳电极和玻碳电极上HRP-HQ-H_2O_2体系电化学催化行为。在优化的实验条件下,采用计时电流法测定HRP的线性范围为5.0×10~(-10)~1.0×10~(-8)gmL~(-1),检出限为2.5×10~(-10)g mL~(-1)。 以HRP标记IgG抗体,以HQ和H_2O_2为底物,研制了以辣根过氧化物酶为标记酶的碳纳米管组装电化学免疫传感器。将IgG抗原吸附固定在碳纳米管修饰电极的表面,然后在含IgG抗体和HRP标记IgG抗体的培育液中进行竞争反应。通过测定HRP催化H_2O_2氧化HQ生成产物的还原电流来测定IgG抗体。传感器对IgG抗体的响应在3.0×10~(-7)~1.0×10~(-5)g mL~(-1)之间呈线性关系,相关系数0.9961,检出限为1.1×10~(-7)g mL~(-1)。该法具有灵敏度高和传感器制作简单等优点。将电极用于模拟血(本文来源于《陕西师范大学》期刊2005-05-01)

免疫酶标记论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

蛋白芯片是将不同种类的蛋白质分子固定在固相芯片表面,由于每一种蛋白分子都排列成有序的点阵,在不同的位置上固定相应的蛋白,根据确定的蛋白位点与待检测的分子的对应关系,可以在一次检测反应中实现多种分子的同时检测,具有一次性检测样品大,样品消耗低,检测成本低,检测结果准等优点,对于多种生物标志物的联合筛查具有重要的意义。本文以硝酸纤维素膜(NC膜)为固相载体,同时将两种或多种抗体固定在NC膜表面,制备了血清学标志物多组分组合芯片,使用大豆过氧化氢酶(SBP)代替常规的辣根过氧化氢酶(HRP)作为标记酶制备生物探针,通过夹心免疫方法将待测目标物和上述生物探针捕获到NC膜表面,利用化学发光法检测目标物的浓度,建立基于大豆过氧物酶标记探针的目标分析物的化学发光分析方法。具体研究工作如下:(1)构建唐氏综合征产前筛查血清学组合芯片,实现对游离雌叁醇(uE3)、抑制素A (Inhibin-A)、甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG)四项血清学标志物的同时检测。在NC膜表面的不同位置同时固定四种捕获抗体,构建出四种抗体的组合芯片;通过夹心免疫反应将四种待测抗原,生物素标记的对应检测抗体,SBP标记的链酶亲和素(SA)依次结合到芯片表面,利用大豆过氧化物酶催化化学发光反应,使用化学发光免疫成像的方法实现对四种抗原的同时检测。(2)在上述多组分检测芯片的基础上,将总前列腺特异抗原(t-PSA)和游离前列腺特异抗原(f-PSA)有序的固定在NC膜上,制备了基于SBP标记抗体的PSA免疫检测试剂盒,在单孔内可同时检测两种抗原并平行测定3次。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

免疫酶标记论文参考文献

[1].马骏爽,窦文超,赵广英.还原氧化石墨烯/纳米金非酶标记免疫传感器检测单核细胞增生李斯特氏菌[J].中国预防兽医学报.2017

[2].赵芳.基于大豆过氧化物酶标记免疫蛋白芯片研制[D].东南大学.2015

[3].王日楠,王培龙,安悦,苏晓鸥.Au@Pt纳米材料作为模拟酶标记酶联免疫测定克伦特罗[J].分析试验室.2015

[4].李爱萍,朱丽雯,张娟,周建伟.辣根过氧化物酶标记JWA抗体及其在免疫检测反应中的应用[J].药学与临床研究.2015

[5].Kumari,G,L,谢冰.抗体和酶标记物的不同组合对孕酮酶联免疫吸附试验的影响[J].中国畜牧兽医.2014

[6].陈丽莉.集群酶标记物的研究及其在化学发光免疫分析中的应用[D].陕西师范大学.2011

[7].郭洁,李志士,宋薇,韩晓霞,赵冰.SERS研究辣根酶标记的免疫反应[C].第十五届全国光散射学术会议论文摘要集.2009

[8].柯荣秦.辣根过氧化物酶标记二氧化硅纳米颗粒的制备及其在免疫分析中的应用[D].厦门大学.2008

[9].王培荣,邰怡.免疫酶标记法快速检测肠杆菌科细菌共同抗原[J].中国社区医师(综合版).2005

[10].李小蓉.基于碳纳米管和酶标记的电化学免疫传感器的研究[D].陕西师范大学.2005

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