基于金属-生物分子骨架（Bio-MOF-11）材料催化性能的牛奶中大肠杆菌O157:H7快速定量检测

论文摘要

本研究的目的是建立一种基于金属-生物分子骨架催化性能的快速定量检测牛奶中大肠杆菌O157:H7的新方法。以腺嘌呤和醋酸钴为原料,N,N-二甲基甲酰胺（DMF）为溶剂合成一种钴金属-生物分子骨架（Bio-MOF-11）。对Bio-MOF-11的催化性能进行研究,发现Bio-MOF-11具有和辣根过氧化物酶（HRP）类似的催化活性,并能在无过氧化氢（H2O2）存在的情况下催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）显色。基于此建立一种通过磁性微球进行特异性富集,通过检测与靶标结合的Bio-MOF-11的量间接检测牛奶中大肠杆菌O157:H7的方法,该方法的线性范围为3×103-6CFU/mL,检测限为8 CFU/mL,检测时间为25 min。该方法能快速,简单,高灵敏度、高选择性定量地检测出牛奶中的大肠杆菌O157:H7,在食源性致病菌的快速筛查中具有重要的应用价值。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 Bio-MOF-11的合成
•     1.3.2 Fe3O4微球的合成
•     1.3.3 Fe3O4@PDA的合成
•     1.3.4 Bio-MOF-11的表征
•     1.3.5 Bio-MOF-11材料类过氧化物酶性能的研究
•     1.3.6 温度、pH、反应时间、TMB浓度对Bio-MOF-11催化性能的影响
•     1.3.7 细菌的培养
•     1.3.8 Bio-MOF-11与大肠杆菌O157:H7单克隆抗体（D3）的交联
•     1.3.9 Fe3O4@PDA和大肠杆菌O157:H7单克隆抗体E7结合
•     1.3.10 Bio-MOF-11浓度梯度标准曲线的绘制
•     1.3.11 新型基于Bio-MOF-11的双抗体夹心法检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
•     1.3.12 方法的特异性及实际应用研究
•     1.3.13 人工污染牛奶样品的检测
•     1.3.14 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 Bio-MOF-11的合成与表征
•   2.2 Bio-MOF-11的FT-IR分析
•   2.3 Bio-MOF-11催化反应动力学
•   2.4 温度、pH、反应时间、TMB浓度对Bio-MOF-11催化性能的影响
•     （1）H2O2浓度的影响
•     （2）pH、反应温度、TMB浓度和反应时间对Bio-MOF-11催化性能的影响
•   2.5 Bio-MOF-11浓度梯度曲线的绘制
•   2.6定量检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
•   2.7 人工污染牛奶中大肠杆菌O157:H7检测及方法的特异性
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王淑娟,葛康洁,郭亮,李杰,许东坡,王翔,邱璟璇,刘箐

关键词: 金属生物分子骨架,过氧化物酶样活性,显色反应,双抗体夹心法,大肠杆菌

来源: 工业微生物 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 上海理工大学医疗器械与食品学院

基金: 上海市科技创新行动计划(18495800400),上海市农委科技兴农项目(沪农科推字(2017)第4-4号)

分类号: TS252.7

页码: 9-17

总页数: 9

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