融合聚精氨酸九肽的小热休克蛋白原核表达及蛋白纯化

论文摘要

目的构建小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白的原核表达载体,表达纯化融合蛋白.方法在小热休克蛋白表达载体的基础上利用点突变方法引入聚精氨酸九肽对应序列,转入BL21大肠杆菌感受态细胞进行原核表达,利用亲和层析方法对表达蛋白进行纯化.结果成功构建了融合聚精氨酸九肽的HSP16. 5融合蛋白表达载体,并对其在大肠杆菌细胞中的原核表达进行条件优化,研究显示:在诱导剂IPTG浓度为0. 5 mmol、37℃条件下诱导4 h目的蛋白产量较高.结论此实验成功构建了小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白的原核表达载体,得到了高纯度的小热休克蛋白-聚精氨酸九肽融合蛋白,为进一步研究其功能奠定基础.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 HSP-R9蛋白原核表达载体的构建
•     1.2.2 HSP-R9融合蛋白的原核表达
•     1.2.3 HSP-R9蛋白的原核表达条件优化
•     1.2.4 HSP-R9蛋白的亲和纯化
• 2 结果与分析
•   2.1 HSP-R9原核表达载体的构建结果
•   2.2 HSP-R9融合蛋白的原核表达结果
•   2.3 HSP-R9融合蛋白的原核表达条件优化结果
•     2.3.1 不同IPTG浓度的HSP-R9融合蛋白产量
•     2.3.2 不同诱导时间的HSP-R9融合蛋白产量
•   2.4 HSP-R9的蛋白纯化结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 常愉,宋文刚,陈丽,许梦然,关新刚

关键词: 热休克蛋白,聚精氨酸,原核表达,亲和层析

来源: 北华大学学报(自然科学版) 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 北华大学药学院,北华大学医学技术学院,北华大学医学院

基金: 国家自然科学青年基金项目(51503003),吉林省科技发展计划项目(20180101213JC,20170520140JH),吉林省卫生计生委青年科技骨干培养计划项目(2017Q040),北华大学青年科研创新团队项目

分类号: Q78;Q51

页码: 51-54

总页数: 4

文件大小: 183K

下载量: 178