二维电泳论文_董伟韬,胡俊杰,肖龙菲,赵兴绪,张勇

导读:本文包含了二维电泳论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:电泳,蛋白,毛细管,蛋白质,在线,家蚕,芯片。

二维电泳论文文献综述

董伟韬,胡俊杰,肖龙菲,赵兴绪,张勇[1](2016)在《家蚕蚕蛹蛋白质组二维电泳体系探究》一文中研究指出家蚕初期,蚕蛹蛋白与蚕蛹肤含有以上的人体必须氨基酸,还富含多种营养素,具有补充机体营养、促进生长发育、抗疲劳、抗衰老、提高人体免疫力等多种功能。近年来,蚕蛹蛋白在免疫、抗肿瘤等方面具有广泛的生理活性。其中在赵峰等家蚕相关蛋白质研究进展研究表明,蚕蛹含有丰富的蛋白质,其中经测定后含有18种人体所需的氨基酸,其中必需氨基酸占总体的40%,是一种理想蛋白质模式。所以研究蚕蛹体内蛋白具有重要意义。目前蛋白质组学中的蛋白质分离技术主要是双向电泳(2D-PAGE,Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis)。每个蛋白质都带有不同的等电点,所以依照这种特性进行等电聚焦(IEF Isoelectric focusiong)分离混合蛋白;接着根据不同大小的蛋白分子量进行SDS-PAGE凝胶电泳从而进一步分离混合蛋白,即依据蛋白分子量的不同对蛋白质进行进一步的分离。蛋白质在通过双向电泳后在胶面上表现为单个的蛋白点,然后即可对关注的蛋白点扣取进行质谱检测,确定蛋白质的功能以及名称。刘硕等人利用蛋白组学对家蚕蚕蛹的过敏源进行分析,表现出了该方法应用在家蚕蛋白研究上具有样品量比较小,所取得的结果较为直观,且研究周期较短等优势。本次试验采取有兰州威特森公司提供的家蚕蚕蛹。双向电泳的成功关键在于蛋白的纯化效果,主要是对脂肪,盐分等其他影响升压聚焦因素的去除。而蚕蛹是高脂肪且富含大量微量和常量元素的个体,所以对蚕蛹的蛋白提取的纯化研究具有重要意义。本次实验利用普通家蚕蚕蛹为实验材料,采用四种不同的纯化以及蛋白提取方法,4种不同聚焦时间,3种考马斯亮蓝染色法和3种平衡时间对家蚕蚕蛹双向电泳结果的影响。实验结果表明,采用TCA-丙酮法提取的蛋白效率最高,100000v,90000vh时蛋白纵横条带较少,且蛋白点明显。平衡时间在20分钟时有利于消除纵条纹。而染色液方法则各有优缺点。本项目为家蚕蚕蛹蛋白质组学的研究提供了方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十叁次学术研讨会论文集》期刊2016-10-22)

李欣,赵玉红,李小菊,陈容容,张金红[2](2016)在《二维电泳技术在多层次本科实验教学中的应用》一文中研究指出基于二维电泳技术成本高、步骤精细、耗时长等特点,将其以不同的教学形式分别应用于基础性、综合性和开放性等多层次实验教学当中,避免了诸如经费紧张、学生水平参差不齐、课时有限等问题,丰富了实验教学内容,提高了实验教学效果,能紧跟科研领域技术发展,为实践型创新人才培养奠定了良好的基础。(本文来源于《实验技术与管理》期刊2016年07期)

张文洋,唐雪妹,黄璐璐,姜若葳,康婕[3](2015)在《新型二维凝胶电泳及质谱方法用于组蛋白分离鉴定》一文中研究指出组蛋白是染色质的结构蛋白,包括H1、H2A、H2B、H3以及H4五类,在其N端的疏水性尾部存在着甲基化、乙酰化、磷酸化等多种翻译后修饰[1-3]。可以调控基因的表达水平及下游的表观遗传学功能。其中,组蛋白赖氨酸乙酰化是基因表达的关键调节子,可以决定细胞复制、分化和死亡等过程,与大脑功能和相关疾病也有重要关系。但由于组蛋白各变体极高的相似性、相近的分子量及丰富的翻译后修饰,分离鉴定组蛋白及翻译后修饰面临很大技术困难,传统的SDS-PAGE及抗体免疫识别技术无法有效胜任组蛋白的分离、鉴定工作。为了弥补传统电泳方法分离组蛋白的不足,本课题组发展了"Cu2+辅助-电荷-质量双聚焦二维凝胶电泳系统"用于大鼠肝脏组蛋白分离[4],与SDS-PAGE基于分子量进行分离的不同之处在于,该电泳系统中不同组蛋白因碱性氨基酸数目不同,在酸性条件下质子化程度各异,故迁移速率存在显着差别,且修饰组蛋白与金属离子发生程度各异的螯合作用,可以达到辅助分离的效果,再结合传统SDS-PAGE基于质量差异进行第二维分离。运用串联质谱可以高效、快速鉴定组蛋白及其变体,可区分相似组蛋白的序列差异及突变位点,并能发现新的翻译后修饰。(本文来源于《中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会会议摘要集》期刊2015-10-16)

王明丽,韩大正,晁玮霞,刘瑞敏,赵云岗[4](2015)在《二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白》一文中研究指出目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和膜联蛋白A2(annexin A2)在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体(HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个),代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点(Net NGlyc 1.0预测)。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、Ep CAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、Hep G2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显着升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。结论 TCTP、Ep CAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。(本文来源于《解剖学报》期刊2015年04期)

隋丽丽,荣芷铭,董慧明,董亮,祖国仁[5](2015)在《利用二维电泳技术检测大麦种子纯度》一文中研究指出利用蛋白质双向电泳技术和PDQuest分析软件对人工混合的不同纯度大麦的蛋白质电泳图谱进行分析,找到了不同品种大麦间的主要差异蛋白,并应用各差异点的3D高度数值与大麦纯度进行线性拟合,得到了不用差异蛋白质点相关的线性回归方程,并检验其准确性,实验取得了良好的效果,该方法可以较为准确地检测大麦种子的纯度。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2015年07期)

苏建加,陈宏[6](2015)在《含有二氧化钛薄膜增强虚拟阀的微流控芯片 用于二维凝胶电泳分离》一文中研究指出在微流控芯片上进行二维电泳,能够有效缩短分析时间、减少试剂和样品消耗,并实现高通量分析,但需要隔离两维间不同的缓冲液体系,并能实现对蛋白的有效控制和传输。本研究在虚拟阀的基础上,通过两相界面上的水解反应,在两维微通道的接口处沉积一层二氧化钛薄膜,以增强虚拟阀的效果。分别对等电聚焦和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳过程进行了考察。等电聚焦耗时约5 min,然后经电转移进入第二维通道进行凝胶电泳分离。凝胶电泳过程需5~10 min,迁移率与分离时间线性相关,与蛋白质分子量的对数值成反比。在上述工作的基础上,对蛋白质混合物进行了差异二维电泳分离。(本文来源于《分析化学》期刊2015年07期)

刘丽娜,刘晓霞,郭黎平,杨丽[7](2015)在《基于毛细管电泳二维连续扩散进样的理论和实验研究》一文中研究指出基于毛细管电泳的连续分析是相当重要的,尤其是在线监测药物溶解、生物反应器和有机合成等领域。为了达到精确的连续毛细管电泳分析,一项很大的挑战是发展对毛细管进样端无任何物理干扰的、微量进样高重现性的、自动连续进样方法。最近,本研究组发展了一种简单且易操作的连续毛细管电泳分析方法 1。利用穿过样品池的两根(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第叁分册)》期刊2015-04-19)

周拙恒,叶淋泉,张博[8](2015)在《液滴接口的二维液相色谱-毛细管电泳分离系统》一文中研究指出.蛋白质组学由于样品的高度复杂性,需要高分辨的多维分离技术。过去二十多年里,人们发展了各类多维分离策略,而接口技术是维度间样品转移时保证高分辨率的关键。在微量样品操控方面,液滴微流控技术展现了独特优势,如便于微升级液体有效操作、限制扩散,无交叉污染等独特优势,因而是二维分离的理想接口技术。本研究中,我们利用液滴技术这一新型接口耦合高效液相色谱和毛细管电泳。基于微芯片上的不同结构,"液滴生成"和"油相排除"步骤得以实现,从而完成样品(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第四分册)》期刊2015-04-19)

戴逸楠[9](2015)在《二维电泳和质谱技术筛选寻常型银屑病皮损差异表达蛋白》一文中研究指出前言银屑病又名牛皮癣,是临床上常见的容易病情反复的慢性炎症性皮肤病。组织病理学研究提示多表现为角质层的变厚、不完全角化,颗粒层变薄或消失,棘层的变厚,角质层中毛细血管异常增生等。近年来,蛋白质组学技术的发展为寻找敏感、特异的疾病标志物提供了一条有效的途径。我们采用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)对所提取蛋白进行分离,然后利用基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF-MS)和生物信息学等技术进行鉴定,通过比较PS患者皮损与正常人相关的蛋白质表达的差异进行实验分析,为PS的发病机制研究及治疗提供有价值的线索。材料和方法一、标本标本取自我院皮肤科入院首次就诊的寻常型PS患者16例,其中男8例,女8例,同时选择性别、年龄与之匹配的20名健康人(门诊体检者)为对照。其中男10例,女10例。二、方法取PS患者皮损和正常对照部位皮肤全层组织,面积为0.5×0.5cm,生理盐水清洗后-70℃冰箱保存。16-18μ m厚度冰冻组织切片后置于LEICA薄膜载玻片,LEICA激光切割仪进行组织切割,分别切取角质层组织及真皮层组织,提取蛋白。按蛋白浓度不同提取等量蛋白,进行双向凝胶电泳,均采用cy3和cy5荧光染色。DeCyder 2D 6.5软件对扫描图像的图像分析软件分析,强度校正,点检测,背景差分,同质化和匹配处理。选取图像分析得到的差异蛋白质点,切取这些点,脱色后进行胶内酶解,20μ g/L胰酶37℃消化过夜。将提取得到的肽段溶解于以50%乙腈-0.5%叁氟乙酸,并与等体积饱和基质(CCA)混合均匀,在不锈钢点样仪上点样,风干后进行质谱鉴定分析。叁、结果判定将肽质量指纹数据在蛋白质序列数据库中进行搜索,搜索引擎为Mascot (http: //www.matrixscience.com),数据库选用SwissProt。参数设置如下:半胱氨酸为脲甲基半胱氨酸(carbamidomethyl-Cys),可变修饰为氧化(M),每个肽段只允许有1个不完全裂解解点,肽段分子质量最大容许误差为±100 ppm。查询到蛋白质的匹配分数大于等于36分时,实验结果有显着性(P<0.05),从而确定蛋白名称及功能。结果一、二维凝胶电泳结果用DeCyder 2D 6.5图像分析软件分析PS患者和正常人角质层和真皮层的二维凝胶电泳结果,蛋白点显示了良好的重复性与稳定性,鉴别蛋白质点数分别为1969+21和1928+49个(见图2)。将其中一块胶设定为参考胶,组内平均匹配率为78.2%和76.3%。根据匹配情况,差异表达蛋白点的比值大于2,并且在同一组叁块凝胶2-DE图谱中同时出现相同变化的蛋白带点,可被视为差异表达蛋白。二、质谱鉴定结果经过鉴定这些蛋白可以在功能上分为以下几类:1、角质1型细胞骨架蛋白(K1C10、K1C14、K1C15、K1C16) 2、角质2型细胞骨架蛋白(K2C1)3、肌动蛋白(ARP3,ACTA,ACTBM)4、热休克蛋白(PHB,HSPβ1,CH60),5、中心体蛋白(CP135)(见图3),膜联蛋白(ANXA4、ANXA5)等。其中在PS患者皮损区角质层中高表达的有K2C1、K1C10、K1C16、K1C14、CH60、PHB、ARP3、ACTBM、ACTA、 ANAX5、CP135、PHB; PS角质层低表达的有:KIC15、ANAX4、HSPβ1; PS真皮层低表达:K1C16、CP135、ACTA。其中K1C16、CP135、ACTA在PS角质层高表达,真皮层低表达。结论PS皮损与正常组织差异表达蛋白可能是病理的标志物。通过调控这些异常表达的蛋白可能为PS发病机制的研究及治疗提供有价值的线索。(本文来源于《大连医科大学》期刊2015-03-01)

范忠军,胡序明,郁川,秦爱建,王欢莉[10](2015)在《DF-1细胞二维电泳方法的建立》一文中研究指出为了建立和优化DF-1细胞二维电泳方法,对5种细胞裂解液进行了比较;同时,还对提取的蛋白在不同的等电聚焦条件、水化条件、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度条件下的二维电泳图谱进行分析比较,并用PDQuest软件分析优化选择。建立了DF-1细胞的二维电泳方法,获得分辨率和重复性均可满足分析要求的DF-1细胞的二维电泳图谱。(本文来源于《河南科技大学学报(自然科学版)》期刊2015年02期)

二维电泳论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

基于二维电泳技术成本高、步骤精细、耗时长等特点,将其以不同的教学形式分别应用于基础性、综合性和开放性等多层次实验教学当中,避免了诸如经费紧张、学生水平参差不齐、课时有限等问题,丰富了实验教学内容,提高了实验教学效果,能紧跟科研领域技术发展,为实践型创新人才培养奠定了良好的基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

二维电泳论文参考文献

[1].董伟韬,胡俊杰,肖龙菲,赵兴绪,张勇.家蚕蚕蛹蛋白质组二维电泳体系探究[C].中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十叁次学术研讨会论文集.2016

[2].李欣,赵玉红,李小菊,陈容容,张金红.二维电泳技术在多层次本科实验教学中的应用[J].实验技术与管理.2016

[3].张文洋,唐雪妹,黄璐璐,姜若葳,康婕.新型二维凝胶电泳及质谱方法用于组蛋白分离鉴定[C].中国化学会第二届全国质谱分析学术报告会会议摘要集.2015

[4].王明丽,韩大正,晁玮霞,刘瑞敏,赵云岗.二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白[J].解剖学报.2015

[5].隋丽丽,荣芷铭,董慧明,董亮,祖国仁.利用二维电泳技术检测大麦种子纯度[J].食品与发酵工业.2015

[6].苏建加,陈宏.含有二氧化钛薄膜增强虚拟阀的微流控芯片用于二维凝胶电泳分离[J].分析化学.2015

[7].刘丽娜,刘晓霞,郭黎平,杨丽.基于毛细管电泳二维连续扩散进样的理论和实验研究[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第叁分册).2015

[8].周拙恒,叶淋泉,张博.液滴接口的二维液相色谱-毛细管电泳分离系统[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第四分册).2015

[9].戴逸楠.二维电泳和质谱技术筛选寻常型银屑病皮损差异表达蛋白[D].大连医科大学.2015

[10].范忠军,胡序明,郁川,秦爱建,王欢莉.DF-1细胞二维电泳方法的建立[J].河南科技大学学报(自然科学版).2015

论文知识图

耐酸突变株蛋白质组成的二维电泳示意图特异探针和8CCR通用探针灵敏度和...蛋白质活性表达谱技术的分析平台转染株和未转染株细胞全蛋白二维电泳1 喉癌组织二维电泳代表图

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

二维电泳论文_董伟韬,胡俊杰,肖龙菲,赵兴绪,张勇
下载Doc文档

猜你喜欢