王喜明（山西省医药与生命科学研究院山西太原030006）
【摘要】目的建立中药材棕褐沙林蚁的质量标准。方法以薄层色谱法对棕褐沙林蚁中氨基酸定性研究，展开剂为正丁醇-甲醇-冰醋酸-水（4:1:1:1），展距15cm；以50%乙醇为溶剂，采用热浸法测定棕褐沙林蚁中的浸出物含量。结果薄层鉴别中样品所含氨基酸能有效分离，分离度良好，且在与对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。以50%为浸出溶剂，热浸法测定，棕褐沙林蚁蚁药材中的浸出物含量为33.0%。结论薄层鉴别和浸出物含量测定可以作为棕褐沙林蚁的质量控制指标。
【关键词】棕褐沙林蚁薄层色谱鉴别浸出物含量
【中图分类号】R318【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）20-0376-02
蚂蚁是最古老的社会昆虫，不仅常见而且种类繁多，3000多年前，早在我国的周朝，人们便把蚂蚁当作美食和良药。明朝李时珍在《本草纲目》中，更有对蚁习性详尽准确的描述。其后，又有食蚁、药蚁的种种文献记录，所见甚丰。传统医学认为：蚂蚁性温而味辛，其性善走串而行经，能温经散寒，活血通络，养阳壮肾[1]。笔者以棕褐沙林蚁为研究对象，用薄层色谱法对药材中的氨基酸进行了定性研究，并以50%乙醇为溶剂对药材浸出物进行了含量测定，为棕褐沙林蚁药材及其制剂的质量控制提供了依据。
1仪器与试药
925M-202A电子天平，HYG-B全温度摇瓶柜，D2F-6020真空烘箱，ZF-2型三用紫外分析仪（上海市安亭电子仪器厂），KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂）；其它试剂均为分析纯。
色氨酸、精氨酸、甘氨酸、丙氨酸对照品（中国药品生物制品检定所）；蚂蚁对照药材（经山西大学生命科学院李长安教授鉴定为蚁科动物棕褐沙林蚁）；蚂蚁药材（山西双鹤药业有限公司提供）。
2方法与结果
2.1色谱鉴别
2.1.1溶液的制备
2.1.1.1对照品溶液的制备：取色氨酸、精氨酸、甘氨酸、丙氨酸对照品各20mg，分别置于10ml量瓶中，加50%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.1.1.2样品溶液和对照药材溶液的制备：分别取棕褐沙林蚁药材粉末及对照药材各0.5g，加50%乙醇5ml，超声处理30分钟，滤过，取续滤液作为样品溶液与对照药材溶液。
2.1.2薄层层析点样与展开
照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述对照品与对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上；另吸取上述对照药材与样品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以正丁醇-甲醇-冰醋酸-水(4:1:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。详见图1、2，在样品的色谱中，与对照品和对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.2浸出物含量
2.2.1热浸法
取棕褐沙林蚁粉碎药材约4.0g，精密称定，至于250ml带塞磨口的锥形瓶，精密加50%乙醇100ml，加塞，用天平称定重量，静置1小时，连接回流装置，加热至沸腾，并保持微沸一小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足已减少的重量，摇匀，用布氏漏斗抽滤。精密取25ml滤液置于干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置于干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。对照药材的浸出物含量为35.30%，棕褐沙林蚁药材的浸出物平均含量为31.41%。
2.2.2冷浸法
取棕褐沙林蚁粉碎药材约4.0g，精密称定，置于250ml具塞锥形瓶，精密加50%乙醇100ml，密塞，冷浸，前六小时置于摇床振摇，转速180r，温度24℃；取出，再静置18小时，用干燥的布氏漏斗迅速抽滤，精密量取20ml续滤液，置于干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后，于105℃下干燥3小时，置于干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。对照药材的浸出物含量为32.65%，棕褐沙林蚁药材的浸出物平均含量为30.06%。
3讨论
1）棕褐沙林蚁干粉中脂肪含量高达77%，全虫含蛋白质40～50%，主要成分为18种氨基酸，其中含有7种人体所必需的氨基酸，还有钙、铁、磷、硒、镁、锌等20多种微量元素[2]。本文中所采用的色谱鉴别方法主要是鉴别棕褐沙林蚁中含有的氨基酸。
2）在样品溶液的制备过程中，分别考察了水提、醇提和水提醇沉的制备方法，结果表明，醇提与水提的方法提取率要高于水提醇沉，但水提法后处理较复杂，需蒸干后再加醇溶解，否则点样展开后拖尾严重。经试验，最终选择后处理简单，易操作的方法，即加50%乙醇超声提取法。
3）参考有关文献，分别比较了正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)[3]，乙醇-冰醋酸-水(4:1:1)，正丁醇-乙醇-冰醋酸-水(4:1:1:1)[4]等展开剂，分离效果均不够理想，经试验，我们最终采用正丁醇-甲醇-冰醋酸-水(4:1:1:1)为展开剂，其成分斑点分离效果良好。
4）在浸出物的溶剂选择中，共考察了蒸馏水与无水乙醇为溶剂，经考察，选用的溶剂为50％乙醇，目的是为了充分提取蚂蚁中药材中的水溶性与脂溶性成分，能较全面地检测蚂蚁的化学成分含量[5]。浸出方法中，热浸法与冷浸法比较，前者明显比后者浸出率要高许多，所以最终采用50%乙醇为溶剂，以热浸法测定棕褐沙林蚁的浸出物含量。
5）蚂蚁的薄层鉴别与浸出物研究报道中多为拟黑多刺蚁，而棕褐沙林蚁的研究极为少见，笔者选用氨基酸为指标成分，建立了棕褐沙林蚁药材的薄层鉴别方法；以50%乙醇为溶剂，建立了浸出物含量测定方法。方法操作简单，重现性好，为棕褐沙林蚁药材的质量控制提供了依据。
参考文献
[1]杨沛.蚂蚁药用的古今研究[J].中药材，2003，26（1）：6-8.
[2]黄如彬，潘颖，陈瑞，等.棕褐沙林蚁的化学成分分析[J].首都医学院学报，1994，15（3）：200-203.
[3]赵大成，秦雪梅，申国华，等.薄层扫描法测定蚂蚁药材及其风湿克酒中亮氨酸的含量[J].中国药房，2004，15（2）：111-112.
[4]姚家元，田大丰，刘静，等.蛤蟆油颗粒剂的质量标准研究[J].科技创新导报，2008（10）：37.
[5]耿宝生，苗兴满，等.全蝎不同炮制品醇溶性浸出物及水分的含量测定[J].山东医药工业,2001,20(2)：(11-13).