导读:本文包含了抗角蛋白单克隆抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,单克隆抗体,细胞,免疫,抗体,荧光,片段。
抗角蛋白单克隆抗体论文文献综述
闫敏,袁永,宋军营,曾华辉,张钟允[1]（2018）在《细胞角蛋白19单克隆抗体的制备及组织芯片法评价》一文中研究指出目的利用组织芯片法对自制细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)单克隆抗体进行临床评价。方法通过CK19抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合及筛选,免疫组化初筛获得CK19单克隆抗体细胞株。进一步制备腹水并纯化CK19抗体,对该抗体及商品化对照抗体进行组织芯片法评价。结果经过细胞融合共筛出1株较好的杂交瘤细胞株2H5,纯化后的抗体纯度达95%,SDS-PAGE分析可见相对分子质量约55 000和25 000的重链和轻链条带,该抗体与对照抗体经组织芯片法评价,两者相关系数r=0. 994 7。结论经组织芯片法评价,自制CK19单克隆抗体与对照抗体相比无明显差异,为后续开展大量临床组织研究提供了依据。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年12期）
宋军营,袁永,张钟允,闫敏,曾华辉[2]（2018）在《人细胞角蛋白20的原核表达及其单克隆抗体的制备》一文中研究指出目的原核表达人细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20),并制备其单克隆抗体。方法利用CK20蛋白的cDNA扩增CK20的外显子基因,插入原核表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-ck20,转化大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经亲和层析柱纯化后,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法对杂交瘤细胞进行筛选,小鼠体内诱生腹水法批量制备单抗,并进行亚型、Western blot及免疫组化鉴定。结果重组表达质粒pET28a-ck20经双酶切及测序证明构建正确,纯化的重组CK20蛋白纯度在90%以上。制备的CK20单抗重链类型为IgG2b,轻链类型为Kappa链;能够很好地与CK20蛋白抗原产生结合反应,在1∶200稀释后能够较好地对结肠腺癌组织进行染色,且效果优于进口产品。结论利用重组表达的人CK20蛋白制备的单抗可用于检测相关组织中该蛋白的表达,为CK20的临床诊断及研究提供了有效的工具。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年04期）
张慧茹,翟晋豫,刘珍,王雪琴,孟素香[3]（2014）在《角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出为制备角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),采用间接ELISA方法检测免疫小鼠的抗体效价,融合、筛选、克隆化单克隆抗体,将筛选得到的单克隆细胞株注入小鼠腹腔制备腹水,采用辛酸硫酸铵法、蛋白A柱纯化腹水抗体,以SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法检测抗体纯度和浓度;利用鼠抗体亚型鉴定试剂盒对单克隆抗体进行亚型鉴定;采用阻断ELISA法测定mAb的敏感性(IC50)。结果表明,筛选获得4株分泌角蛋白19片段mAb的细胞株,将4株细胞株2F9、3H5、7C3、6F11注入小鼠腹腔,分别获得效价为2.56×105、5.12×105、5.12×105、2.56×105的单克隆抗体,经纯化,抗体蛋白浓度为12.43mg/mL~16.00mg/mL,为IgG1型抗体,其IC50在1.03ng/mL~1.53ng/mL之间。说明获得了4株分泌高效价CYFRA21-1单克隆抗体的细胞株,为建立CYFRA21-1的检测试剂盒奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2014年12期）
魏飞力,石英,陈杰,胡冬梅,李庆[4]（2013）在《细胞角蛋白18凋亡片段M30单克隆抗体的制备及其在慢性乙型肝炎肝损伤检测中的初步应用》一文中研究指出目的制备针对角蛋白18(CK18)凋亡片段M30的单克隆抗体并验证其凋亡检测特异性。方法以合成的13个氨基酸的M30抗原多肽与牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/C小鼠,取反应良好的小鼠脾细胞同SP2/0骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选融合的杂交瘤细胞,用有限稀释法分离获得能够稳定分泌抗体阳性克隆;制备腹水抗体纯化后,用间接ELISA方法鉴定抗体的亚类和型别;用免疫荧光细胞染色法鉴定抗体对于细胞凋亡检测的特异性;以制备的M30单克隆抗体包被ELISA平板,取35例慢性乙型肝炎患者血浆分析M30抗原水平与肝损伤之间的关系。结果获得3株能稳定分泌M30单克隆抗体的杂交瘤细胞株,叁株抗体均为IgG2a亚类,κ型抗体;该单克隆抗体能与发生凋亡的细胞特异性的反应;应用该单克隆抗体检测慢性乙型肝炎患者血浆中M30抗原水平与患者ALT、AST水平呈良好的相关性。结论成功制备针对CK18凋亡片段M30的单克隆抗体,该抗体具有良好的细胞凋亡检测特异性,可以用于慢性肝病肝损伤的检测。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2013年10期）
刘红,刘宾,李瑞娟,杨萌萌,李鹏聪[5]（2012）在《人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定》一文中研究指出目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2012年06期）
陈玉欣,刘洪君,刘静,张秀英[6]（2011）在《抗角蛋白14单克隆抗体对无血清培养角质形成细胞增殖的影响》一文中研究指出目的:建立一种无血清传代培养人角质形成细胞(KC)的方法,并观察角蛋白14单克隆抗体(anti-K14 mAb)对无血清培养人角质形成细胞体外增殖的影响。方法:应用角质形成细胞无血清培养基(KC-SFM)添加重组表皮生长因子(EGF)和牛垂体浸出液(BPE)传代培养角质形成细胞,培养均至第3代时于培养基中加人不同浓度的anti-K14 mAb,用MTT法观察对角质形成细胞增殖的影响。结果:应用无血清培养基成功地传代培养了角质形成细胞,MTT法结果显示各浓度组对培养的角质形成细胞的增殖有显着抑制作用并有浓度依赖性。结论:建立了一种无血清培养人角质形成细胞的方法a,nti-K14mAb对人角质形成细胞体外的增殖有显着抑制作用。(本文来源于《中国美容医学》期刊2011年11期）
凤敏华[7]（2010）在《细胞角蛋白-20单克隆抗体制备及在大肠癌检测中的初步应用研究》一文中研究指出目的:制备抗细胞角蛋白-20单克隆抗体,应用该抗体研究检测临床大肠癌患者外周血标本中细胞角蛋白-20的表达情况,对临床大肠癌的辅助诊断提供科学依据。方法:通过逆转录方法获得人细胞角蛋白-20的cDNA,基因扩增后将其插入原核表达载体pET28a,经酶切、测序鉴定、获得正确克隆后,将重组质粒转化BL21(DE3)细菌。在一定温度和一定浓度IPTG的诱导条件下,表达细胞角蛋白-20,用NTA-Ni柱纯化,获得细胞角蛋白-20。用细胞角蛋白-20免疫Balb/c小鼠,加强免疫后检测免疫效果,进行脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合,筛选克隆,制备抗细胞角蛋白-20的单克隆抗体。采用ELISA和Western Blot方法对获得的单抗进行鉴定,获得特异性单抗后,用抗细胞角蛋白-20的单克隆抗体制备简易细胞角蛋白-20酶联免疫检测试剂盒。对10份正常人及40份大肠癌患者的临床血液标本进行了检测。结果:获得pET28a-CK20重组质粒,表达纯化了细胞角蛋白-20,获得了3株特异性抗细胞角蛋白-20的单克隆抗体,成功制备了简易检测细胞角蛋白-20的酶联免疫试剂盒。对10份正常人及40份大肠癌患者的临床血液标本的检测结果提示:正常人的标本呈阴性,大肠癌患者标本中有19例呈阳性,检出率为47.5%,并且均属于Dukes分级的B、C、D期,叁期中的检出率分别为25%、41.7%、84.6%(3/12、5/12、11/13)。40例大肠癌患者标本组与正常对照组相比有显着的统计学差异(P<0.05)。Dukes C期、D期和A期、B期相比具有统计学差异(P<0.05)。结论:本研究在原核表达系统中成功表达和纯化了细胞角蛋白-20,成功制备了抗细胞角蛋白-20的单克隆抗体,获得3株高效价的单克隆抗体,制备了简易的检测细胞角蛋白-20酶联免疫检测试剂盒。用自制的细胞角蛋白-20酶联免疫检测试剂盒对10份正常人及40份大肠癌患者的临床血液标本进行了检测。结果提示,细胞角蛋白-20可作为除CEA肿瘤标志物外的另一个参考指标,通过检测患者外周血中的细胞角蛋白-20,可以快速检测及识别高危患者,有助于监测肿瘤发展及预后。(本文来源于《苏州大学》期刊2010-05-01）
隋玉杰,王茜,王雅丽,吴枚,郑锦花[8]（2010）在《水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体荧光探针的制备及其对肝癌细胞HepG2的免疫荧光标记》一文中研究指出目的制备水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体(QDs-MAb)荧光探针,并对其特异免疫性识别能力和荧光稳定性进行检测。方法在EDC偶联剂的作用下,将水溶性CdTe量子点与广谱细胞角蛋白单克隆抗体(PanCK)进行了连接;对肝癌细胞HepG2采用免疫细胞化学法和QDs-MAb单抗荧光探针直接免疫荧光标记法观察比较PanCK蛋白在细胞内的分布;将量子点与传统的荧光染料FITC的荧光强度和荧光稳定性进行了比较。结果QDs-MAb单抗荧光探针对HepG2细胞内的PanCK分子具有特异性的识别能力;与FITC相比,QDs-MAb荧光探针荧光度更强,光化学稳定性更好,激发光连续照射30min及室温放置3d后均未见明显淬灭。结论本实验成功制备了QDs-MAb荧光探针,为半导体量子点用于上皮来源的肿瘤细胞内PanCK分子的相关检测提供了科学依据。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2010年05期）
刘芳,邵晓枫,王金宏,范冬梅,许元富[9]（2008）在《抗人乳腺癌细胞膜表面角蛋白CK8的单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出目的:建立针对多药耐药人乳腺癌细胞膜表面差异抗原的抗体库,并鉴定抗角蛋白CK8特异性的单克隆抗体。方法:采用细胞免疫和杂交瘤技术制备单克隆抗体库,经免疫沉淀得到抗原-抗体复合物,SDS-PAGE分离目的抗原,质谱测序,Western blot验证及激光共聚焦显微镜观察抗原分子的细胞膜定位。结果:成功筛选到稳定分泌抗CK8分子的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7F9)。结论:文中所研制的单克隆抗体具有与乳腺癌细胞膜表面CK8分子特异结合的活性,在上皮来源肿瘤标志物CK8的临床检测及CK8相关生物学活性研究中具有广泛应用前景。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2008年06期）
陈新辉,赵明玄,安金刚,李巍,刘玉峰[10]（2008）在《单克隆天然抗角蛋白抗体IgM 3B4体外抑制白念珠菌芽管形成及粘附作用》一文中研究指出目的:观察单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4在体外抑制白念珠菌芽管形成及抑制白念珠菌与宿主细胞粘附的作用.方法:将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4分别与白念珠菌酵母相悬液在有利于芽管形成的条件下共同孵育,倒置显微镜下计数白念珠菌总数以及白念珠菌芽管数;将不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4与白念珠菌酵母相和人角质形成细胞混悬液、白念珠菌酵母相和人口腔黏膜上皮细胞混悬液、白念珠菌酵母相和胎儿脐静脉内皮细胞混悬液共同孵育,分别计数人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞上粘附的白念珠菌数.结果:与对照组比较,不同浓度的单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4均能抑制白念珠菌芽管生成,并且抗体浓度越高,抑制白念珠菌芽管形成的作用越明显;同时单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4能够显着减少白念珠菌与角质形成细胞、上皮细胞、内皮细胞的粘附,其抑制作用与单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4的浓度呈正相关.结论:单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4在体外能够抑制白念珠菌芽管形成,能够抑制白念珠菌与人角质形成细胞、人口腔黏膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞的粘附,从而降低白念珠菌的侵袭力,提示天然抗体IgM在机体抗真菌感染的天然免疫中可能具有积极的作用.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2008年01期）
抗角蛋白单克隆抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的原核表达人细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20),并制备其单克隆抗体。方法利用CK20蛋白的cDNA扩增CK20的外显子基因,插入原核表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-ck20,转化大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经亲和层析柱纯化后,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法对杂交瘤细胞进行筛选,小鼠体内诱生腹水法批量制备单抗,并进行亚型、Western blot及免疫组化鉴定。结果重组表达质粒pET28a-ck20经双酶切及测序证明构建正确,纯化的重组CK20蛋白纯度在90%以上。制备的CK20单抗重链类型为IgG2b,轻链类型为Kappa链;能够很好地与CK20蛋白抗原产生结合反应,在1∶200稀释后能够较好地对结肠腺癌组织进行染色,且效果优于进口产品。结论利用重组表达的人CK20蛋白制备的单抗可用于检测相关组织中该蛋白的表达,为CK20的临床诊断及研究提供了有效的工具。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗角蛋白单克隆抗体论文参考文献
[1].闫敏,袁永,宋军营,曾华辉,张钟允.细胞角蛋白19单克隆抗体的制备及组织芯片法评价[J].中国生物制品学杂志.2018
[2].宋军营,袁永,张钟允,闫敏,曾华辉.人细胞角蛋白20的原核表达及其单克隆抗体的制备[J].中国生物制品学杂志.2018
[3].张慧茹,翟晋豫,刘珍,王雪琴,孟素香.角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定[J].动物医学进展.2014
[4].魏飞力,石英,陈杰,胡冬梅,李庆.细胞角蛋白18凋亡片段M30单克隆抗体的制备及其在慢性乙型肝炎肝损伤检测中的初步应用[J].中华临床医师杂志(电子版).2013
[5].刘红,刘宾,李瑞娟,杨萌萌,李鹏聪.人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定[J].中国医药生物技术.2012
[6].陈玉欣,刘洪君,刘静,张秀英.抗角蛋白14单克隆抗体对无血清培养角质形成细胞增殖的影响[J].中国美容医学.2011
[7].凤敏华.细胞角蛋白-20单克隆抗体制备及在大肠癌检测中的初步应用研究[D].苏州大学.2010
[8].隋玉杰,王茜,王雅丽,吴枚,郑锦花.水溶性CdTe量子点-广谱抗细胞角蛋白单克隆抗体荧光探针的制备及其对肝癌细胞HepG2的免疫荧光标记[J].中国老年学杂志.2010
[9].刘芳,邵晓枫,王金宏,范冬梅,许元富.抗人乳腺癌细胞膜表面角蛋白CK8的单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国免疫学杂志.2008
[10].陈新辉,赵明玄,安金刚,李巍,刘玉峰.单克隆天然抗角蛋白抗体IgM3B4体外抑制白念珠菌芽管形成及粘附作用[J].第四军医大学学报.2008
论文知识图
