5hmC及其Tet 氧合酶在小鼠视网膜成熟过程中的调控

论文摘要

目的:通过两个不同年龄段的小鼠视网膜组织来探究小鼠视网膜成熟过程中5hmC表达的稳定性及Tet氧合酶的调控情况。方法:选取2周龄及2月龄健康雄性野生型C57BL/6J小鼠各30只,采用免疫荧光技术分别检测2周龄和2月龄小鼠视网膜组织中5hmC表达情况以及通过qRT-PCR技术和蛋白免疫印迹技术检测Tet1,Tet2和Tet3的表达水平。进一步选取2月龄体重相近健康的雄性小鼠45只,使用视神经夹以相同的力度夹持小鼠右眼球后视神经10 s,夹伤后第7天小鼠右眼为实验组,左眼为空白对照组。探究视网膜神经节细胞损伤过程中5hmC及Tets的变化情况。结果:（1）免疫荧光技术检测显示在小鼠发育过程中2周龄和2月龄小鼠视网膜组织中5hmC均有表达,相较2周的小鼠视网膜组织,2月的小鼠视网膜组织5hmC在视网膜各层细胞（GCL, INL和ONL）均表达。此外,5hmC表达位于视网膜神经节细胞,并且与Brn3a在细胞内共定位。（2）无论是出生后2周还是2个月的小鼠视网膜组织中,Tet3蛋白含量最高,Tet2次之,Tet1最低。随后,qRT-PCR和蛋白免疫印迹结果显示随着年龄的增加,Tet1与Tet2蛋白表达呈现下降趋势,而Tet3蛋白的表达增加,差异有统计学差异（P<0.05）。（3）视神经夹伤第7天,视网膜神经节细胞中5hmC及Tet3的表达出现明显降低。结论:5hmC参与小鼠视网膜成熟过程,Tet3是小鼠视网膜成熟过程中的主要调节蛋白。此外,5hmC及Tet3是视网膜神经节细胞成熟过程中稳定的标志物,可能是视网膜神经节细胞保护的新靶点。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验动物
•     1.1.2 主要试剂和仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 视网膜组织制备
•     1.2.2 荧光实时定量PCR
•     1.2.3 蛋白免疫印迹
•     1.2.4 冰冻切片免疫荧光
•   1.3 统计学方法
• 2 结 果
•   2.1 5hmC在成熟小鼠视网膜中的表达
•   2.2 小鼠成熟过程中Tet蛋白表达情况
•   2.3 5hmC及Tet3在视网膜神经节细胞凋亡过程中的变化
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 吴晶,吉伟超,吴维霖,王辉,钟佳宁

关键词: 家族蛋白,羟甲基胞嘧啶,视网膜神经节细胞,损伤

来源: 赣南医学院学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 赣南医学院,赣南医学院第一附属医院眼科,赣南医学院科研中心,赣南医学院心脑血管疾病防治教育部重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(81760160),校内自然科学启动基金项目(QD201605),校级创新团队项目(TD201708),心脑血管疾病防治教育部重点实验室开放课题(XN201807),研究生创新专项资金项目(YC2018-X0022)

分类号: R339.14

页码: 1081-1087

总页数: 7

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