·法医鉴定·
摘要：法医物证学是一门复杂且实用的学科，是司法鉴定与自然科学紧密结合的一门学科，从DNA 鉴定理论基础研究后我国在该方面有了一定的改善和提升。目前，法医物证为一些研究提供了多种技术与研究形式，特别是在个体判断与亲子鉴定方面，广泛应用在法医物证学中。另外，DNA 指纹技术也在法医物证学中有所应用，而本文就来探究一下DNA 鉴定技术在法医物证学中的应用。
关键词：DNA 鉴定技术；法医物证学；应用方法；分析
0 引言
法医物证学应用在DNA 鉴定技术中就是将遗传学作为理论支撑，把生物检测中DNA 分子作为研究对象，并且应用这种技术对个体判断与亲子鉴定等问题进行分析。本研究就是结合自己的实际工作经验，就DNA 鉴定技术在法医物证学中的应用实施研究与讨论，现将有关情况汇报如下[1]。
1 DNA 鉴定技术分型研究
DNA、STR 分型技术、minsSTR 技术、单核苷酸多态分型技术等等都在法医物证学中有了很有价值的应用，尤其是这类技术应用在刑事案例侦查中是十分关键的，是科学取证的途径之一。其中，DNA、STR 分型技术原理主要是结合短串联重复序列作为遗传标志，经过高分辨率的凝胶电泳分离得到基因进而实施科学分析，在获得DNA 样本随后增加PCR 且把电泳分离。最后，实施有效的基因分析。minsSTR 技术就是对微量或严重降解生物实施检测，应用降低的STR 位点增多片断让增扩的片断大小维持在100bp 就能够有效提升等位基因检出率。相关研究结果显示，在讲解DNA 样本分析的过程中，将其作为常规方式的STR 基因座检验展开科学补充。而minsSTR 技术在实际工作中应用的时候存在较大的局限性，比如：在构件复合增扩体系过程中通常仅能把较少的基因座增扩。同时，minsSTR引物与传统引物融合范围中存在较多的碱基的缺少，由此和传统的STR 分型结果是有很明显的差异的[2]。
另外，单核苷酸多态性分型技术是第三代遗传标记，和传统的STR 基因座进行比较，扩增产物是比较短的。因此，存在PCR 阻碍与高度讲解问题使得样本分析工作难度较大，突变率较低下，将这种技术应用在法医物证中多是经过群体灾难进行个体判断。当前，SNPs 检验技术主要涵盖了变性梯度凝胶电凝、引物延伸技术与飞行时间质谱技术等等。当然，不管应用任何一项技术均需要复杂的设备作为依托，一些和实验室设备是有着很大的差别的，从而造成该项检测技术的大范围应用[3]，同时当前SNP 检测技术应用变得十分广泛。线粒体DNA 在细胞质内的主要遗传形式是母系遗传的方式，各细胞内含有上百个线粒体且其环状结构不容易受到降解DNA 分子外切核酸酶影响，不会容易发生降解，在法医物证学中多是通过微量和缺乏核DNA 检测中。而线粒DNA也可以利用中属鉴定形式。结合部分对mtDNAHVI 及细胞色素b 片断片复合扩增鉴定人和动物混合学痕种属的应用价值。但是需要注意的是，线粒体DNA 本身是有着异质性的，能够出现两种或以上的对mtDNA。因此，将其应用在法医物证学内个体判断与亲子鉴定中其实稳定性比较令人担心，相关结果需要进一步核实[4，5]。
2 多位点DNA 指纹技术
在实际的侦查办案过程中，DNA 指纹技术应用是很常见的，所用到的检测材料主要包括精液、阴道分泌物、血液、毛发等多种核细胞。通过DNA 指纹图技术操作较为繁杂，流程复杂，各环节操作对结果是有很大影响的。要想得到准确的检测结果，需要做好如下工作：要确保有充足的高分子量DNA，参数在1.8 左右比较好。在提取的过程中，注意力量的控制，以防出现DNA 大分子断裂的情况。对于限制性内切酶消化DNA 具有一定的繁杂性，违规操作容易将DNA 污染进而导致DNA 被剪切，进而改变DNA 片段长度，这样得到的检测结果是不准确的。由此，酶与样品、缓冲液体一定要均匀。体系内对于甘油浓度应低于5%，不然的话就很容易发生抑制酶解，保持在30 微升就可以了。在DNA 琼脂糖凝胶电泳分离的过程中，凝胶板厚度应低于4mm[6]。把凝胶板放置在4℃环境下半小时，有利于样品加样。但是需要注意的是，如果电泳超出室内的温度，热量挥发缓慢就会导致凝胶变形使得电泳迁移率变快，使得分离效果显著降低。通常会提升降低电压与电流，把电泳时间延长。真空转移保证高效与迅速。在转移的过程中，通过玻管在胶表层轻轻滚动把胶布底的泡沫去掉，注意操作的过程中动作一定要柔和、缓慢，以防谱带变形，转移通常应保持1.5h 左右为宜。注意标记效率，以不断提升杂交的成功率。通过非同位素探针标记属于生化工程，把探针溶液稀释，热变形5min 后放进冰浴内，通过等体积标记试剂且把所有物质放入混合，确保水浴反应的高质量。在非同位素杂交膜洗脱过程中要控制好质量，对其背景清晰度，在更换溶液过程中通过滤纸把膜吸收干净。最后，冲洗X 线片，显影液应保证新鲜性，使用频率至少10次以上，显影条件保持在20℃左右为宜[7]。
在强奸案中实施DNA 指纹图检验，在搜集现场检验材料后准备检测，提取被检测人的精子，如果 DNA 酶解不开就要考虑是如下几方面原因：和DNA 溶液浓度不准确；混合斑载体内有布料或泥土物质，带有小分子在DNA 中。伴随着大分子DNA 沉淀融入DNA 溶液内，其物质对酶具有一定抑制效果由此造成酶解不开。通常把溶液均匀摇动且保证DNA量就能得到满意的检测结果。对于酶解不完全条件目前还没有有效的解决方法。据相关调查结果显示，DNA 指纹图谱带有漂移状态，两个样品DNA 谱带形状有一定差别且谱带之间有一定的距离，迁移率也会因此而有所不同。在亲子鉴定中应给予高度重视，不能够有任何的偏差[8]。
在相同样品不同酶解时间检测的时候，对于不完全酶解与完全酶解的DNA 样品，指纹图谱也有一些不同。不完全酶解谱带较多并存在较多不稳定带，这和酶解时间是有着紧密联系的。在酶解时间不充足的时候，一些酶切位点并未辨别与切割，片段超出安全酶解。因此，现实操作时应对酶解时间有一定控制，约4h 是其正常酶解时间，不过其DNA 量提高时可以适时增加时间，以确保理想的效果[9]。
3 讨论
在目前这个阶段，DNA 鉴定技术受一些因素的影响，比如使用仪器试剂等的影响。DNA 鉴定技术在法医物证学中常见应用STR 分型技术、DNA、minSTR 技术与单核苷酸多态性分型技术、线粒体DNA 等形式，能够不断提升法医物证学的实际应用效果与价值。
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参考文献
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[8] 霍塞虎，叶志鹏，徐海军，等.盗窃案件现场检材提取与DNA 检测结果的统计分析[J].中国法医学杂志，2018，33(2)：53-57.
[9] 尹秋丹，王皓.DNA 亲子鉴定的伦理浅析[J].世界最新医学信息文摘，2018，18(A1)：163.
中图分类号：R052
文献标识码：B
DOI:10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.85.152
本文引用格式：王若湛.探讨DNA 鉴定技术在法医物证学中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(85)：232,234.
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