导读:本文包含了干扰素基因敲除论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干扰素,小鼠,基因,狂犬病,因子,病毒,乙型肝炎。
干扰素基因敲除论文文献综述
侯璐,王一,张爽,李国利,曾磊[1]（2019）在《干扰素基因刺激因子基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响》一文中研究指出研究干扰素基因刺激因子(STING)基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。用CRISPR/Cas9技术敲除猪肺巨噬细胞系(3D4/21)的STING基因,用T7核酸酶检测靶基因敲除效率,用细胞计数试剂盒检测基因敲除细胞的活力,用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组病毒PRV-GFP感染基因敲除细胞,用流式细胞术检测感染细胞的荧光强度,用定量RT-PCR检测PRV的gB、TK基因表达及其感染细胞的IL-1β、IFN-β、ISG15基因转录,用Western blot检测PRV gE蛋白表达水平,用病毒滴定法测定子代病毒滴度。结果显示:设计的3个STING基因外显子2特异sgRNA均能切割3D4/21细胞的靶序列,其中sgRNA3的基因编辑效率最高;对sgRNA1介导STING基因敲除系进行克隆化,获得基因敲除细胞系3株,基因敲除对细胞活力无影响;亲本细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占80.77%,STING基因敲除细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占95.55%;STING基因敲除对PRV基因表达具有促进作用,亲本3D4/21细胞的病毒滴度为10~(6.2) TCID_(50)·0.1 mL~(-1),STING基因敲除细胞的病毒滴度为10~(8.3)TCID_(50)·0.1 mL~(-1),病毒感染细胞的IL-1β、IFN-β和ISG15转录下调明显。STING基因敲除能促进PRV在3D4/21细胞中复制,可能与感染细胞的IL-β、IFN-β和ISG15表达抑制有关。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年11期）
陈亚坤,孙婧,蒋亚君,王昕昉,刘晓宇[2]（2019）在《Ⅰ型干扰素受体(Ifnar)基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定》一文中研究指出目的对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析,为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。结果 Ifnar基因敲除小鼠繁育成功,获得了一批基因敲除鼠,使用PCR方法成功鉴定出Ifnar基因敲除纯合子小鼠。(本文来源于《实验动物科学》期刊2019年04期）
张爽,樊爽爽,常雯茹,丁光绪,郭瑞珍[3]（2019）在《干扰素调节因子3基因敲除对伪狂犬病病毒增殖的影响》一文中研究指出试验旨在研究敲除干扰素调节因子3 (interferon regulatory factor 3,IRF3)对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)复制的影响。使用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术建立了IRF3基因敲除PK15细胞系。通过构建重组质粒pIRF3-sgRNA,转染至HEK293T/17细胞,收获慢病毒并感染PK15细胞,经嘌呤霉素筛选获得多克隆细胞系,T7酶切鉴定后通过有限稀释法获得PK15-IRF3~(-/-)单克隆稳定细胞系。为验证敲除IRF3基因稳定细胞系是否构建成功,采用实时荧光定量PCR、Western blotting方法检测PRV相关基因及蛋白的表达,应用荧光显微镜和流式细胞术观察病毒复制情况并进行病毒滴度检测。结果显示,PK15-IRF3~(-/-)细胞系感染PRV-GFP后PK15-IRF3~(-/-)细胞荧光强度明显强于PK15细胞。感染PRV野毒(PRV-QXX)后PK15-IRF3~(-/-)病毒滴度明显强于PK15细胞,PRV的gE蛋白水平明显高于PK15细胞。在mRNA水平检测两种细胞中PRV TK基因的变化也得到相同的结果。进一步研究表明,在感染PRV-QXX后,PK15细胞中IFN-βmRNA会随着时间增加显着增高(P<0.05),但PK15-IRF3~(-/-)细胞中IFN-βmRNA则无明显变化。上述结果表明,敲除IRF3基因后显着促进PRV的增殖,IRF3在病毒的复制中发挥着重要作用,为伪狂犬病的防控提供了新的方法和策略。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年05期）
郑志泉[4]（2016）在《cGAS-STING调节基因敲除的细胞模型及干扰素启动子诱导EGFP转基因小鼠构建》一文中研究指出背景先天免疫是机体应对病毒感染的第一道防线,2013年陈志坚院士发现新的DNA感受器cGAS(cyclic GMP-AMP synthase)和第二信使cGAMP(cyclic GMP-AMP),进一步解释了先天免疫中机体如何识别病毒DNA抵御病毒的信号通路,然而在cGAS-STING信号通路上下游还有许多未知的效应分子未发现和功能机制不清楚。目的利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced palindromic repeats/CRISPR-associated proteins)基因编辑系统,构建cGAS-STING信号通路PX459-KO-M-RNF5, PX459-KO-M-IFNAR基因敲除载体和对应基因敲除的L929细胞株,以及能够检测人源和鼠源IFNP启动子控制的GFP表达载体(PGL3-Enhancer-IFNβ-promoter-EGFP、 V5-IFNβ-promoter-EGFP),构建了IFNβ诱导表达EGFP的转基因模型小鼠,为进一步研究cGAS-STING信号通路打下基础。方法首先利用RT-PCR筛选cGAS-STING信号通路相关基因,其次利用CRISPR/ Cas9系统构建部分基因的敲除载体,并通过细胞培养及单克隆筛选基因敲除细胞系,最后利用分子克隆技术构建能够检测IFNβ的系列载体、含同源臂的IFNβ-promoter-EGFP载体并通过显微注射法来构建转基因小鼠。结果成功构建了CRISPR/Cas9基因敲除载体PX459-KO-M-RNF5、PX459-KO-M-IFNAR, PX459-Rosa26-sg;成功构建了RNF5、IFNAR基因敲除细胞系并在细胞水平初步验证了敲除细胞的有效性；成功构建了人源和鼠源的PGL3-Ehancer-IFNβ-promoter-EGFP并能用于检测IFN β的表达,以及由IFNβ诱导表达EGFP的转基因模型小鼠。为进一步研究cGAS-STING信号通路调控及IFNβ诱导的抗病毒等先天免疫防御机制打下坚实的基础。(本文来源于《福建师范大学》期刊2016-06-02）
陈明发,夏幼辰,林永,孙潺,杨东亮[5]（2013）在《干扰素-γ基因敲除小鼠慢性乙型肝炎病毒复制模型的建立》一文中研究指出目的:建立干扰素-(interferon-,IFN-)基因敲除小鼠慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制模型.方法:IFN-基因敲除(IFN--/-)小鼠繁育并抽提组织DNA进行聚合酶链反应(PCR)及凝胶电泳鉴定基因型.IFN--/-小鼠纯合子9只与野生型C57BL/6小鼠9只同时高压水注射pAAV/HBV1.2质粒,按既定时间点采血检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B virus e antigen,HBeAg)和HBV DNA.血清HBsAg和HBeAg表达水平由电化学发光法进行定量检测.经抽提血清总DNA后,血清HBV DNA由定量PCR进行检测.结果:本实验室繁殖的IFN--/-小鼠均为纯合子基因型.IFN--/-小鼠和野生型C57BL/6小鼠血清中HBsAg、HBeAg和HBV DNA持续存在,转染后第40天仍阳性.但是,IFN--/-小鼠血清HBsAg表达水平高于C57BL/6野生小鼠(40天时,P=0.042);IFN--/-小鼠血清HBV DNA持续高水平复制,明显高于C57BL/6野生小鼠(第25天时,P=0.012;第40天时,P=0.039).两组小鼠血清HBeAg表达水平无差异.结论:IFN--/-小鼠慢性HBV复制模型成功建立,并揭示了IFN-在慢性HBV感染中可抑制HBV复制.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2013年31期）
干扰素基因敲除论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析,为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。结果 Ifnar基因敲除小鼠繁育成功,获得了一批基因敲除鼠,使用PCR方法成功鉴定出Ifnar基因敲除纯合子小鼠。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
干扰素基因敲除论文参考文献
[1].侯璐,王一,张爽,李国利,曾磊.干扰素基因刺激因子基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响[J].畜牧兽医学报.2019
[2].陈亚坤,孙婧,蒋亚君,王昕昉,刘晓宇.Ⅰ型干扰素受体(Ifnar)基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定[J].实验动物科学.2019
[3].张爽,樊爽爽,常雯茹,丁光绪,郭瑞珍.干扰素调节因子3基因敲除对伪狂犬病病毒增殖的影响[J].中国畜牧兽医.2019
[4].郑志泉.cGAS-STING调节基因敲除的细胞模型及干扰素启动子诱导EGFP转基因小鼠构建[D].福建师范大学.2016
[5].陈明发,夏幼辰,林永,孙潺,杨东亮.干扰素-γ基因敲除小鼠慢性乙型肝炎病毒复制模型的建立[J].世界华人消化杂志.2013
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