单增李斯特菌lmo2193基因克隆与原核表达

论文摘要

为了对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2193基因进行克隆及其原核表达,采用PCR方法扩增lmo2193基因,连接pMD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对。将目的基因克隆至原核表达质粒p ET32a中,构建重组质粒pET32a-2193,并转化大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达后,利用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白。结果显示:扩增得到的lmo2193基因序列长度为1 077 bp,与预期一致;该基因在大肠杆菌中大量表达,经SDS-PAGE检测和Western blot鉴定分析表明该产物为1个60 ku左右的融合重组蛋白。本研究成功克隆lmo2193基因,并获得大量表达,为进一步研究lmo2193基因功能奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株与质粒
•     1.1.2 主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 引物设计与合成
•     1.2.2 PCR扩增目的基因
•     1.2.3 重组表达质粒的构建
•     1.2.4 目的基因的诱导表达
•     1.2.5 Western blot鉴定重组蛋白
• 2 结果
•   2.1 PCR扩增
•   2.2 重组表达质粒p ET32a-2193的鉴定
•   2.3 重组质粒p ET32a-2193的诱导表达
•   2.4 重组表达蛋白Western blot鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李红欢,钱凌霄,李庆辉,刘扬扬,马勋

关键词: 单增李斯特菌,基因,克隆,原核表达

来源: 畜牧与兽医 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 石河子大学动物科技学院

基金: 国家自然基金项目(31360614,31860712)

分类号: S852.61

页码: 103-106

总页数: 4

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