辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性及其表达水平的影响

论文摘要

【目的】研究辛硫磷暴露对鲫鱼肝微粒体中细胞色素P4501a（CYP1A）活性及其mRNA和蛋白表达的影响,明确其剂量—效应及时间—效应关系,为揭示有机磷农药对水生生物的代谢调节机制提供理论依据。【方法】设辛硫磷低、中、高浓度组（0.0825、0.165和0.33 mg/L）和丙酮（助溶剂）对照组,采用半静态染毒法染毒鲫鱼,分别于染毒24、48、72和96 h后取样并迅速剖解取出鲫鱼肝胰脏,以CYP1A相关酶7-乙氧基-3-异吩唑酮-脱乙基酶（EROD）活性反映CYP1A活性,采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别测定鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达情况。【结果】辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性产生抑制作用,辛硫磷染毒24 h时CYP1A活性与辛硫磷存在明显的剂量—效应关系;各辛硫磷浓度组间均存在明显的时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性分别较对照组下降54.7%、30.4%和65.5%,且差异极显著（P<0.01,下同）。辛硫磷染毒后,鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因m RNA的表达整体上呈明显下调趋势,各染毒时间组间均存在较强的剂量—效应关系,除染毒48 h时CYP1A基因mRNA相对表达量与辛硫磷浓度呈正相关外,其他染毒时间点均呈负相关。辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A蛋白表达的影响均达极显著水平,且呈明显的剂量—效应及时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组的表达量分别较对照组降低74.6%、82.6%和85.7%。【结论】辛硫磷能抑制鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性并下调CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达;相对于辛硫磷产生的剂量—效应影响,其对CYP1A活性及其蛋白表达的时间—效应影响更明显。

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 引物设计与合成
•   1.3 试验设计
•   1.4 样品处理
•   1.5 鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性测定
•   1.6 CYP1A基因mRNA表达水平检测
•   1.7 CYP1A蛋白表达水平检测
•   1.8 统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性的影响
•   2.2 辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA表达的影响
•   2.3 辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A蛋白表达的影响
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李思,刘晓宇

关键词: 鲫鱼,辛硫磷,肝微粒体,细胞色素,活性,表达

来源: 南方农业学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 环境科学与资源利用,水产和渔业

单位: 华中农业大学食品科技学院,环境食品学教育部重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目（31471655,31171694）

分类号: X174;X592;S948

页码: 2329-2334

总页数: 6

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