番茄SlCDJ2蛋白在大肠杆菌和酵母中的表达

论文摘要

目的 DnaJ蛋白作为一种广泛存在于细胞内的分子伴侣,能响应多种胁迫反应。本研究以转基因大肠杆菌和酿酒酵母为材料,研究番茄Solanum lycopersicum Chloroplast DnaJ 2（SlCDJ2）蛋白在渗透胁迫下的表达情况,为进一步在番茄中研究其功能提供初步的理论依据。方法 PCR扩增获得SlCDJ2基因,构建大肠杆菌原核表达重组质粒pET30a-SlCDJ2和酵母真核表达重组质粒pYES2-SlCDJ2,分别通过热激转化法和醋酸锂酵母转化获得转基因大肠杆菌和酵母菌株,SDS-聚丙烯凝胶电泳分析SlCDJ2蛋白大肠杆菌中的诱导表达情况,分光光度法测定转基因大肠杆菌在渗透胁迫下的生长曲线,涂布方法观察转基因酵母菌在渗透胁迫下的生长表型。结果 SlCDJ2蛋白在大肠杆菌中成功诱导表达;转基因大肠杆菌在渗透胁迫下吸光度明显高于野生型大肠杆菌,差异具有统计学意义（P<0.05）。转基因酵母菌在渗透胁迫下的生长菌落明显好于野生型酵母菌。结论在大肠杆菌和酿酒酵母中过表达SlCDJ2基因,有助于提高大肠杆菌和酿酒酵母对渗透胁迫的抗性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 SlCDJ2基因的克隆及测序
•     1.2.2 SlCDJ2基因在大肠杆菌中的表达
•     1.2.3 大肠杆菌在渗透胁迫下的生长分析
•     1.2.4 酵母表达载体的构建
•     1.2.5 酵母遗传转化
•     1.2.6 酵母在渗透胁迫下的生长分析
•   1.3 统计学方法
• 2 结果与分析
•   2.1 Sl CDJ2基因的克隆
•   2.2 Sl CDJ2蛋白在大肠杆菌中的诱导表达
•   2.3 SlCDJ2蛋白大肠杆菌对渗透胁迫抗性的增强
•   2.4 SlCDJ2蛋白酵母对渗透胁迫抗性的增强
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘琪,商鑫涛,陈晨,王国栋

关键词: 蛋白,大肠杆菌,酵母,渗透胁迫

来源: 济宁医学院学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技

专业: 生物学,园艺

单位: 济宁医学院生物科学学院

基金: 山东省自然科学基金博士基金(ZR2018BC032),济宁医学院大学生创新项目(100220004030),国家级大学生创新项目(201710443030),济宁医学院博士基金(600492001)

分类号: S641.2;Q943.2

页码: 122-125+130

总页数: 5

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