导读:本文包含了反义基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,核苷酸,转基因,翠玉,辅酶,木质素,白桦。
反义基因论文文献综述
金璞,黄士月,谷从阳[1]（2019）在《HOXA1基因反义寡核苷酸对结直肠癌细胞转移潜能的影响研究》一文中研究指出目的探讨HOXA1基因反义寡核苷酸(ASODN)对结直肠癌HCT116细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法将HCT116细胞分为:15μmol/L的HOXA1 ASODN处理组(ASODN组)、15μmol/L N-ODN处理的无关对照组(N-ODN组)、15μmol/L的HOXA1 SODN处理的正义对照组(SODN组)及正常对照组。Western blotting检测HOXA1、上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)蛋白表达。MTT法检测细胞活力。Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。对比四组上述各指标。结果与其他叁组相比较,HOXA1 ASODN组可明显下调HOXA1、N-cadherin、Vimentin、PI3K和pAKT蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达,抑制细胞活力、侵袭和迁移能力。结论 HOXA1基因反义寡核苷酸可明显降低结直肠癌细胞转移潜能,机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,从而逆转上皮间质转化有关。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年13期）
刘红艳[2]（2019）在《正义和反义EuCCS联合EuCu/ZnSOD1双基因转化巨尾桉与抗寒性研究》一文中研究指出铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD,CSD)是植物中主要的活性氧清除剂,CSD的激活主要有CCS依赖途径和非CCS依赖途径。为研究CCS与CSD1在低温胁迫下的关联性,利用双基因植物二元表达载体,构建了过量表达CSD1(细胞质CSD)和CCS的pBD-EuCSD1+CCS以及过量表达CSD1同时CCS沉默的pBD-EuCSD1+antiCCS双基因植物二元表达载体。本文通过优化巨尾桉转化再生体系再生出转pBD-EuCSD1+CCS和pBDEuCSD1+antiCCS巨尾桉,筛选出转基因阳性巨尾桉;比较转基因阳性巨尾桉的抗寒性,筛选得到抗寒性强的转基因巨尾桉;对其进行生理生化研究,探究CCS与巨尾桉抗寒性的关系。结果如下:优化了巨尾桉转化再生体系:采用巨尾桉的茎为再生材料;芽分化培养基为:1/2 MS+0.1 g肌醇+30 g蔗糖+0.05 mg/L TDZ+0.5 mg/LNAA;芽生长培养基为:1/2 MS+0.1 g肌醇+30 g蔗糖+0.3 mg/L 6-BA+0.15 mg/L IBA。通过检测筛选,得到了16株转pBD-EuCSD1+CCS阳性巨尾桉,10株转pBDEuCSD1+antiCCS阳性巨尾桉。进行-15℃冷冻处理后,发现CCS过表达的巨尾桉抗冻性更强。CCS过表达的有9株可以耐受6 h冻害胁迫无萎蔫现象,正常培养后没有冻伤表型;CCS表达量降低的仅有F-10的抗冻能力较强;野生对照及转基因阴性对照巨尾桉均完全死亡。4℃低温胁迫检测SOD酶活,发现EuCSD1+CCS巨尾桉的SOD酶活性大部分高于EuCSD1+antiCCS巨尾桉。CCS过表达巨尾桉中SOD酶活性受胁迫后整体比CK高,CCS表达量降低的转基因巨尾桉中SOD酶活性进行低温胁迫前高于CK,受胁迫后低于CK。QPCR分析转基因植株的EuCSD1、EuCCS和EuGR在低温胁迫下的表达,发现转入了EuCSD1+CCS巨尾桉中CSD1和CCS的含量远高于EuCSD1+antiCCS巨尾桉。CCS过表达巨尾桉中CCS的变化趋势与CSD1的变化趋势一致呈先增高后降低;CCS低表达巨尾桉中CCS的表达量无明显变化,表达量较低。可见,响应低温胁时,CCS是激活CSD1的主要途径,提高了巨尾桉的抗寒性。GR与CSD1和CCS的变化趋势无明显相关性,但推测GR会参与巨尾桉抗冻胁迫反应。比较转EuCSD1+CCS与EuCSD1+antiCCS巨尾桉木质素含量,EuCSD1+CCS巨尾桉中检测到6株木质素含量比CK高,剩下两株Z-14和Z-16木质素含量比CK低;检测的3株EuCSD1+antiCCS巨尾桉中木质素含量均比CK低。暗示巨尾桉中CCS的过表达会增加木质素的生物合成,猜想CCS与巨尾桉中木质素的生物合成途径有关。(本文来源于《华侨大学》期刊2019-06-30）
苑平,田宏现,杨莉颖,王曼玲,吴娟娟[3]（2019）在《ACC氧化酶反义基因转化‘翠玉’猕猴桃》一文中研究指出为建立‘翠玉’猕猴桃基因功能研究技术平台并通过生物技术改良‘翠玉’猕猴桃,本研究以‘翠玉’猕猴桃叶片为实验材料,利用农杆菌介导法将ACC氧化酶(ACO)基因的反义链导入‘翠玉’猕猴桃,共获得14株潮霉素抗性植株。PCR鉴定结果显示,其中8株扩增获得了目的条带,初步统计阳性植株约为57.1%。随机挑选其中4株进行实时荧光定量PCR检测,结果表明,ACO基因的相对表达量是野生型植株的22%～41%。本研究为利用分子生物学手段改良‘翠玉’猕猴桃品种提供了工作基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年22期）
赵艳玲,王梅,靳玉蕾,韩瑶[4]（2019）在《正义EuCuZnSOD和反义4CL1双基因对巨尾桉耐低温能力的影响》一文中研究指出本研究采用双向启动子载体同步将巨尾桉CuZnSOD1基因和反义4CL1基因导入巨尾桉,通过PCR鉴定得到8株转基因巨尾桉。综合分析转基因组培苗-13.1℃处理3.5 h的抗寒性实验结果和全株硫酸木质素测定数据,获得一株优质抗寒的转基因巨尾桉植株76号。跟踪监测盆栽转基因苗在4℃低温胁迫下的SOD酶活性、q PCR分析CuZnSOD1和CCS表达量变化,研究CuZnSOD的m RNA表达量以及成熟蛋白酶与桉树植株耐低温能力的关系。研究数据表明冻害处理3.5 h后76号植株叶片受温度影响出现萎蔫现象,在组培室培养72 h后植株完全恢复,100 d后叶片没有白化损伤全株存活。76号温室苗的SOD酶比活力随4℃低温胁迫时间的延长而增加,但是CuZnSOD1和CCS的表达量则是逐渐降低。76号组培苗全株硫酸木质素含量为8.6%,相比对照降低约40%。本研究利用双基因转化技术获得了兼具低木质素和抗寒能力强的转基因植株,为培育高产和环境友好型桉树的研究提供技术支持。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年08期）
赵征,李杰,丁秀娜,周磊,孙德刚[5]（2019）在《ADAM28反义寡核苷酸对人牙龈成纤维细胞内ADAM28的基因表达的影响》一文中研究指出目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义寡核苷酸对人牙龈成纤维细胞(HGFs)内ADAM28表达的抑制作用。方法设计合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HGFs后,通过RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果 ADAM28 AS-ODN转染HGFs后,在转录、翻译和蛋白水平HGFs内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显着性差异(P<0.05)。结论 ADAM28 AS-ODN可有效阻断HGFs内ADAM28的基因表达。(本文来源于《现代口腔医学杂志》期刊2019年01期）
姚连梅,胡晓晴,周菲,郑要强,王国东[6]（2019）在《白桦反义CCoAOMT基因调控木质素生物合成》一文中研究指出白桦是我国北方重要的造林树种,但其中的高木质素含量严重制约了它作为造纸资源植物的开发利用。本文利用RACE技术获得了白桦咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因全长ORF序列,并构建了白桦CCoAOMT基因的反义表达载体,通过农杆菌介导法将其导入到白桦中。PCR检测表明反义CCoAOMT基因已整合到白桦的基因组中。对转化植株的半定量PCR检测显示转基因株系的CCoAOMT基因表达量下降;Wiesner染色发现,与野生型相比,转基因植株木质素含量有所下降。对七年生的转基因白桦和野生型对照进行了化学成分分析,结果表明转基因白桦的苯醇抽提物和Klason木质素显着减少,聚戊糖含量升高。上述结果暗示BpCCoAOMT基因参与白桦木质素的合成,反义表达该基因后木质素含量减少,更易于去除。白桦CCoAOMT基因对木质素的合成起重要作用,这为培育低木质素含量的制浆新品种白桦奠定了基础。(本文来源于《植物研究》期刊2019年01期）
高晓东,李永新,李文艳,苗海东,巨生贵[7]（2018）在《hTERT基因反义核酸对TNF-a抗C57BL/6鼠氟它胺耐受型(雄激素非依赖性)前列腺癌影响机制研究》一文中研究指出建立C57BL/6鼠雄激素非依赖性前列腺癌模型,探讨hTERT基因反义核酸(AS PS-ODN)对肿瘤坏死因子-a(TNF-a)抗肿瘤的影响机制。建立雄激素非依赖性前列腺癌模型,通过肿瘤抑制率测定,肿瘤细胞生长周期时间、测定及肿瘤组织病理学检测观察TNF-a对肿瘤细胞PC3的抑制作用。hTERT基因AS PS-ODN联合TNF-a治疗组肿瘤生长明显抑制,与TNF-a组和对照组比较有统计学意义(P<0.05)。hTERT AS PS-ODN对TNF-a抗C57BL/6鼠雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3有协同作用。(本文来源于《甘肃科技》期刊2018年18期）
李蓁,张帆,蔡红兵,卢玉兰[8]（2018）在《外周血长链非编码RNA-同源盒基因反义转录RNA与卵巢癌术后转归关系及意义》一文中研究指出目的探讨外周血长链非编码RNA(Lnc RNA)-同源盒基因反义转录RNA(HOTAIR)与卵巢癌术后转归的关系及意义。方法选取自2014年5月至2016年5月武汉大学中南医院收治的138例卵巢癌患者为研究对象,根据复发情况将患者分为复发组(n=37)和未复发组(n=101)。比较两组患者术前、后的血清糖类抗原125(CA125)水平及Lnc RNA-HOTAIR表达情况;应用受试者工作特征曲线(ROC)分析CA125和Lnc RNA-HOTAIR对患者术后转归的预测价值。结果复发组的血清CA125水平、外周血Lnc RNA-HOTAIR表达均高于非复发组,组间比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。ROC曲线分析结果显示,术前、术后Lnc RNA-HOTAIR和CA125对卵巢癌术后复发均有较高的预测价值,术前Lnc RNA-HOTAIR和CA125的最佳工作点分别为2. 75和356. 7 U/ml,术后Lnc RNA-HOTAIR和CA125的最佳工作点分别为1. 62和46. 3 U/ml。结论外周血Lnc RNA-HOTAIR表达水平与卵巢癌术后转归密切相关,可作为血清CA125的辅助指标对术后复发做出预测。(本文来源于《创伤与急危重病医学》期刊2018年05期）
刘奎,梁丽敏,李振辉,叶浩盈,潘艳飞[9]（2018）在《CRISPR/Cas9介导的酿酒酵母ADH2基因中断及反义RNA干扰GPD1的表达》一文中研究指出CRISPR/Cas9是一个简单、高效的用于靶向目的基因和无标记的基因组工程的工具。本文通过构建酿酒酵母沉默组件PGK-SGPD1-CYC1,使甘油-3-磷酸脱氢酶I(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase,GPD1)基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达。应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在中断乙醇脱氢酶Ⅱ(alcohol dehydrogenase Ⅱ,ADH2)基因的同时,定点敲入GPD1基因的反义干扰组件,从而特定地干扰GPD1的表达。采用高效的酵母化学转化法将反应组件敲入酿酒酵母Y1H中,CRISPR/Cas9介导的同源重组效率达43.48%,由此获得了ADH2基因中断和GPD1反义干扰的酿酒酵母突变株。发酵实验结果表明,酿酒酵母突变菌株SG1-1与出发菌株Y1H相比,乙醇产率提高了9.07%,甘油产率下降了12.05%,乙酸产率下降了12.30%,结果表明通过中断ADH2基因及插入GPD1反义干扰组件,既能够中断ADH2基因的功能,减少乙醇转化为乙醛,同时也能在一定程度上干扰GPD1基因的表达,提高乙醇产率。(本文来源于《现代食品科技》期刊2018年10期）
曹翼[10]（2018）在《反义长链非编码RNA POSH2-AS1调控编码基因POSH2在肺癌中的作用及机制研究》一文中研究指出研究背景:肺癌是常见的恶性肿瘤之一,近年高居癌症所致的死亡原因首位,严重危害人类健康,对世界范围公共卫生慢性非传染性疾病防治发起了严峻的挑战。根据最新版的《美国癌症统计》,在2018年,美国预计有二十叁万人发病,并预估有十五万人将死于肺癌。在世界范围内,每年有一百八十万人被诊断为肺癌,并导致一百六十万人死亡。在我国,根据2015年发布的中国癌症统计年报显示,2015年全国预计新发肺癌病例数为73.3万人,占新发肿瘤的17%,而预计肺癌致死人数将达到61.0万人,占肿瘤死因人数的21.7%。由于诊断上的困难以及治疗策略局限,不同地区和国家肺癌病人五年生存率在4-17%之间,仍处于较低水平。因此,寻找有价值的肺癌诊断的分子生物标志物及潜在的基因治疗靶点是近来肺癌领域的研究重点,探索影响肺癌发生发展的基因表达及其分子功能及机制是肺癌研究的当务之急。近年来,一些在肺癌的发生发展中起着重要调控作用的新型分子被逐渐发现。长链非编码RNA是一种长度超过两百个核苷酸,缺乏蛋白编码能力的RNA转录本。长链非编码RNA在表观遗传水平、转录水平、转录后水平均可发挥重要的调控作用,参与多种重要的生物学功能。长链非编码RNA按基因定位大致可分为:正义链长链非编码RNA(Sense lncRNAs)、反义链长链非编码RNA(Antisense lncRNAs)、双向长链非编码RNA(Bidirectional lncRNAs)、基因间长链非编码RNA(Intergenic lncRNAs)及基因内长链非编码RNA(Intronic lncRNAs)。反义长链非编码RNA是长链非编码RNA的一种,其同时也属于天然反义转录本(Natural antisense transcripts)的一种亚类,在哺乳动物中含量丰富,有多样的生物功能调节机制,并以此来发挥广泛的生物学功能。研究显示,反义长链非编码RNA常富集于编码基因的起始端或者末尾端,主要用其与编码基因天然配对的反义链或其他机制调控临近或者远端的编码基因表达。在肿瘤生物学中,反义长链非编码RNA的突变或异常表达与肺癌进展相关,如上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition)、肿瘤增殖、侵袭及远端转移等。与此同时,许多癌症相关的反义长链非编码RNA被逐渐发现,例如HOX反义RNA(HOTAIR)、肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)、FEZ家族锌指蛋白1反义RNA1(FEZF1-AS1)等。因此,近来的研究已表明反义长链非编码RNA对肿瘤调控具有重要意义,然而,目前研究对反义长链非编码RNA在肺癌中的表达情况及其如何调控肺癌的发生发展的细胞功能和分子机制还有待进一步探索。课题组前期发现多篇文献报道染色体2q12-13区段内等位基因缺失、单核苷酸多态性等与多种肿瘤及疾病相关,此区段内含有包括NPHP1、LIMS3、LIMS1、SEPT10、Linc0016等10个基因,我们通过小样本实验发现位于染色体2q12.3的反义长链非编码RNA POSH2-AS1(Plenty of SH3 domin family 2 antisense RNA1)在肺癌组织中呈低表达。在基因位置上,POSH2-AS1与含有多个Src同源3结构域(Src homolog 3 domain,SH3 domain)编码基因POSH2(Plenty of SH3domin family 2,POSH2)的上游核心启动子区及其第一个外显子碱基序列反向天然互补配对。因此,课题组拟假设反义长链非编码RNA POSH2-AS1与肺癌发生发展相关,并拟通过扩大样本量检验POSH2-AS1在肺癌中的表达情况,构建POSH2-AS1高表达和低表达细胞模型,研究其肿瘤细胞生物学功能,通过生物信息学分析POSH2-AS1其潜在调控靶基因,探索其在肺癌发生发展中的功能及可能的作用机制,为肺癌的诊断和治疗提供科学依据。目的:探讨反义长链非编码RNA POSH2-AS1在肺癌中的表达模式、肿瘤生物学功能及机制。方法:1.在课题收集的共209例新诊断的华南及华东肺癌病例肺癌组织及癌旁正常肺组织样本中检测POSH2-AS1表达水平,并分析其在肺癌中的表达情况与肺癌病例临床特征的关系。2.构建POSH2-AS1高表达和低表达人肺癌细胞系A549及PC-9模型以及相应的对照模型;采用CCK-8实验研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞系的增殖能力影响;采用平板克隆实验研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞的增殖能力和群体依赖性的影响;采用流式细胞仪研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞的周期和凋亡的影响;采用细胞迁移及侵袭实验研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞的迁移能力和侵袭能力的影响;采用裸鼠成瘤实验研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞体内成增殖成瘤能力的影响;采用肿瘤细胞裸鼠尾静脉注射实验研究POSH2-AS1高表达、低表达对肺癌细胞的体内转移能力的影响。3.在课题收集的肺癌组织及癌旁正常组织样本中检测POSH2-AS1潜在靶基因的表达水平,并研究其与POSH2-AS1的关系;利用构建的POSH2-AS1高表达、低表达肺癌细胞系模型研究POSH2-AS1的表达变化对潜在靶基因表达的影响;采用荧光素酶报告基因研究POSH2-AS1对靶基因表达的直接调控机制;构建的POSH2-AS1高表达、低表达肺癌细胞系模型中,采用siRNA敲低靶基因表达,进一步研究其调控机制。结果:1.通过q-RT PCR检测POSH2-AS1表达水平,结果显示,与癌旁正常肺组织相比,POSH2-AS1在肺癌组织中呈低表达(P=0.004)。2.POSH2-AS1低表达与肺癌临床分期(I+II vs.III+IV,P=0.003)、原发灶大小(T1+T2 vs.T3+T4,P=0.001)存在关联。3.在POSH2-AS1高表达和低表达A549及PC-9肺癌细胞系模型中进行CCK-8细胞增殖实验显示,在两组细胞系中,POSH2-AS1高表达组的细胞生长速率低于对照组(P<0.01),而低表达组的细胞生长速率高于对照组(P<0.01)。4.在POSH2-AS1高表达和低表达A549及PC-9肺癌细胞系模型中进行平板克隆实验显示,POSH2-AS1高表达组细胞集落形成率低于对照组(P<0.01),而低表达组细胞集落形成率高于对照组(P<0.01)。5.在POSH2-AS1高表达和低表达A549肺癌细胞系模型中进行细胞周期检测显示,POSH2-AS1高表达组与其对照组相比,休眠期及分裂前期(G0-G1期)细胞数量增多(P<0.01),DNA合成期(S期)细胞数量减少(P<0.05),低表达组与其对照组相比,休眠期及分裂前期(G0-G1期)细胞数量减少(P<0.01),DNA合成期(S期)细胞数量增多(P<0.05);在PC-9肺癌细胞系中,POSH2-AS1高表达组与其对照组相比,休眠期及分裂前期(G0-G1期)细胞数量增多(P<0.01),DNA合成后期及分裂期(G2-M期)细胞数量减少(P<0.01),低表达组休眠期及分裂前期(G0-G1期)细胞数量减少(P<0.01),DNA合成期(S期)细胞数量增多(P<0.01),DNA合成后期及分裂期(G2-M期)细胞数量增多(P<0.01)。在POSH2-AS1高表达和低表达A549肺癌细胞系模型中进行细胞凋亡检测显示,与其对照组相比,POSH2-AS1高表达组细胞凋亡率增加(P<0.01),低表达组细胞凋亡率减少(P<0.01)。6.在POSH2-AS1高表达和低表达A549及PC-9肺癌细胞系模型中进行细胞自噬水平检测,结果发现,POSH2-AS1对自噬的影响不显着。7.在POSH2-AS1高表达和低表达A549及PC-9肺癌细胞系模型中进行细胞迁移及侵袭实验显示,POSH2-AS1高表达组穿过小室的细胞数量低于对照组(P<0.01),低表达组穿过小室的细胞数量高于对照组(P<0.01)。8.裸鼠成瘤实验显示,与对照组相比,POSH2-AS1高表达组肺癌细胞在裸鼠体内生长能力降低(P<0.01),低表达组肺癌细胞裸鼠体内生长能力增加(P<0.01);裸鼠尾静脉注射肺转移实验显示,与对照组相比,POSH2-AS1高表达组细胞肺转移能力降低(P<0.01),低表达组细胞肺转移能力增加(P<0.01)。9.通过生物信息学分析显示,POSH2-AS1与POSH2存在天然碱基互补配对序列,POSH2-AS1与POSH2上游2214bp及POSH2第一个外显子578bp的碱基互补配对。通过分析POSH2-AS1和POSH2的基因表达情况发现,POSH2-AS1表达水平与POSH2表达水平呈正相关(肺癌组织r=0.374,P<0.01;癌旁正常组织r=0.393,P<0.01)。10.通过q-RT PCR检测与蛋白编码基因POSH2的表达水平,结果表明POSH2在肺癌组织中呈低表达(P<0.05),其低表达与肺癌临床分期(I+II vs.III+IV,P<0.01)、原发灶大小(T1+T2 vs.T3+T4,P<0.01)、淋巴结转移(N0 vs.N1+N2+N3,P<0.01)、远处转移(M0 vs.M1,P<0.01)相关。11.对POSH2-AS1及POSH2在基因表达水平的研究发现,与对照组相比,高表达POSH2-AS1能够增加POSH2表达量(P<0.01),而低表达POSH2-AS1能够降低POSH2表达量(P<0.01)。12.通过对POSH2启动子荧光素酶报告基因载体分析POSH2-AS1对POSH2启动子活性影响,结果显示POSH2-AS1高表达能增加POSH2启动子活性(P<0.05),低表达POSH2-AS1能够降低POSH2启动子活性(P<0.01)。13.在POSH2-AS1高表达及低表达细胞模型中,进一步采用siRNA对POSH2-AS1的潜在靶基因POSH2进行敲低实验,观察其对细胞增殖及凋亡,结果显示,在敲低了POSH2表达后,POSH2-AS1高表达组的细胞生长速率高于对照组(P<0.01),细胞凋亡率低于对照组(P<0.01),而未敲低POSH2的高表达POSH2-AS1组细胞生长速率低于对照组(P<0.01),细胞凋亡率高于对照组(P<0.01)。对低表达POSH2-AS1进行敲低POSH2后,结果显示,既POSH2-AS1低表达又敲低POSH2组与不敲低POSH2只低表达POSH2-AS1组相比,细胞增殖、凋亡没有显着差异(P>0.05),但其细胞增殖都高于对照组(P<0.01),细胞凋亡率低于对照组(P<0.01)14.通过对JNK通路核内转录反应元件质粒载体探究POSH2-AS1是否影响SPAK/JNK通路活化,结果显示,高表达POSH2-AS1可增加SPAK/JNK通路活性(P<0.01),而低表达POSH2-AS1未明显降低SPAK/JNK通路活性(P>0.05),但在饥饿处理细胞后,低表达POSH2-AS1表现出对SPAK/JNK通路活化的抵抗(P<0.01)。结论:1.POSH2-AS1在肺癌组织中呈低表达,其低表达与肺癌临床进展相关。2.POSH2-AS1能够抑制肺癌细胞增殖、转移及侵袭,促进细胞凋亡,并在裸鼠体内可抑制肺癌细胞成瘤能力及肺转移能力。3.POSH2-AS1可正向调控靶基因POSH2及影响SPAK/JNK通路活化,从而参与肺癌细胞的生物学进程。本研究的创新之处:研究首次报道了反义长链非编码RNA POSH2-AS1在肺癌中的表达模式及与临床特征关系,通过一系列细胞功能实验探索其肿瘤生物学功能,并研究了其可能的调控机制。本研究的不足之处:需要进一步研究POSH2-AS1对其靶基因POSH2的直接调控机制及其参与肺癌发生发展的具体作用机制。此外,反义长链非编码RNA POSH2-AS1对可能的远端调控基因的研究暂未探索。研究总结:反义长链非编码RNA POSH2-AS1在肺癌组织中呈现低表达,其低表达与肺癌临床特征相关,并通过调控编码基因POSH2及影响SPAK/JNK通路发挥肿瘤细胞生物学功能。该研究提示反义长链非编码RNA POSH2-AS1可作为肺癌诊断的生物标志物及潜在的治疗靶点。(本文来源于《广州医科大学》期刊2018-05-01）
反义基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD,CSD)是植物中主要的活性氧清除剂,CSD的激活主要有CCS依赖途径和非CCS依赖途径。为研究CCS与CSD1在低温胁迫下的关联性,利用双基因植物二元表达载体,构建了过量表达CSD1(细胞质CSD)和CCS的pBD-EuCSD1+CCS以及过量表达CSD1同时CCS沉默的pBD-EuCSD1+antiCCS双基因植物二元表达载体。本文通过优化巨尾桉转化再生体系再生出转pBD-EuCSD1+CCS和pBDEuCSD1+antiCCS巨尾桉,筛选出转基因阳性巨尾桉;比较转基因阳性巨尾桉的抗寒性,筛选得到抗寒性强的转基因巨尾桉;对其进行生理生化研究,探究CCS与巨尾桉抗寒性的关系。结果如下:优化了巨尾桉转化再生体系:采用巨尾桉的茎为再生材料;芽分化培养基为:1/2 MS+0.1 g肌醇+30 g蔗糖+0.05 mg/L TDZ+0.5 mg/LNAA;芽生长培养基为:1/2 MS+0.1 g肌醇+30 g蔗糖+0.3 mg/L 6-BA+0.15 mg/L IBA。通过检测筛选,得到了16株转pBD-EuCSD1+CCS阳性巨尾桉,10株转pBDEuCSD1+antiCCS阳性巨尾桉。进行-15℃冷冻处理后,发现CCS过表达的巨尾桉抗冻性更强。CCS过表达的有9株可以耐受6 h冻害胁迫无萎蔫现象,正常培养后没有冻伤表型;CCS表达量降低的仅有F-10的抗冻能力较强;野生对照及转基因阴性对照巨尾桉均完全死亡。4℃低温胁迫检测SOD酶活,发现EuCSD1+CCS巨尾桉的SOD酶活性大部分高于EuCSD1+antiCCS巨尾桉。CCS过表达巨尾桉中SOD酶活性受胁迫后整体比CK高,CCS表达量降低的转基因巨尾桉中SOD酶活性进行低温胁迫前高于CK,受胁迫后低于CK。QPCR分析转基因植株的EuCSD1、EuCCS和EuGR在低温胁迫下的表达,发现转入了EuCSD1+CCS巨尾桉中CSD1和CCS的含量远高于EuCSD1+antiCCS巨尾桉。CCS过表达巨尾桉中CCS的变化趋势与CSD1的变化趋势一致呈先增高后降低;CCS低表达巨尾桉中CCS的表达量无明显变化,表达量较低。可见,响应低温胁时,CCS是激活CSD1的主要途径,提高了巨尾桉的抗寒性。GR与CSD1和CCS的变化趋势无明显相关性,但推测GR会参与巨尾桉抗冻胁迫反应。比较转EuCSD1+CCS与EuCSD1+antiCCS巨尾桉木质素含量,EuCSD1+CCS巨尾桉中检测到6株木质素含量比CK高,剩下两株Z-14和Z-16木质素含量比CK低;检测的3株EuCSD1+antiCCS巨尾桉中木质素含量均比CK低。暗示巨尾桉中CCS的过表达会增加木质素的生物合成,猜想CCS与巨尾桉中木质素的生物合成途径有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
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