导读:本文包含了重组人睫神经营养因子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:重组人睫状神经营养因子,纯化,大肠埃希菌,减肥
重组人睫神经营养因子论文文献综述
刘君,蔡觅,郑秀玉,张夕燕,王健[1](2016)在《重组人睫状神经营养因子纯化工艺的建立》一文中研究指出目的建立适于生产应用的重组人睫状神经营养因子(recombinant human ciliary neurotrophic factor,rh CNTF)纯化工艺,并对纯化产物进行鉴定。方法将CNTFnew CC22突变体工程菌BL21(DE3)菌体破碎上清经25%饱和度硫酸铵沉淀后,沉淀上清先后经Butyl HP疏水层析和Q HP阴离子交换层析进行纯化。通过非还原SDS-PAGE和反相高效液相色谱分析(RP-HPLC)检测样品纯度;质谱法测定rh CNTF的相对分子质量;Edman化学降解法测定rh CNTF的N-端氨基酸序列;TF-1细胞/CCK-8比色法和对饮食诱导性肥胖(diet-induced obesity,DDIO)大鼠的减肥作用分别测定rh CNTF的体外和体内生物学活性。结果纯化后rh CNTF的纯度可达99.6%,纯化回收率为34.5%;相对分子质量为21 153;N-端15个氨基酸序列为Ala-Phe-Thr-Glu-His-Ser-Pro-Leu-Thr-Pro-His-Arg-Arg-Asp-Leu;生物学比活性高于2×106 IU/mg,并能有效降低DIO大鼠体重。结论经3步纯化成功获得了高纯度的rh CNTF,为进一步对其性质、功能和生产应用研究奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2016年12期)
王玲,吕雪漫,姜琦,袁毅[2](2016)在《重组人睫状神经营养因子干预家兔视神经损伤动物模型视神经蠕变特性的分析》一文中研究指出以蠕变特性指标研判重组人睫状神经营养因子干预动物视神经损伤的效果。以钳夹法复制动物视神经损伤模型,以重组人睫状神经营养因子连续干预30 d后,对各组动物进行视觉电生理检测,之后取各组动物视神经进行组织形态观察和蠕变实验。视神经损伤模型以重组人睫状神经营养因子干预治疗组Pl峰值大于视神经损伤模型组,差异显着(P<0.05)。以重组人睫状神经营养因子干预治疗组视神经纤维结构尚存,较少部分视神经纤维排列不规则,视神经无明显变细,视神经损伤模型组兔视神经纤维束结构消失,神经纤维和胶质细胞变性、坏死。视神经损伤以重组人睫状神经营养因子干预治疗组7 200 s应变上升量大于视神经损伤模型组组、差异显着(P<0.05)。以重组人睫状神经营养因子干预治疗动物视神经损伤模型后视神经的织形态、蠕变特性等得到较大的恢复。(本文来源于《生物医学工程研究》期刊2016年02期)
冯翠,王祺,张纯,秦培勇,郑秀玉[3](2015)在《PEG定点修饰重组人睫状神经营养因子及其生物活性评价》一文中研究指出采用分子质量为40k Da的马来酰亚胺聚乙二醇(m PEG-MAL),对重组人睫状神经营养因子突变体CNTF-C17的第17位半胱氨酸巯基进行定点修饰,通过离子交换层析获得单修饰产物Mono-PEG-CNTF-C17,并对其结构及体内外活性进行评价。实验结果表明,在p H 7.5的Tris-HCl缓冲液体中,蛋白质与修饰剂的为1∶3,4℃下反应12h,修饰率可达到90%以上,修饰混合物通过一步阴离子交换层析可获得纯度98%以上的单修饰产物。荧光光谱(FL)及圆二色(CD)图谱显示Mono-PEG-CNTF-C17与原蛋白二、叁级结构一致。TF-1.CN5a.1细胞增殖活性检测表明,MonoPEG-CNTF-C17的比活达到了6.51×105IU/mg,体内循环半衰期相对原蛋白显着提高了30.3倍。该研究可为开发CNTF长效产品提供基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2015年05期)
姚孝林,罗世华,徐晓寒,吴闻哲,侯惠民[4](2015)在《重组人睫状神经营养因子鼻喷雾剂对高营养性肥胖大鼠的减肥作用研究》一文中研究指出目的通过鼻腔给药将重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)递送到脑组织,考察鼻腔给药的减肥效果。方法以高脂饮食建成大鼠肥胖模型后,分组给予rhCNTF鼻喷雾剂或注射剂(一日0.05mg/kg,连续给药28d),并设置正常对照和模型组,检测体重、Lee's指数、体脂等的变化,考察rhCNTF鼻用制剂对高营养性肥胖(DIO)大鼠的减肥效果。结果鼻腔给药组和皮下注射组均能减缓大鼠体重增长,降低脂肪重量。结论 rhCNTF鼻腔给药与注射给药相比减肥效果更为显着。(本文来源于《世界临床药物》期刊2015年01期)
张书文[5](2014)在《重组人睫神经营养因子(rhCNTF)对营养性肥胖大鼠减肥作用的实验研究》一文中研究指出胖在21世纪已作为一种疾病被人们普遍关注,从而使减肥药物的研究受到了前所未有的重视。重组人睫神经营养因子(recombinant human ciliary neurotrophic factor,rhCNTF)是第一个运用生物工程技术研发的蛋白多肽类减肥药物。(本文来源于《中国医药指南》期刊2014年27期)
梁凌宇,雷清,高雪峰,杨军,应莲芳[6](2014)在《重组人睫状神经营养因子的聚乙二醇化修饰》一文中研究指出目的:研究重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)突变体的聚乙二醇(PEG)化修饰,对rhCNTF的PEG化产物进行初步分离纯化及相关生物活性检测。方法:采用分子生物学技术经点突变得到rhCNTF的突变体CN10,通过实验设计研究CN10的最佳PEG化条件;采用分子筛层析方式对偶联产物进行初步纯化,最后用ELISA和小鼠体重增长抑制法检测PEG化后的CN10蛋白的生物活性。结果:能运用mPEG-MAL对CN10进行定点修饰,PEG化后用Superdex200能够分离CN10;PEG化后的CN10每2 d腹腔注射1次,对小鼠体重的增长抑制率可达50%,与rhCNTF每天注射2次的体重增长抑制作用相当。结论:CN10蛋白在PEG化修饰后,其减重效应持续时间明显延长。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2014年01期)
冯翠,赵大伟,张纯,王健,秦培勇[7](2013)在《一种重组人睫状神经营养因子突变体的分离纯化及结构鉴定》一文中研究指出研究并建立从细胞破碎上清中获得一种含游离半胱氨酸的重组人睫状神经营养因子突变体(CNTF-C17)的分离纯化方法并对纯化产物的结构及活性进行表征。通过疏水层析、离子交换和亲和层析的组合层析路线,能实现目标蛋白与其它杂蛋白的有效分离。组合层析后CNTF-C17的纯化倍数可达11.4,收率35.5%。反相高效液相色谱和凝胶过滤层析证明产物纯度可达到98%以上,且以单体形式稳定存在,无分子间二硫键结合的二聚体。质谱测得产物分子量与理论值一致,圆二色光谱和荧光光谱证明纯化产物具有正确的二、叁级结构,TF-1.CN5a.1细胞增殖活性检测表明纯化产物比活达到2.1×106IU/mg。因此,为这种新的CNTF突变体规模化生产及后续应用奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2013年10期)
杨军,应莲芳,蒋琳,高雪峰[8](2013)在《凝胶法和动态浊度法检测注射用重组人睫状神经营养因子中细菌内毒素含量》一文中研究指出目的采用凝胶法和动态浊度法检测注射用重组人睫状神经营养因子(CNTF)中细菌内毒素含量,控制制品质量,消除临床热原反应的发生。方法供试品参照《中华人民共和国药典》(2010年版)叁部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法和动态浊度法要求进行检查。结果注射用重组人睫状神经营养因子溶液在100μg/mL质量浓度下,确定内毒素限值为10 EU/mL。凝胶法和动态浊度法检查后,注射用重组人睫状神经营养因子内毒素含量均符合规定。结论凝胶法和动态浊度法可用于注射用重组人睫状神经营养因子的细菌内毒素检查。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2013年04期)
马亚茹,陆俭,李萍,高雪峰,蒋琳[9](2011)在《重组人睫状神经营养因子蛋白质定量检测方法的建立》一文中研究指出采用ELISA双抗体夹心法,建立一种快速灵敏的定量检测rhCNTF成品蛋白含量的方法。结果显示,rhC-NTF抗原浓度在(0~25)ng范围内线性良好(r>0.99),灵敏度为0.3ng/ml,与其他重组细胞因子无交叉反应,样品的检测结果与理论含量相吻合,CV<15%,该方法检测速度快、重复性好、灵敏度高、特异性好。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2011年03期)
高剑坤,范开,侯再金,张兵兵,杨黎[10](2011)在《重组人睫状神经营养因子脂质体制备及性质》一文中研究指出目的制备重组人睫状神经营养因子(recombinant human ciliary neurotrophic factor,rhCNTF)脂质体,提高rhCNTF穿透血脑屏障能力。方法采用薄膜超声法制备rhCNTF脂质体,测定包封率。分别用rhCNTF原液、rhCNTF脂质体及生理盐水尾静脉注射Balb/C小鼠,0,2,6,12,24 h后测小鼠脑组织中rhCNTF含量。结果制得的rhCNTF脂质体形态圆整,平均直径为85.0 nm,包封率为93.14%。用ELISA法测定小鼠脑组织中rhCNTF的含量,rhCNTF原液组和rhCNTF脂质体组存在显着差异。结论制备的rhCNTF脂质体能提高rhCNTF穿越血脑屏障的能力,为rhCNTF的进一步应用和研究提供了依据。(本文来源于《中国现代应用药学》期刊2011年02期)
重组人睫神经营养因子论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
以蠕变特性指标研判重组人睫状神经营养因子干预动物视神经损伤的效果。以钳夹法复制动物视神经损伤模型,以重组人睫状神经营养因子连续干预30 d后,对各组动物进行视觉电生理检测,之后取各组动物视神经进行组织形态观察和蠕变实验。视神经损伤模型以重组人睫状神经营养因子干预治疗组Pl峰值大于视神经损伤模型组,差异显着(P<0.05)。以重组人睫状神经营养因子干预治疗组视神经纤维结构尚存,较少部分视神经纤维排列不规则,视神经无明显变细,视神经损伤模型组兔视神经纤维束结构消失,神经纤维和胶质细胞变性、坏死。视神经损伤以重组人睫状神经营养因子干预治疗组7 200 s应变上升量大于视神经损伤模型组组、差异显着(P<0.05)。以重组人睫状神经营养因子干预治疗动物视神经损伤模型后视神经的织形态、蠕变特性等得到较大的恢复。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组人睫神经营养因子论文参考文献
[1].刘君,蔡觅,郑秀玉,张夕燕,王健.重组人睫状神经营养因子纯化工艺的建立[J].中国生物制品学杂志.2016
[2].王玲,吕雪漫,姜琦,袁毅.重组人睫状神经营养因子干预家兔视神经损伤动物模型视神经蠕变特性的分析[J].生物医学工程研究.2016
[3].冯翠,王祺,张纯,秦培勇,郑秀玉.PEG定点修饰重组人睫状神经营养因子及其生物活性评价[J].中国生物工程杂志.2015
[4].姚孝林,罗世华,徐晓寒,吴闻哲,侯惠民.重组人睫状神经营养因子鼻喷雾剂对高营养性肥胖大鼠的减肥作用研究[J].世界临床药物.2015
[5].张书文.重组人睫神经营养因子(rhCNTF)对营养性肥胖大鼠减肥作用的实验研究[J].中国医药指南.2014
[6].梁凌宇,雷清,高雪峰,杨军,应莲芳.重组人睫状神经营养因子的聚乙二醇化修饰[J].生物技术通讯.2014
[7].冯翠,赵大伟,张纯,王健,秦培勇.一种重组人睫状神经营养因子突变体的分离纯化及结构鉴定[J].中国生物工程杂志.2013
[8].杨军,应莲芳,蒋琳,高雪峰.凝胶法和动态浊度法检测注射用重组人睫状神经营养因子中细菌内毒素含量[J].微生物学免疫学进展.2013
[9].马亚茹,陆俭,李萍,高雪峰,蒋琳.重组人睫状神经营养因子蛋白质定量检测方法的建立[J].微生物学免疫学进展.2011
[10].高剑坤,范开,侯再金,张兵兵,杨黎.重组人睫状神经营养因子脂质体制备及性质[J].中国现代应用药学.2011
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