牡蛎主要过敏原原肌球蛋白的重组表达及鉴定

论文摘要

牡蛎的主要过敏原是Crag 1蛋白（属于一种原肌球蛋白）,克隆牡蛎原肌球蛋白Crag 1基因,导入大肠杆菌（BL21）中,然后筛选重组菌株。通过SDS-PAGE探究了重组菌株中Crag 1蛋白的最佳诱导表达条件,15℃下诱导16h。然后通过Western印迹、SDS-PAGE、质谱（MALDI-TOF-MS）、圆二色（CD）光谱等方法从His-tag、相对分子量、肽段比对以及二级结构上综合鉴定了重组Crag 1蛋白的准确性。本实验成功重组表达并鉴定了牡蛎主要过敏原Crag 1蛋白,为接下来的牡蛎脱敏实验以及牡蛎过敏的临床诊断和治疗奠定了良好的生物学基础。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 主要材料与试剂
•   1.2 表达载体的构建
•   1.3 重组大肠杆菌中Cra g 1的最佳表达条件探究
•   1.4 Cra g 1的纯化
•   1.5 Western印迹分析组氨酸标签
•   1.6 SDS-PAGE分析
•   1.7 重组Cra g 1的质谱 （MALDI-TOF-MS） 鉴定
•   1.8 圆二色 （CD） 光谱分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 牡蛎Cra g 1基因的克隆
•   2.2 Cra g 1的氨基酸组成分析
•   2.3 重组Cra g 1的最佳表达条件
•   2.4 重组Cra g 1的鉴定
• 3 总结

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张江涛,李国明,方磊,刘艳,崔欣悦,鲁军

关键词: 牡蛎,原肌球蛋白,重组,表达条件,鉴定

来源: 中国食品添加剂 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 中国食品发酵工业研究院北京市蛋白功能肽工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金项目(31671963),宁波市“十三五”海洋经济创新发展示范项目(NBHY-2017-S1),十三五国家重点研发计划(2016YFD0400604),中山市协同创新中心认定资助项目(2016C1015)

分类号: TS254.1

页码: 47-53

总页数: 7

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