建立表达犬NECTIN4的牛源细胞株用于培养犬瘟热病毒

论文摘要

NECTIN4是犬瘟热病毒的受体之一。通过在牛肾MDBK细胞株中表达NECTIN4,建立MDBK-N4细胞株用于培养犬瘟热病毒。接种犬瘟热病毒后,MDBK-N4细胞能够扩增病毒并产生细胞病变,这说明病毒受体的表达增强了病毒与细胞膜表面的结合能力,进而改变细胞对病毒的敏感性。这一发现为工业疫苗生产细胞株的开发提供了新的思路。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 载体、菌株和细胞
•     1.1.2 主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 犬NECTIN4表达载体的构建
•     1.2.2 MDBK细胞转染
•     1.2.3 稳转细胞株筛选
•     1.2.4 RT-PCR检测稳转细胞株中NECTIN4 mRNA转录水平的表达
•     1.2.5 Western Blot检测NECTIN4的表达
•     1.2.6 间接免疫荧光观察NECTIN4和病毒外壳蛋白表达
• 2 结果与分析
•   2.1 质粒pCDNA-DogN4-Flag的鉴定
•   2.2 MDBK-N4细胞株的鉴定
•     2.2.1 逆转录PCR检测MDBK-N4细胞株中NECTIN4的表达
•     2.2.2 Western Blot检测MDBK-N4细胞株中NECTIN4表达
•     2.2.3 免疫荧光检测MDBK-N4细胞株中NECTIN4的表达
•   2.3 免疫荧光检测病毒感染后的MDBK-N4细胞
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨思鸣,蔡东焱,孙曼曼,陈霄,戴晓峰,白仲虎

关键词: 犬瘟热病毒,受体

来源: 生物学杂志 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江南大学附属医院肿瘤科

基金: 大北农集团北京科牧丰生物制药有限公司资助横向课题(合同编号150960),国家自然科学基金面上项目(基金编号31471251),江苏省自然科学基金面上项目(基金编号BK20161130),江苏省六大人才高峰项目(基金编号SWYY-128),江南大学医学院ESI培育专项(基金编号1286010241170320)

分类号: S852.65

页码: 7-10

总页数: 4

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